SARS冠状病毒与其他冠状病毒基因序列的比较及S糖蛋白结构与功能的预测

去冬今春 ,非典型肺炎即严重急性呼吸道综合症 (Severeacuterespiratorysyndrome ,SARS)在 32个国家和地区发生和流行 ,导致数千人感染 ,数百人死亡。在一段时间里由于对其病因、疫源、传播规律、防治措施等不甚了解 ,从而引起广大公众和学术界的广泛关注。 2 0 0 3年 3月 17日世界卫生组织(WorldHealthOrganization ,WHO )建立起由 10个国家的 13个实验室组成的协作研究和监测网络[1] 。至 3月 2 2日 ,香港大学首先宣布分离出了引起SARS的 1种未知冠状病毒[2 ] ;4月 12日 ,加拿大BC肿瘤研究所基因组科学中心 (BCCancerAgency’sGe…     

口蹄疫病毒Asia 1/JSWX株基因组全长感染性克隆的体外拯救与序列分析

通过反转录聚合酶链反应,获得了口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JSWX株基因组3′端长片段(长约7.5kb)和5′UTR中ploy(C)前后的2个短片段。5′UTR的2个短片段经融合PCR扩增得到长约710bp的片段。用引物在基因组5′末端引入AflⅡ酶切位点和T7启动子,在5′UTR内引入SpeⅠ酶切鉴定位点,在3′末端引入NotⅠ酶切位点,将融合片段和3′端长片段顺次连接到载体pSL1180。经T7体外转录系统获取的RNA转录本与脂质体共转染BHK21细胞。测序结果表明,构建的病毒基因组全长cDNA为8 197nt,分别包括1个长为1 095nt的5′UTR[含有1个17nt的ploy(C)];1个长6 990nt的ORF;1个长为93nt的3′UTR;之后是18nt的poly(A)尾巴。该全长cDNA克隆与Asia 1/Jiangsu/China/2005株基因组序列的同源性为98.4%。测序和酶切鉴定结果均表明,该口蹄疫病毒株全长cDNA克隆已构建成功,该方法极大地简化了获得FMDV全长cDNA克隆的过程。通过反转录聚合酶链反应、间接免疫荧光试验和蚀斑试验等鉴定,本试验获得了感染性分子克隆;体外拯救获得的基因工程病毒连续传代培养后,可致BHK21细胞产生病变。上述结果表明,构建的cDNA克隆可以作为基因操作的载体,为深入研究安全性好、稳定性高和免疫原性强的基因工程疫苗奠定了基础。     

弘扬尊老敬老美德 提升敬老服务水平 漳平医保中心获“敬老文明号”荣誉称号

日前，漳平医保中心被龙岩市老龄委授予市级“敬老文明号”荣誉称号。 漳平医保中心对尊老敬老活动高度重视，“敬老文明号”创建活动以来，医保中心紧密结合自身工作实际，立足自身岗位，积极开展尊老敬老活动，以实际行动为老年人办实事、办好事．推动尊老爱幼、老少共融良好社会风尚，不断提升敬老为老服务水平，将敬老文明活动落到实处，敬老文明号创建活动取得了良好的社会效果。     

口蹄疫病毒O/China/99株VP1基因植物种子特异性表达载体的构建及农杆菌的导入

根据植物组成型表达质粒pBin438的限制性酶切位点及FMDVVP1的核苷酸序列设计并合成引物,从种子特异性启动子7S质粒pU82质粒中扩增7S启动子,经HindⅢ和BamHⅠ酶切,与经同样双酶切的植物组成型表达载体pBin438大片段连接,经酶切、PCR鉴定及序列分析,种子特异性表达载体p7SBin438构建完成。从FMDVVP1基因的pGEMVP1质粒中扩增VP1基因,经BamHⅠ和SalⅠ双酶切后,与p7SBin438质粒酶切后的大片段连接,经酶切、PCR及测序鉴定,FMDVVP1基因已置于种子特异性启动子7S下游,成功构建了FMDVVP1基因的种子特异性表达载体p7SBin438VP1。通过三亲交配法,将表达载体p7SBin438VP1导入根癌农杆菌,为研究FMD可饲疫苗奠定了基础。     

亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒VP1基因真核表达载体的构建及其免疫活性的初步分析

提取亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒总RNA,用特异性引物通过RTPCR反应获得了约750bp的核酸片段,将其与pGEMTEasy载体连接,并转化大肠埃希氏菌JM109。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序,证明所克隆的片段含有完整的VP1基因;将重组质粒与表达载体pcDNA3.1( )分别用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后连接,构建成重组表达质粒,转化宿主菌DH5α,筛选阳性克隆。测序结果证明,目的基因正确插入到表达载体中,命名为pcDNAV;用同样方法将IL18基因插入pcDNAV中,命名为pcDNAVI。用pcDNAVI免疫豚鼠,2周后加强免疫1次,每周用ELISA检测豚鼠血清中的抗体水平。结果表明,pcDNAVI可引发机体产生体液免疫。     

关于违法合同效力的若干问题分析

《民法通则》第58条规定:"违反法律或社会公共利益的"合同无效.但由于对法律的定义没有作出严格的解释,实践中常常将法律、行政法规、地方性法规、部门规章以及地方性政府制定的各种规范性文件都作为合同效力的判断依据,甚至把有些地方的土政策也作为判断合同效力的依据。这使得许多不应该被宣告无效的合同被宣告无效,不符合鼓励交易的原则,也不符合当事人的利益。有鉴于此,《合同法》把判断合同效力的依据限制     

战后美国青少年的心理历程──浅析《麦田里的守望者》主人公的性格特征

美国当代作家塞林格的小说《麦田里的守望者》，在美国是一本畅销书，产生了轰动效应，并广泛流传于世界各地。本文具体剖析小说主人公霍尔顿的性格特征，和他从憎恶虚伪、追求纯真到最终屈从社会现实的心理历程，揭示战后美国一代青少年孤寂、彷徨、痛苦的内心世界。     

离婚财产分割若干问题的社会性别分析

根据法律和政策中体现的社会性别假设的不同,法律政策所采取的性别平等模式也不同。本文选取离婚财产分割所涉及到的法律政策,从社会性别视角加以分析,揭示其对男女两性所带来的不同影响。同时总结学界运用社会性别分析视角对离婚财产分割若干问题所作的论述,以期推动立法者在制定法律政策时,采用社会性别分析的视角,从根本上促进男女两性的平等。     

对高职院校公共英语实用性教学的思考

对于高职院校来说,是否具备培养掌握一定英语运用能力的实用性人才的教学手段和方法,成为衡量英语教学成效的重要指标。但实际教学过程中,高职院校公共英语教学在相当程度上仍然囿于传统教学模式的瓶颈而不能自拔,教学方法上鲜有革新突破,使得高职学生的英语实际应用能力远远不能适应社会发展的需求。应探讨如何突出职业性特点和实用性目标,创新教学方法,提高学生英语应用能力,满足社会对人才的需求。