内含肽和麦芽糖结合蛋白介导具有抗病毒活性牛α干扰素的表达

为了在大肠杆菌表达系统中高效表达具有抗病毒活性的重组牛α干扰素(BoIFN-α)蛋白,在BoIFN-α基因的上游无缝连接内含肽Ssp DnaB intein(SDI)序列,然后克隆至pMAL-c2X载体中,构建含有内含肽和麦芽糖结合蛋白基因的表达载体pMAL-SDI-BoIFN-α,将重组载体转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达。结果表明,融合基因获得高效表达,且产物主要以可溶形式存在。经直链淀粉树脂纯化后可得到纯度较高的目的蛋白。经MDBK-BVDV(牛病毒性腹泻病毒)干扰素活性系统检测,证实干扰素融合蛋白具有抗病毒活性。     

鸭瘟病毒gD基因胞外区的原核表达及ELISA检测方法的建立与应用

为研究分离鉴定的鸭瘟病毒gD基因(GenBank登录号:EU195085)及其编码蛋白的应用,采用PCR方法从鸭瘟病毒CHv毒株DNA中获取编码gD胞外区基因729bp片段,构建重组表达载体pET32a-gD,转化受体菌E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达重组gD蛋白。结果显示,该重组蛋白分子质量约为31ku,为gD胞外区与载体6个组氨酸的融合表达产物,与gD胞外区预期大小一致(27.5ku);经离心收集菌体,超声裂解后,SDS-PAGE分析结果显示,gD蛋白主要以包涵体形式表达;将包涵体溶解后进行Ni-NTA亲和层析可较好地纯化重组蛋白。Western-blot检测显示,gD蛋白能与兔抗鸭瘟病毒血清特异结合,具有较好的免疫反应性。利用该蛋白建立了ELISA检测方法,优化了该方法的各个反应条件,并进行了初步应用,为该方法的临床应用奠定了基础。     

牛型布鲁氏菌铁离子转运蛋白基因的克隆及其表达蛋白的生物学特性

将通过PCR技术扩增的牛型布鲁氏菌铁离子转运蛋白(Brucellaferric uptake,BfuA)基因克隆至表达载体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-BfuA,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,在IPTG诱导下表达出大小约为100ku的融合蛋白His-BfuA。Western-blot分析表明,His-BfuA能与布鲁氏菌阳性牛血清发生特异性反应,表明BfuA具有免疫原性。用His-BfuA作为包被抗原,对35份布鲁氏菌阳性牛血清进行ELISA检测,结果所有被检血清均为阳性反应,表明BfuA为潜在的可用于牛型布鲁氏菌诊断的靶蛋白。此外,对BfuA的亚定位结果表明,BfuA为膜蛋白;对His-BfuA的纤连蛋白结合活性及纤连蛋白溶酶原结合活性的试验结果表明,His-BfuA不具有上述2种活性。上述结果为牛型布鲁氏菌病诊断方法的建立及亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

改革开放以来我国企业民主管理制度研究综述

改革开放促进了企业民主管理制度的发展，政府在大力发展经济的同时，必须保护劳动者权益 不受侵害。然而在实践中，受到效率优先思想的影响，企业的民主管理制度未得到应有的重视，因而反映在理 论研究中的文献数量起伏不定、总体偏低。要实现十九大报告提出的完善协商协调机制，构建和谐劳动关系， 企业民主管理需要发挥更重要作用。     

大鼠骨骼肌挫伤后Fzd2表达与损伤时间的关系

目的检测大鼠骨骼肌挫伤后卷曲受体蛋白2(frizzled-2,Fzd2)mRNA及其蛋白表达量与损伤时间的关系,探讨其是否可以作为损伤时间推断的指标。方法利用RT-qPCR和Western印迹法检测正常对照组及损伤后4~48 h每4 h大鼠骨骼肌中Fzd2 mRNA和蛋白水平的表达量。结果 Fzd2 mRNA在损伤后24 h、36 h、40 h相对表达量增高,24 h组表达量达正常对照组的两倍(P0.05);而Fzd2蛋白在损伤后相对表达量变化不明显(P0.05)。结论大鼠骨骼肌损伤后Fzd2 mRNA在一定时间内的表达变化情况可以作为多指标联合推断损伤时间的依据。     

The Understanding and Interpretation of the ICCPR in the Context of China's Possible Ratification

Chna signed the International Covenant on Civil and PoliticalRights in 1998 and is preparing for its ratification. In consideringthe ratification, the knowledge of how to correctly interpretand understand the Covenant is crucial. In monitoring the implementationof the Covenant, the Human Rights Committee has used variousmechanisms and rules in interpreting the Covenant to meet thespecific object and purpose of the Covenant, and thus developeda rich jurisprudence with respect to the interpretations ofthe Covenant. However, the interpretations of the Covenant bythe Committee have not been adequately taken into account inthe research done by Chinese scholars on the Covenant. The researchon the interpretations therefore must be further strengthenedin order to more effectively facilitate the ratification processin China.     

三网融合对互联网信息监控的影响及应对研究

互联网信息监控是公安机关维持网上秩序的基础工作和公安情报信息的重要来源,而三网融合是信息业发展的必然趋势,是互联网的前进方向。为了积极应对三网融合对互联网信息监控工作带来的监控对象扩大、数量增多、难度提高等影响,网监部门可以从技术和管理两个层面做出应对,包括研发警用RSS软件、专门针对QQ群和社交网络的搜索系统、研究视频检索技术、多源信息整合技术及建立起自上而下的信息监控机制等方式,以达到网监工作与技术发展同步的要求。     

县委书记权力风险规避机制探析

县委书记在地方是一个位高权重岗位,但其权力风险也在不断加大,稍有不慎就会陷入腐败的泥沼。如何从根本上规避县委书记的权力风险？必须尽快建立和完善一整套权力风险规避机制,主要内容包括：合理分权,建立权力配置机制;增加＂成本＂,创新权力制约机制;发扬民主,完善干部选拔机制;有效制衡,健全权力监督机制;奖惩并用,构建激励保护机制。     

科学发展观与统一战线时代使命

进入改革开放历史新时期,统一战线工作肩负着一系列新的责任和时代使命。科学发展观为统一战线时代使命提供了新的实践导向。贯彻实践科学发展观,不辱统一战线肩负的时代使命,需要加强统一战线自身建设,更好地为建设社会主义和谐社会服务。     

英语的音韵之美

语言内在的音乐性驱使人们说话或写作时讲究适口顺耳,竭力展示语言的韵律,分享审美愉悦。英语作为表音语言,富有音乐性及韵律感。英语的音韵之美集中体现在元音、重音、押韵、拟声四个方面。英语学习者应当认识它们,了解它们,并争取运用到英语实践中去。