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为建立一种检测牛轮状病毒(BRV)抗体的双抗原夹心ELISA方法,本试验根据NCBI公布的BRV参考毒株NCDV序列,设计针对牛轮状病毒VP6基因的引物,用载体pCold-TF表达VP6蛋白,将表达的VP6蛋白作为捕获抗原,HRP标记的VP6蛋白作为检测抗原,建立检测BRV血清抗体的双抗原夹心ELISA方法。特异性试验表明该方法特异性良好;敏感性试验显示,该方法可检测到血清最大稀释倍数为1∶1 600;重复性试验表明,批间变异系数在4.21%~7.24%之间,批内变异系数为在1.35%~3.52%之间,重复性良好;临床样品检测表明与微球间接凝集方法检测结果符合率为94.4%。结果表明,建立的检测BRV血清抗体的双抗原夹心ELISA方法适用于临床样本的检测,可为牛轮状病毒的快速诊断提供技术支持。 相似文献
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