猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因在毕赤酵母中的表达

采用RT-PCR方法从猪囊尾蚴总RNA中扩增出TsCL-1基因并构建了真核表达载体pPIC9K-TsCL-1,pPIC9K-TsCL-1电转化毕赤酵母GS115.采用G418抗性梯度筛选多拷贝重组菌株,经甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot分析重组蛋白的表达情况.结果显示,TsCL-1与GenBank登录的TsCL的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.8%和100%,与肝片吸虫和大片吸虫组织蛋白酶氨基酸的同源性为76.3%.TsCL-1基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物的分子质量为42 ku左右;Western-blot分析表明,表达产物具有反应原性.     

甘肃省部分地区牛皮蝇蛆病的流行病学调查

为掌握牛皮蝇蛆病在甘肃地区的流行动态,2003～2005年在甘肃省玛曲县、天祝县、平凉市崆峒区的3个屠宰场剖检1 827头牛.结果发现,这3个县(区)均有牛皮蝇蛆病的感染,其中,玛曲县、平凉市崆峒区的皮蝇2期幼虫在牛食管的寄生率以10月份为最高,分别为48.5%和7.8%.表明,药物防治的最佳时间为10月份.     

舆论环境的变迁与政治传播观念的变革

信息化时代舆论阵地呈现网络化,公众主体意识觉醒,主流舆论失去垄断性,社会矛盾快速表面化,国内问题容易国际化。舆论环境变化给舆论引导带来困难,信息把关难以控制,民间舆论稀释了政府声音,传统媒体遇到公信力危机,国际传播陷入了舆论的旋涡。要推行民主执政,公开政务信息;收集研判舆情,及时化解国内意见;熟悉传播规律,搞好国际传播。     

司法鉴定机构仪器设备基本配置标准的探讨

2005年10月1日《全国人大常委会关于司法鉴定管理的决定》（下称《决定》）实施以来，司法鉴定机构的准八条件逐步明确、细化。2006年9月1目司法部下发了《司法鉴定机构仪器设备基本配置标准（暂行）》（下称《暂行标准》），为司法行政机关开展司法鉴定机构审核登记及检查、评估提供了具体标准。也为司法鉴定机构的发展和完善指明了方向。但实行《暂行标准》一年多来，我们可以感到其与司法鉴定体制改革最大限度地利用社会资源的初衷有差距．也与司法鉴定实践存在着一定差距，为此笔者拟对完善《暂行标准》进行探讨。     

猪带绦虫六钩蚴45W-4BX抗原的制备及其杂交瘤细胞株的建立

为获得针对猪带绦虫六钩蚴(TSO)45W-4BX抗原的杂交瘤细胞株,用IPTG对TS045W-4BX的重组质粒pGEX-4BX进行了诱导表达,并采用Sepharose-4B层析技术对表达产物进行纯化,运用SDS-PAGE和Western-blot分别对其纯度和活性进行了检测.分别用弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂乳化已纯化的猪带绦虫TS045W-4BX重组抗原,随后用其分别免疫BALB/c小鼠3次,检测血清抗体效价呈阳性.之后,再进行加强免疫,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0细胞进行融合,经TS045W-4BX抗原和GST抗原双系统间接ELISA筛选,最终获得了18株抗TS045W-4BX抗原的杂交瘤细胞株.采用有限稀释法对其中的4株进行5次亚克隆,最终获取了4株稳定分泌针对TS045W-4BX抗原的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,金标试纸条法鉴定其抗体亚类均属于IgG1类,轻链为κ型.     

浅谈治安调解的形成及作用

首先界定治安调解的概念出发,治安调解的形成有三个原因:历史原因、符合公安机关服务社会的职能、顺应了国际adr发展的潮流.治安调解在构建和谐社会中的重要作用是:有利于增进社会和谐、有利于防止矛盾激化、能够降低解决争讼的成本、有利于发挥公安机关的作用密切警民关系.     

网络交易的纠纷解决机制探析——基于民间法与国家法互补的视角

高风险一度是网络交易发展的瓶颈所在。近年来,网络交易平台发挥网络科技的优势,为交易者提供了一些独特的风险防范和纠纷解决机制,极大地促进了网络交易的发展规模。但此种民间型机制的局限和优势一样明显,未能有效＂定分止争＂。要真正保障网络交易的稳定发展,最大程度上解决交易纠纷,除进一步发展和规范民间型机制外,尚需对传统的官方型机制予以适当的＂网络化改造＂,最终形成两者的良性互补。     

我国鉴定人出庭注意事项

随着鉴定人出庭作证的呼声日益加强，诉讼中当事人申请鉴定人出庭的案件不断增加。由于以往鉴定人出庭的比例很低，并且大多数鉴定人在出庭经验略显不足。以2009年被山东省高院指定为鉴定人出庭工作试点单位的济南市法院为考察对象，就鉴定人出庭应注意的问题作一探讨。     

鸭瘟病毒TK基因的克隆及其分子特性分析

通过测定动物疫病与人类健康四川省重点实验室构建的鸭瘟病毒(duck plaque virus,DPV)DNA基因文库中重组质粒的DNA序列,得到了该病毒胸苷激酶(TK)基因的ORF.采用PCR扩增出了DPV TK基因并将其克隆到pMD18-T载体上,之后对重组质粒进行了PCR和双酶切(BamH Ⅰ Hind Ⅲ)鉴定,并利用生物信息学软件Genscan、ProtScale、SignalP2.0、Scansite、TMpred、Prosite、DNAStar以及在线Predictprotein等分析了TK基因的分子特性.结果显示,DPV TK具有疱疹病毒的典型特征,含有ATP结合结构域和核苷酸结合结构域2个功能结构域,且具有与功能相关的磷酸化位点和氨酰化位点;编码的多肽链中亲水区域大于疏水区域,是一种膜外蛋白.DPV TK基因与禽类疱疹病毒(α-疱疹病毒)的进化关系最近.