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991.
采用PCR方法从鸡源新城疫病毒(NDV)强毒F48E9株P基因重组质粒中扩增出了V 基因全长cDNA,并引进相应的突变位点,将其克隆到pMD18-T载体,然后亚克隆到原核表达载体 pET-30c上,重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,筛选出阳性重组质粒,并命名为pET-30c-V。将 pET-30c-V转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG 37℃过夜诱导表达,SDS-PAGE 及Western-blotting分析结果表明,所表达的NDV V重组蛋白主要以包涵体形式存在,分子质量约28 ku,与理论值大小相符。将包涵体用8 mol/L脲变性,经Ni-NTA柱纯化,透析复性,得到纯化的V蛋白。用复性后的V蛋白免疫21日龄SPF鸡(300 μg/只),成功制备了抗鸡NDV V蛋白的抗血清。 相似文献
992.
993.
为深入研究猪传染性胸膜肺炎基因工程弱毒活疫苗的生物学特性和免疫原性,分别以本实验室构建的血清7型胸膜肺炎放线杆菌(APP)基因缺失株apxⅡC-/Kan+、apxⅡC-/ⅠN+和血清5型APP的基因缺失株SW1ΔⅠC为研究对象,对其进行研究。溶血活性试验证实,突变株完全失去了溶血活性。细胞毒性试验证实,缺失株SW1ΔⅠC的细胞毒性完全丧失,缺失株apxⅡC-/Kan+和apxⅡC-/ⅠN+有轻微的细胞毒性。遗传稳定性试验证实,3株缺失株在体内传5代均不会发生回复突变。毒力试验结果显示,基因缺失株apxⅡC-/Kan+、apxⅡC-/ⅠN+和SW1ΔⅠC对小鼠的半数致死量分别为亲本株的5倍、7倍和15倍。3株缺失株分别免疫小鼠后,以10LD50血清1型、5型和7型APP的剂量攻毒,小鼠的保护率可达100%。试验结果表明,3株缺失株的毒力明显降低,并能提供有效的保护力。本研究为进一步以突变株为基因工程弱毒活疫苗的研究奠定了一定基础。 相似文献
994.
2013年8月30日通过的《商标法》第三修正案,使我国的商标法律制度更加完善。该修正案规定的商标先用权,有利于保护商标在先使用人的合法利益,遏制日益严重的商标抢注现象。该项权利是我国商标法首次设定,因此就商标先用权所涉及到的理论与适用问题有必要进行研究。本文结合我国实际,借鉴其他国家保护未注册商标的成功经验,运用逻辑推演、比较分析与实证分析等方法对商标先用权的法律性质、理论基础、适用条件、利弊缺失等进行研究。 相似文献
995.
在对市民社会的考察中,马克思关注到市民社会的内在矛盾,从而促使其开始研究政治经济学,在哲学与政治经济学研究共同促进的动力下,马克思超越了黑格尔哲学(青年黑格尔派)和费尔巴哈哲学,创立了新唯物主义。因此以1843年的《黑格尔法哲学批判》为标志,马克思的思想得到了逐步的丰富和发展。 相似文献
996.
正草长莺飞,神州锦绣,中国再谱"春天的故事"。在亿万人民深切期待中,十二届全国人大二次会议和全国政协十二届二次会议分别于2014年3月5日和3月3日在北京胜利召开。就在3个多月前,党的十八届三中全会通过《中共中央关于全面深化改革若干重大问题的决定》,对全面深化改革作出战略部署,明确了改革路线图和时间表。特别的历史背景、关键的时间节点,赋予今年全国两会以重要的使命——将党的主张和人民意愿通过法定程序转化为国家意志,把全面深化改革宏伟蓝图落实为今年的实际行动。 相似文献
997.
998.
打造人才"引擎"是乡村振兴的关键。要突破乡村发展人才瓶颈,打造乡村振兴人才引擎,必须着力培育本土人才,积极引进外来人才,不断创新人才评价机制,更好地激发"存量"潜能,发挥"增量"作用,释放人才"红利"。 相似文献
999.
正1933年9月27日至10月4日,在博生(今宁都)县七里村召开的中共苏区江西省第二次代表大会,是一次中央高度关注、群众热烈拥护的党代会,也是一次紧张、热烈、务实、高效的党代会,一次特色鲜明、意义重大的党代会。鉴于多年来学界对此事鲜有关注研究,笔者谨据历史文献就这次大会的背景、概况、特点与意义作一梳理,权当抛砖引玉。大会背景苏区江西省第二次党代会召开之日,正值蒋介石纠集百万兵力并200架飞机,开始向各革命根据地发动空前规模的第五次军事"围剿"之时,其中投向中央苏区的兵力高达50万,且多属其训练有素、经验丰富、装备精良的嫡系 相似文献
1000.