大鼠骨骼肌损伤修复中FZD4时序性变化及其应用

目的以卷曲受体4(FZD4)为例,探索细胞膜上受体蛋白的表达变化能否作为损伤时间推断的指标。方法 78只大鼠随机分为对照组和损伤后4h、8h、12h、16h、20h、24h、28h、32h、36h、40h、44h和48 h组(n=6)。麻醉后,采用重力锤自由落体方式砸伤大鼠右后肢,取股四头肌处挫伤的组织。应用免疫荧光、real-time PCR和western blotting方法检测肌肉中FZD4蛋白及m RNA的表达量。结果免疫荧光结果显示FZD4表达于骨骼肌细胞膜上,胞浆和细胞核内均未见表达;Real-time PCR结果表明FZD4 m RNA在损伤后8h、12h、36h和40h显著上调(P0.05),均超过对照组的两倍;Western blotting结果示FZD4蛋白的表达在8h、36h、40h、44h和48h组明显增加(P0.05),但均未超过对照组的两倍。结论 FZD4 m RNA和蛋白在肌肉挫伤后呈时序性变化规律可作为损伤时间推断的指标,在一定程度上FZD4 m RNA比FZD4更适用于损伤时间推断。     

实时定量PCR检测大鼠脑挫伤后HIF-1α mRNA的表达

目的研究大鼠脑挫伤后挫伤部位脑组织HIF-1α mRNA的表达随损伤时间变化的规律及其在脑损伤时间推断中的应用。方法以Feeney法建立大鼠闭合性脑挫伤模型,应用实时荧光定量PCR技术检测脑挫伤部位HIF-1α mRNA的表达,采用2-△△Ct法比较实验组与对照组脑组织HIF-1α mRNA表达的倍数关系。结果与对照组相比,HIF-1α mRNA的表达在伤后1h即达到高峰,随后下降,伤后24h出现一次较小高峰,3～14d逐渐恢复至对照组水平。结论脑挫伤后HIF-1α mRNA的表达随损伤时间的变化呈现出一定规律性,可作为推断早期脑挫伤经过时间的生物学指标之一。     

基于模式识别方法研究深静脉血栓形成大鼠尿液代谢物谱

目的采用代谢组学技术研究深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)大鼠尿液中代谢物谱,筛选出可用于DVT诊断和法医学鉴定的小分子生物标志物。方法建立下腔静脉完全结扎DVT大鼠模型,分为模型组、假手术组和对照组,每组各10只。模型组和假手术组大鼠在建模后48 h于代谢笼中收集24 h尿液,同时对照组收集24 h尿液。核磁共振检测其代谢物谱,SIMCA-P 14.1软件进行模式识别,通过正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal PLS-DA,OPLS-DA)模型中的变量权重重要性排序(variable importance in projection,VIP)值结合Mann-Whitney U检验,寻找尿液中差异代谢物。结果模型组、假手术组和对照组大鼠尿液的代谢轮廓呈现显著性差异。通过偏最小二乘法-判别分析(partial least squares method-discriminant analysis,PLS-DA)模型可以有效判别模型组、假手术组与对照组。与对照组大鼠相比,DVT大鼠尿液中亮氨酸、谷氨酰胺、肌酸、肌酐和蔗糖水平上调,3-羟基丁酸、乳酸、丙酮、α-酮戊二酸、柠檬酸和马尿酸水平下调。结论 DVT大鼠尿液中的差异代谢物有望成为该疾病的候选生物标志物,该结果可为DVT的诊断、治疗和法医学鉴定提供研究基础。     

高坠案件法医学鉴定分析1例

正1案例资料1.1简要案情及现场勘察王某,女,25岁。某年8月5日凌晨1时许,与情人白某争吵后从宾馆三楼坠楼身亡。现场位于一临街宾馆三楼房间,房间内柜子及内窗台放有盛满啤酒的瓷杯及塑料杯、矿泉水、啤酒瓶等,室内未见明显搏斗痕迹。内窗台高89cm,窗外墙壁瓷砖上有"X"形擦痕。窗户下方为人行道,有血泊形成。1.2尸体检验尸表检验额部有星芒状创口,创口中心区软组织挫碎,创周片状擦挫伤。眼睑青紫肿胀,左眼     

金属硫蛋白1A和2A的mRNA时序性表达(英文)

目的研究大鼠肌肉挫伤后金属硫蛋白(metallothionein,MT)1A m RNA、MT2A m RNA的时序性表达。方法 54只SD大鼠被分成挫伤组(挫伤后0.5、1、6、12、18、24、30和36 h组各6只)和对照组(6只)。所有总RNA均取自大鼠的骨骼肌。利用SYBR GreenⅠ法进行RT-q PCR检测大鼠挫伤骨骼肌中MT1A m RNA、MT2A m RNA的相对表达量。结果 MT1A m RNA、MT2A m RNA在损伤后的变化趋势与损伤时间具有一定的相关性。除了挫伤后0.5 h组外,其余各组MT1A m RNA、MT2A m RNA的表达量与对照组相比差异均有统计学意义(P0.05)。损伤后1 h、6 h、12 h、18 h MT1A m RNA和MT2A m RNA的相对表达量呈现逐渐上升的趋势,在18 h时达到了峰值,分别为对照组的(239.41±15.20)倍和(717.42±50.76)倍;损伤后24 h时两者的表达量均明显减少;损伤后30 h再次上升,随后下降。结论 MT1A m RNA、MT2A m RNA可能对损伤时间推断有一定的意义。     

交通事故致重度颅脑损伤合并坠积性肺炎、重型药疹法医学鉴定1例

1案例 1.1简要案情 周某,男,36岁,2016年6月26日因交通事故致严重颅脑外伤,伤后在某医院进行抢救,住院治疗过程中合并坠积性肺炎、大疱性表皮剥脱型药疹,经医院抢救无效,于2016年7月31日死亡. 1.2病史摘要 客观检查:车祸致头部外伤9 h入院,神志呈浅昏迷.双侧瞳孔等大等圆,光反应(++).颈抵抗(+)...     

免疫正常人和过敏性猝死者类胰蛋白酶含量测定

目的观察免疫正常人和过敏性猝死者血清类胰蛋白酶、IgE含量及类胰蛋白酶在咽喉、肺和小肠组织的表达,探讨过敏性猝死的诊断方法。方法采用荧光酶联免疫法（FEIA）测定115例正常人和6例过敏性猝死者血清类胰蛋白酶;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定7例过敏性猝死者血清IgE含量;采用免疫组织化学方法观察15例过敏性猝死者咽喉、肺、小肠组织中类胰蛋白酶的表达,并采用BL-2000病理图像分析系统进行定量分析。结果①115例免疫正常人血清中类胰蛋白酶含量在0.80μg/L～8.86μg/L之间,性别之间无明显差异（P〉0.05）。20岁以下、21～40岁和41～60岁组之间血清中类胰蛋白酶含量无明显差别（P〉0.05）,而60岁以上组含量高于其他年龄组（P〈0.05）;②6例过敏性猝死者血清类胰蛋白酶含量均高于免疫正常人;③7例过敏性猝死者中有6例血清IgE水平高于正常值（〉333U/mL）;④过敏性猝死者咽喉、肺和小肠组织中类胰蛋白酶表达升高,与对照组之间有显著性差异（P〈0.01）。结论过敏性猝死者血清IgE、类胰蛋白酶含量及咽喉、肺和小肠组织类胰蛋白酶表达升高,可对敏性猝死的诊断有一定参考价值。     

水合氯醛致过敏性休克死亡1例

1案例资料1.1简要案情死者,男,2岁。某日因"发热3d"就诊于某三甲儿童医院。现病史:3d前开始发热,最高热峰39.7℃,伴有声音哑和咳痰。查体:咽充血,双侧扁桃体Ⅱ°肿大,未见脓点,呼吸28次/分,呼吸音粗,心率120次/分。血常规示白细胞总数14.67×109/L,中性比例84%,CRP正常。医院初步诊断为支气管炎。门诊予以抗炎、退热治疗。次日凌晨1时患儿再次高热,遂予以复方水合氯醛(灌肠退热);灌肠5min后患儿出现面色青紫、反应差、烦躁不安,随后呼吸、心跳停止,积极抢救45min后无效死亡。     

大鼠Gpnmb基因表达线性回归模型在损伤时间推断中的应用

目的 探讨非转移性黑色素瘤糖蛋白B(glycoprotein non-metastatic melanoma protein B,Gpnmb)mRNA表达受损伤时间、死亡时间及死后保存温度的影响,建立Gpnmb mRNA表达与损伤时间的线性回归模型,为损伤时间推断提供潜在指标。方法 将SD大鼠麻醉后钝性挫伤,随机分为损伤后0 h、4 h、8 h、12 h、16 h、20 h和24 h组,每组18只,大鼠颈椎脱臼处死后各取6只分别保存在0℃、16℃、26℃中,在同一温度下于死后0 h、12 h、24 h重复收集大鼠后肢股四头肌损伤处肌肉组织样本,验证组大鼠分组与处理方式同上。使用RT-qPCR技术检测大鼠骨骼肌Gpnmb mRNA的表达。使用Pearson相关系数评价Gpnmb mRNA表达与损伤时间、死亡时间、死后保存温度的相关性,SPSS 25.0软件构建线性回归模型,验证组数据用于回代检验。结果 Gpnmb mRNA的表达随损伤时间延长而持续增加,表达量与损伤时间高度相关（P<0.05）,与死亡时间和死后保存温度基本不相关（P>0.05）。损伤时间（y）与Gpnmb m...     

Photoshop软件在法医临床学鼻面积测量中的应用初探

在鼻部损伤的法医临床学鉴定中,由于鼻的形态不规则,法医学界对鼻部缺损范围的测量和计算尚无一种统一的、精确的方法。本文利用Photoshop软件与传统的薄膜覆盖法分别对鼻面积进行测量,分析两种测量方法所得结果无统计学差异,因此通过软件法可以简便准确的计算鼻部面积。在伤者受伤前与伤后眼裂等器官长度不变的条件下,将伤者眼裂长度作为伤前照片的"比例尺",根据伤前照片推算其伤前鼻部面积,从而计算出鼻缺损比例,为鼻损伤程度的判定提供了更科学的方法。