小反刍兽疫病毒H糖蛋白基因原核表达载体的构建及表达

参照GenBank中小反刍兽疫病毒(PPRV)H抗原基因序列,人工合成了PPRV H基因,将其克隆至pUC18-T质粒中,转化E.coliJM109感受态细胞,构建并选择PPRV H基因克隆重组质粒,经核苷酸序列分析正确,将其克隆至pBAD/Thio-TOPO载体中,转化E.coliTOP10感受态细胞,核苷酸序列分析证实,成功构建了PPRV H基因重组表达载体。经不同浓度L-阿拉伯糖诱导,可稳定、高效地表达PPRV H抗原。SDS-PAGE分析结果表明,用终浓度为0.2 g/L的L-阿拉伯糖诱导5 h的表达量最高,表达蛋白为分子质量约83 ku的融合蛋白;经薄层扫描分析,其表达产量约占菌体总蛋白的10%。Western-blotting检测表明,诱导的蛋白能与PPRV H蛋白单抗发生特异性反应,说明表达的融合蛋白中含有PPRV H糖蛋白抗原。     

从国际法看中美关系中的台湾问题

台湾问题是中美关系中十分敏感的重要问题 ,回顾台湾问题形成的历史 ,从国际法的角度对台湾问题进行法理分析 ,说明美国对中国内政干涉的不合法性 ,由此也可看出国际法在当前国际政治中的重要性和局限性。     

由政府的代议性质看透明政府的构建

主权在民是现代宪法的一项重要原则。确认主权在民的国家 ,其政府无一例外地具有代议性质 ,人民亦享有知情权和参与权。为保证人民知情权和参与权的实现 ,政府必须是透明的政府。透明政府包括政府组织的公开、政府决策的公开和政府行政行为的公开。     

农村“留守儿童”之现状、走向与对策探讨--以湘北H村“留守儿童”群体为实证分析对象

对于农村“留守儿童”问题，我国学术界早于上个世纪90年代初期已开始关注并进行研究。研究的重点主要集中在农村“留守儿童”的道德品质问题、人身安全问题、监护人类型问题等方面，并由此提出解决农村“留守儿童”教育问题的对策与建议。但是，农村“留守儿童”的成因是复杂的，尤其是在城市化的大背景下，随着农业税的取消和国家力量在乡村秩序中的逐步退出，而新的《义务教育法》又存在某些缺陷，使得新时期“留守儿童”的走向更加难以把握。本文从社会主义新农村建设的角度，通过对湘北H村的人类学实证研究，对农村“留守儿童”之现状与走向进行考察，并提出了相关对策。     

在权力与权利夹缝中生存——我国行政审判法官职业理念分析

从事行政审判的法官,穿行于行政权、司法权与公民权之间,形成了自己独特的职业理念。这种理念是在我国法院制度现代化进程中形成的,它是以法官职业为基础,充分利用本土法律文化资源的结果。     

芦根中甾体的GC-TOFMS鉴定

目的：提取并测定芦根中甾族化合物的成分和相对含量。方法：采用气相色谱．飞行时间质谱法进行测定分析。结果：芦根提取物中含有4种甾体化合物。结论：该鉴定方法对药物成分的结构分析和临床用药具有指导意义。     

谈会计信息失真的原因及对策

会计信息是一种商业语言,它的质量对经济管理起着至关重要的作用。但目前我国会计信息失真的情况相当普遍。造成会计信息失真的主要原因有:内部控制制度不健全、会计监督体系不完善、会计人员素质不高,最关键的是内部经济利益的驱动,当然政府行为也不够规范。需要采取的对策是建立健全内部控制制度、进一步完善会计监督体系、加强会计职业道德教育、相应的建立一套新的适合经济发展的业绩考核指标体系、进一步转变和规范政府职能。     

以“双元价值”为基点论刑事诉讼中的“适度平衡”

刑事诉讼中存在公正与效率;打击犯罪与保障人权;程序公正与实体公正等两两配对的双元法律价值,双元法律价值在刑事诉讼中并不总是平行的、对等、和谐;二者之间存在一种此消彼长,互相排斥的关系。在刑事诉讼中必须以适度平衡来调节双元法律价值,以避免一种价值过重压倒另一种价值。适度平衡允许在刑事诉讼中双元法律价值沿不均衡的轨道运行,一种价值在特定时期可以高于另一种价值,这有利于刑事诉讼实质公平和形式公平的实现。本文论述了适度平衡的必要性,适度平衡内容、适度平衡的价值及其在实践中如何运用。     

论父母对"不当出生"者之损害赔偿请求权

医疗者未尽合理注意义务,而使得残疾儿“不当出生”,父母因此享有医疗损害赔偿权.“不当出生”不是价值实现,而是损害事故,其请求权基础可以是违约责任或侵权责任.损害赔偿范围包括机会利益的损失,反差利益的损失、人格利益的损失以及对“不当出生”的残疾儿的抚养费.     

微小牛蜱幼蜱cDNA表达文库的构建

为了研究微小牛蜱功能性抗原基因,从微小牛蜱(Boophilus microplus)幼蜱中提取总RNA并分离纯化mRNA。采用Oligo(dT)引物合成双链cDNA,在其两端加EcoRⅠ、HindⅢ定向接头,用Mini Column Fractionation凝胶过滤柱纯化后定向克隆到λSCREEN载体。经体外包装,成功构建了我国微小牛蜱幼蜱cDNA表达文库,铺板测定原始库容量为4.5×105PFU,扩增后的滴度为7.2×1010PFU/mL。