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当今预防猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的灭活苗和弱毒苗都存在不可避免的局限性,所以研制新型疫苗势在必行。病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)在形态结构上与天然病毒粒子无异,生物安全指数高,是理想的传统疫苗替代品。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)粒子主要由能够诱导产生中和抗体的GP5蛋白和具有强细胞免疫力的M蛋白组成基本框架结构。本研究以2型高致病性PRRSV的GP5蛋白和M蛋白为研究对象,通过Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统,构建标记型PRRSV VLPs,同时探索核衣壳蛋白N对VLPs形成的影响。在本试验中将含有Myc标签的GP5(Myc-GP5)和含有His标签的M(His-M)蛋白基因分别克隆至pFastBac dual载体的p10和pH双元启动子下;N蛋白基因克隆至pFastBac HTB载体上,转染sf9和Highfive细胞后,GP5、M和N蛋白均被成功表达。透射电镜观察结果表明,Myc-GP5和His-M能够自动组装成VLPs,并且与天然PRRSV形态一致,具有双层膜结构,直径大小在40~60 nm。采用抗M蛋白的家兔血清进行免疫电镜观察,结果显示,Myc和His双标记型VLPs与天然病毒一样都能够被金颗粒标记,而且共感染的N蛋白不影响标记型VLPs的组装。本研究首次采用昆虫杆状病毒表达系统成功制备了PRRSV的双标记型VLPs,具备与天然病毒相似的特性,为开发高效安全以及能够区分感染与免疫VLPs疫苗奠定了基础。 相似文献
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目的基于基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像(matrix assisted laser desorption/ionizationtime of flight imaging mass spectrometry,MALDI-TOF-IMS)技术建立弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)大鼠脑组织内蛋白差异化表达的质谱成像方法。方法应用AutoflexⅢ MALDI-TOF质谱仪在质荷比1 000~20 000范围内对DAI组和对照组脑组织进行质谱扫描,利用Clin Pro Tool 2.2软件对两组数据进行统计学分析,挑选出存在表达差异的蛋白质分子进行质谱成像,观察不同质荷比的蛋白质分子在脑组织中的分布情况。结果质荷比为4 963、5 634、6 253、6 714及7 532的5个蛋白质分子在DAI大鼠脑组织内表达量存在差异。结论 MALDI-TOF-IMS可用于大鼠DAI后脑组织内差异蛋白的研究,初步建立了质谱成像技术检测DAI大鼠脑组织中差异蛋白分布的分析方法。 相似文献
234.
案情回放
李某于2007年5月进入北京某公司工作,岗位为平面设计,双方没有签订劳动合同.李某月工资为4000元,公司也没有为李某缴纳基本医疗保险费.2011年1月31日至2011年2月24日期间,李某在山东某医院住院治疗喉癌.2011年2月25日至2011年8月12日,李某先后三次在北京某医院住院化疗.李某先后因治病共支付医疗费7万余元.2011年8月1日,公司开始为李某缴纳基本医疗保险费,但没为李某办理2011年8月1日以后的医保报销手续. 相似文献
235.
目的建立了鸦片中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可汀5种常量生物碱和牛心果碱、劳丹宁、劳丹素等12种痕量生物碱同时分离鉴定的超高效液相色谱-高分辨四极杆飞行时间串联质谱(UPLC/Q-TOF)方法。方法采用Agilent Eclipse Plus C18RRHD(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以10 mM甲酸铵溶液和乙腈体系梯度洗脱,使用ESI离子源,正离子模式下采集数据。结果借助UPLC的快速分离和Q-TOF-MS测定的精确分子量和二级碎片信息,实现了17种生物碱的检测。应用SIMCA-P软件对78份国产鸦片和200份缅甸产鸦片进行偏最小二乘法判别分析(partial least squaresdiscriminate analysis,PLS-DA),比较不同地区鸦片样品中生物碱的差异,建立了区分国产鸦片和缅甸产鸦片的判别方法。结论所建立的方法用于鸦片样品中常量和痕量生物碱的检测及鸦片样品的产地判别,具有快速、高效、灵敏、准确的特点。 相似文献
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237.
乌云格日勒 《内蒙古统战理论研究》1999,(Z3)
发展乡镇企业是农民走向富裕的必经之路,是实现农村经济专业化、商品化、现代化的有效途径。乡镇企业的发展,促进了整个国民经济的发展。存在的问题。中国的乡镇企业一般指在农业社区和城市郊区农民所办的非国有制企业,它们的经营活动涉及到农业、工业、建筑业、交通业、商业、饮业、服务业等部门,但主要从事农村非农产业活动。从严格意义上讲,中国的乡镇企业并不是改革之后才萌生和成长起来的,其前身社队企业早在50年代后期就出现了。由于受资源动员的行政性和发展的社区性的约束,自其产生后的20余年中,经历了极为曲折和缓慢的发展… 相似文献
238.
统一多民族的社会主义中国,经过改革开放20年来的发展,使国家的经济日益发展,政局进一步稳定、各民族间的平等、团结、互助关系更加巩固,欣欣向荣的社会主义中国为国际共产主义运动史上增添了光辉的一页,为全人类的发展与进步、为各国成功的解决国内民族问题树立了榜样。但是多民族的中国也同其他国家和地区一样,存在着民族问题,而且由于社会主义中国所特有的发展道路相联系,中国的民族问题有了自己的特点。这一特点的正确认识和理解对于缩小民族地区与发达地区的差距、巩固安定团结的政治局面、巩固社会主义民族关系、促进各民族共… 相似文献
239.
240.
通过豚鼠肝细胞印片,观蔡肝细胞核仁组成区嗜银蛋白死后变化,探讨AgNOR死后变化与死亡时间两者之间的关系。结果显示:AgNOR的死后变化与死亡时间有密切的关系.随着死亡时间的延长,AgNOR颗粒形态越来越不清楚。提示AgNOR的形态改变可以作为推断死亡时间的一种新标志。 相似文献