基于thyA基因的大肠杆菌染色体-质粒平衡致死系统的构建与应用

将大肠杆菌DH5α在含胸腺嘧啶核苷和三甲氧苄二氨嘧啶的琼脂平板上培养,获得了遗传稳定的ThyA-大肠杆菌DH5α21株。用PCR扩增野生菌和ThyA-大肠杆菌的thyA基因,将测定的序列与野生型thyA基因相比,6号突变株的thyA基因第92位碱基发生G→A转换,导致第31位甘氨酸被天冬氨酸替换,4、7和13号突变株的thyA基因从第73位连续缺失6个碱基,导致第25位甘氨酸和第26位苏氨酸缺失。经PCR扩增的包括启动子在内的鼠伤寒沙门菌thyA基因与野生型大肠杆菌DH5αthyA基因的同源性为86%。以鼠伤寒沙门菌thyA基因为选择标记,构建了含人溶菌酶基因的真核表达载体pDTALYZ,以ThyA-大肠杆菌为受体菌,构建了染色体-质粒平衡致死系统。在相同条件下,pDTALYZ转化ThyA-大肠杆菌的效率高于以卡那霉素抗性基因为选择标记的pcDNAKLYZ转化野生大肠杆菌的效率;在发酵培养过程中,两种重组菌的生长速率相似,质粒丢失率分别为25%和10%,湿菌重分别为57.68 g/L和51.00g/L,重组质粒产量分别为134.9 mg/L和135.0 mg/L。     

论高校思想政治理论课实践教学资源利用中的分散、闲置、浪费诸问题

高校思想政治理论课实践教学资源稀缺，不能满足正常的实践教学需要，除了自身供给不足的原因外，高校思想政治建论课实战教学资源利用中的分散、闲置、浪费诸问题。也是影响供需平衡的重要因素。资源的分散、闲置、浪费，原因有别，情形也各不相同，其隐蔽性几乎不为人所察。     

公职人员易腐败的心理及预防对策

腐败是一种利用国家赋予的公权去谋取私利的非法行为。当今社会腐败现象滋生蔓延的土壤和条件依然存在,且在一些领域愈演愈烈。公职人员利用手中的权利搞腐败的例子,屡见不鲜。中共中央颁布的《建立健全教育、制度、监督并重的惩治和预防腐败体系实施纲要》,是从源头上防治腐败的根本举措,是深入开展党风廉政建设和反腐工作的纲领性文件。我们从事纪检监察工作多年,从办案中发现, “好官总是相似的,而贪官则各有各的贪法和迹象”。但发生腐败有一定的规律和迹象,了解和掌握易发生腐败的迹象,对于各级组织机构建立职务犯罪预防体系,加强防范措施,预先提出警示,减少或防止腐败的发生具有重要的作用。