重组猪IgGⅡB类Fc受体蛋白的原核表达和抗体的制备

根据GenBank中猪IgGⅡB类Fc受体剪接异构体cDNA(swFcγRⅡB)基因序列(FJ608551),利用Primer5.0软件设计合成了1对特异性引物,扩增swFcγRⅡB去掉胞内区和跨膜区的基因,PCR产物经KpnⅠ+EcoRⅠ双酶切后,将截短的swFcγRⅡB基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-swFcγRⅡB,在IPTG诱导下成功表达了分子质量约为40ku的融合蛋白swFcγRⅡB-His,该表达蛋白在细胞质中主要以不溶性包涵体的形式存在。原核表达蛋白经纯化免疫小鼠,制备鼠源swFcγRⅡB封闭抗体,ELISA检测抗体效价为1:5120,具有高度特异性。Western-blotting检测表明,制备的多克隆抗体可以与融合蛋白swFcγRⅡB-His特异性结合。     

乳牛子宫内膜抗菌肽BNBD5基因的克隆及其原核表达

为研发防治乳牛子宫内膜炎的抗菌肽生物制剂,根据已发表的牛抗菌肽基因序列设计了1对引物,用试剂盒提取乳牛新鲜子宫内膜总RNA,经RT-PCR扩增,将克隆的抗菌肽BNBD5基因全长编码区的cDNA连接到原核表达载体pET30a中,经IPTG诱导原核表达,通过Western-blot检测融合蛋白BNBD5的表达水平.结果表明,RT-PCR扩增出的cDNA片段长138 bp,编码45个氨基酸的多肽,多肽中合6个保守半胱氨酸残基.用Blast程序进行检索比较显示,克隆出了牛防御素家族成员BNBD5基因,并成功构建了pET30a-BNBD5载体,经IPTG诱导,pET30a-BNBD5原核表达产物的相对分子质量约为10 ku,与预期的融合蛋白大小一致,证实构建的重组质粒能够在大肠杆菌中表达.     

浅议社会治安防范机制社会化

治安防范机制社会化是新形势下治安工作发展的必由之路,社会化具有其理论和实践上的依据。坚持走社会治安防范机制社会化的道路,就要坚持党委和政府的领导,坚持防范主体多元化、建设形式多样化、防范内容宽泛化、责权利的市场化。社区警务建设是其有效运转的基石,其持久发展的关键是建立完善并落实领导、法律、警力、监管等四个方面的保障体系。     

我国监狱生产体制改革的几点思考

我国虽确立了监狱生产体制改革的基本目标和方向,但在具体运作上仍存在很大争议。主要包括:体制内模式是公营市场化体制还是政府使用制。在体制外模式上是否允许民间介入罪犯劳动生产,如何运作等等。本文通过对我国传统监狱生产体制存在问题的分析,就体制内、外模式的选择运作进行了分析和展望。     

论物权行为与债权行为的区分原则

物权行为与债权行为的区分是客观存在,物权行为与债权行为的区分法理基础是支配权与请求权的区分,否认物权行为与债权行为的区分原则的观点是不妥当的,区分原则具有合理性.我国物权法应当承认区分原则.     

水面使用权的法律规制

水资源对人类的存在、发展有着积极的、不可或缺的作用,我国水资源分布南方多、北方少,在开发利用中,需水最急剧增加,供需矛盾日渐突出;水的利用率偏低,又因水源污染严重,加剧了缺水危机等,面对水资源有限和浪费的现状,设计合理的水市场成为重新配置水资源有效机制的必需,解决的途径是完善现行立法,合理规制水面使用权的取得、转让、终止及水面使用权人的权利与义务等内容,建立水权制度,进而揭示水面使用权保护机制对于我国民事立法所具有的创新意义.     

海外华侨华人社团与“一带一路”安保体系建构

华侨华人是中华民族的海外延伸和有机组成部分,而侨团是海外华侨华人的主要组织形式。侨团既是维护华侨华人权益的重要力量,又是推进“一带一路”建设的重要战略资源。海外侨团数量众多、分布广泛,在新时期呈现出联合化、国际化、年轻化、多元化、专业化的特征,具有参政议政和参与侨务管理的崭新功能。在海外安全形势日益严峻的形势下,中国海外安全需求与供给失衡,海外中国企业与公民面临安全利益保障不足的困境。在“一带一路”安保体系的构建中,海外侨团与私营安保公司、企业等主体都是政府官方安保力量不可或缺的有益补充。海外侨团拥有不可替代的独特优势,熟谙住在国舆情社情民情、政商人脉通达、掌握双重语言文化,但新生代华人的多元身份认同和华文媒体的发展困境也为安保体系的构建带来了一定的挑战。充分发挥海外侨团在“一带一路”安保体系中的“安全杠杆”作用,应进一步营造“大侨务”工作氛围、加强侨团自我建设和团企共建、完善“华助中心”服务平台以及推广海外安全联防机制。     

多重制度逻辑下的国有企业职工安置政策实施研究 —— 以东部某钢铁集团为例

压减产能大背景下国有企业职工的安置政策实施情况。以某东部钢铁集团为例,考察第一阶段该集团的政策实施结果,发现集团指标已经被完成,集团总人数的减少和新的竞聘方式带来了人力资源效率的提升。然而,在政策制定过程中,公司的职工代表大会流于形式,其背后是企业市场逻辑和单位逻辑间的较量。同时,在政策实施过程中,公司强制职工"自愿"居家离岗,造成政策走样。政策走样的表面原因在于政策执行过程中集团对公司有指标要求,但究其根本,是市场逻辑和人本主义逻辑间的冲突。最终市场逻辑和单位逻辑协调使政策变得扭曲。单位逻辑在处理这一冲突过程中虽然发挥了重要作用,但它的存在也牺牲了市场逻辑的部分效率。多重制度逻辑分析为政策实施过程中的政策偏离提供了综合性的理论视角。     

从混种、换种制度看侗族传统生计的抗自然风险功效——以黎平县黄岗村侗族糯稻种植生计为例

贵州黎平县黄岗村由于地理位置偏僻,侗族传统生计在这里保存的极为完整.至今传承着世代精心培育的20多种糯稻品种.当地侗族居民通过糯稻多品种混种、换种制度和灾害预警机制,成功地化解了虫害、病害等自然风险.黄岗侗族的这一农事制度的抗御自然风险功效,不仅对我国西南地区各民族恢复传统生计树立了信心,也为这一地区推广生态农业提供了宝贵的实践经验和有益的借鉴模式.     

基于胜任力的政府公务员绩效评估体系构建

绩效评估是公务员管理中的重要环节。在我国现行公务员绩效评估体系中,存在着绩效指标效度较低,绩效评估方式陈旧、单一,评估主体的非专业化和评估过程的形式化,绩效管理功能严重缺失等问题。从胜任力的视角建立公务员胜任力模型,首先要做好职位分析工作;其次制定出具体化的针对性强的绩效标准体系;最后从国内建立公务员胜任力模型的实践来看,基本是以问卷调查法为主。胜任力模型建立后,绩效评估的主要工作步骤就是绩效评估目标的设定、实施、控制与反馈。