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目的 建立一种高效、准确的鉴别月经血与外周血的方法体系并探究该体系的应用能力。方法 设计miR-451a、miR-21-5p的引物、探针,建立并优化基于TaqMan技术的qPCR检测体系;对58份样本(20份月经血、20份外周血、6份唾液、6份精液、6份阴道分泌液)中miR-451a与miR-21-5p的表达情况进行检测,探索候选miRNA分子在5种体液中的表达规律;最终建立区分目标体液的鉴别方法并用模拟案件样本对其准确性进行验证。结果 本研究所建立体系及方法可实现血液与非血液、月经血与外周血100%准确区分。结论 本研究基于TaqMan qPCR技术成功建立了运用miR-451a/miR-21-5p表达量比值鉴别月经血与外周血的方法体系,该体系鉴别能力良好,有望应用于实际法医案件中。 相似文献
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6种特殊生物检材的DNA提取 总被引:3,自引:3,他引:0
在许多案件中会遇到一些特殊生物检材,如鼻涕、经联苯胺染色的血痕、甲醇固定后经伊红美蓝染色的涂片、牙刷、汗斑及软骨等,如何充分挖掘这些特殊生物检材的证据作用,将对侦破工作和定罪量刑有重要意义。但是实际上,许多特殊生物检材在提取DNA时有一定困难,导致实验结果差。作者在实际检案中遇到了上述6种特殊生物检材时,用文献犤1犦建立的DNA提取方法,成功地提取了DNA并分型,报道如下。1案例简介案例12001年1月,河北省张某被头罩面罩的歹徒持刀入室抢劫杀害。送检检材为被害人张某血样、犯罪嫌疑人田某血样及罪犯弃… 相似文献
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目的探索有效区分月经血和外周血的miRNA最优标记组合及最佳分类模型,并构建简便快速的自动化判别软件。方法对10种miRNA(miR-451a、miR-205-5p、miR-203a-3p、miR-214-3p、miR-144-3p、miR144-5p、miR-654-5p、miR-888-5p、miR-891a-5p、miR-124-3p)在200余份月经血和外周血样本中的相对表达量以实时荧光定量PCR检测,并以7种算法模型(核密度估计、K-最近邻、逻辑回归、线性判别分析、支持向量机、神经网络、随机森林)进行数据分析,选出鉴别效果最好的标记组合及算法模型,进而构建自动判别软件。结果月经血和外周血中差别最大的三种miRNA为miR-205-5p、miR-203a-3p和miR-214-3p,使用miR144-5p与上述miRNA中的一种或两种组合可达较好区分效果,其中基于miR-144-5p、miR-203a-3p和miR205-5p所形成的“最优特征项组合一”稳健性最强。7种算法模型中最佳分类模型为核密度估计模型,其次为逻辑回归模型。结论本研究建立的自动判别软件界面友好、使用简单,适合辅助法医检验关于月经血和/或外周血判别分析的计算,便利于法医物证工作,有较大的推广应用价值。 相似文献
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目的 构建基于微生物标记物的荧光复合检测体系,实现对唾液斑迹、阴道分泌物斑迹的区分鉴别。方法经文献检索结合本实验室前期工作,根据特异性和丰度筛选唾液和阴道分泌物微生物标记物;制备唾液斑迹、阴道分泌物斑迹样本,提取总DNA,利用毛细管电泳技术构建基于微生物标记物鉴别唾液、阴道分泌物的多重荧光标记复合扩增检测体系,并使用体液斑迹样本对体系特异性、灵敏度进行检验。结果 本研究筛选出5个唾液微生物标记物(微黄奈瑟氏菌Neisseria subflava、非典型韦荣氏菌Veillonella atypica、唾液链球菌Streptococcus salivarius、口腔链球菌Streptococcus oralis、凯托卟啉单胞菌Porphyromonas catoniae)和3个阴道分泌物微生物标记物(卷曲乳杆菌Lactobacillus crispatus、加氏乳杆菌Lactobacillus gasseri、短双歧杆菌Bifidobacterium breve),利用毛细管电泳技术构建了8重微生物荧光标记复合扩增检测体系,并使用140份样本对体系特异性进行验证;测试结果显示,唾液和阴道分... 相似文献
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自1989年我国DNA指纹技术研究获得成功并正式用于法医物证检验以来,已经为侦查破案发挥了重要作用.随着DNA技术的深入发展,此后PCR技术由于它日益明显的优越性得到越来越广泛的应用.到目前为止全国已有几十个法医PCR实验室,从单个VN-TR和STR位点的扩增技术到银染检测,从复合扩增STR技术到荧光检测,使得该技术越来越精确和方便.笔者将在办案过程中就PCR技术的常见问题与处理方法,尤其是银染检测STR位点复合扩增技术和荧光检测STR位点复合扩增技术所积累的一些经验总结如下供大家参考. 相似文献
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目的基于二代测序平台进行混合检材精细化STR分型,并评估其法医学应用价值。方法收集性侵案件中3例混合检材及其比对样本,采用M48磁珠提取纯化试剂盒提取样本DNA,使用Foren SeqTM DNA Signature Prep试剂盒制备文库,Mi Seq FGx平台进行测序,Foren SeqTM Universal Analysis v1.2.1软件进行数据分析,将STR序列多态分型与长度多态分型进行比较。结果对3例混合检材STR分型进行拆分,在D3S1358、D13S317与D9S1122基因座发现存在同一长度多态等位基因包含两个个体的序列多态等位基因的情况。结论二代测序技术可对混合检材进行精细鉴别,为混合分型数据拆分提供更多线索和依据。 相似文献