旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆与原核表达

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子(Tsserpin)基因序列设计1对引物,从旋毛虫肌幼虫提取总RNA,应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,进行限制性酶切后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-Tsserpin,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经PCR、限制性酶切分析及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行了诱导表达。SDS-PAGE分析表达产物,表达产物纯化后用Western-blotting鉴定Tsserpin重组蛋白的抗原性。PCR与酶切鉴定结果显示,构建的重组表达质粒pET30a-Tsserpin与预期结果一致。测序结果表明,插入片段为1122bp,编码373个氨基酸,与GenBank中旋毛虫Tsserpin基因的相似性为99%。含有pET30a-Tsserpin重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE分析结果显示,表达产物的分子质量约为48.5ku,而且主要以包涵体形式存在。Western-blot分析结果表明Tsserpin重组蛋白可以被旋毛虫感染猪阳性血清特异性识别,提示其具有良好的抗原性,可以作为猪旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。     

基列耶夫斯基思想演变历程及其宗教世界观形成原因初探

俄罗斯宗教哲学是最具俄罗斯民族特色的哲学思想.它既是俄罗斯民族精神内核与西方哲学思想碰撞交融的结果,也是当时的俄罗斯社会环境催生的产物,更是哲学家自身精神体验的成果.而哲学家宗教世界观的形成恰恰是俄罗斯宗教哲学诞生的原生因素.     

女性文学批评本土化过程中的语境差异

西方女性主义文学批评进入中国后遇到了完全不同于其理论源头的接受环境。这些接受环境差异包括:一、历史背景的差异,其主要表现为西方女性主义文学批评是先“破”后“立”,而中国本土则是先“立”后“破”;二、意识形态差异,主要表现为西方文化中的民主传统与中国传统文化中的集权思想形成的对照;三、学术背景差异,西方女性主义文学批评是以反拨“新批评”的学术革命开始的,而中国本土则得益于马克思主义的社会历史批评的滋养。这些差异既决定了中国女性主义文学批评的独特面貌,同时又呼唤西方理论本土化研究的新思路。     

<人体损伤致残程度鉴定标准>之特点和不足--写在该标准试行一周年之际

江苏省高级人民法院颁布实施的<江苏省人体损伤致残程度鉴定标准>(以下简称省标)试行已整一周年,做为当时省标研制的参加者之一,为了使省标能更加完善、合理,笔者对一年来我市两级法院执行、使用省标的情况做了专门的调查.     

群众路线背景下群众参与干部考核的制约因素及对策

群众参与干部考核有利于提高考核指标的科学性和考核结果的真实性。目前干部考核制度滞后于群众参与积极性,缺少群众参与,考核透明度和可信度受到质疑。群众说真话的氛围缺乏,信息公开机制不健全,意见表达渠道不通畅是制约因素。改变唯GDP的评价标准,营造敢说真话的氛围,提供群众参与的可靠渠道,利用大数据获取和认定考核信息是干部考核工作的当务之急。     

中国共产党维护和促进民族团结的百年历史实践

民族团结是中国共产党处理民族问题的重要原则,具有鲜明的长期性、系统性、认同性与时代性等特征.在百年发展历程中,中国共产党创造了具有中国特色的民族团结理论,并将其作为指导思想付诸维护和促进民族团结的伟大实践,不断推进我国民族团结进步事业的向前发展.加强党对民族工作的全面领导、依法治理民族事务等是中国共产党在维护和促进民族团结百年实践中积累的宝贵经验.     

我国国际民事程序法"国家本位"秩序价值初探

在目的价值定位方面,我国国际民事程序法存在着"国家本位"秩序观倾向.秩序总是必要的,更具根本性的,但秩序的类型亦是可以多元的.在中外民商法律秩序形成过程中,我国的国际民事程序法除必须体现国家意志之外,理应涵纳更多的当事人自主意思以及国际本位理念的成分,这也是修订我国民事诉讼法、仲裁法等程序法律时所要考虑的一个基本层面.     

生态文明建设的现实困境与路径选择

根据世界经济与我国生态文明建设的新形势与新要求,分析中国经济发展的瓶颈与难点,探讨如何借助政策导向优化产业结构,转变生产方式,大力实施产业生态化,可以构筑以观念创新、体制机制创新、技术创新为动力的全面推进生态文明建设的战略路径。     

“90后”大学生恋爱心理及矫正研究——以西安2000例“90后”大学生恋爱心理调查为例

恋爱是大学校园中持续被关注的热点话题,与前几代大学生相比,“90后”大学生表现出具有鲜明时代烙印的特点。通过对2000例‘90后”大学生的恋爱心理进行问卷调查,从恋爱现状、恋爱观、恋爱对象选择、恋爱行为、性心理及其行为等方面总结了其行为和心理表现,并在此结果上分析这一群体的心理特征,找出影响其特征的因素,旨在总结“90后”大学生的恋爱心理,对存在的问题提出矫正方法,寻求自我改变提升的方式。