抗人转铁蛋白单链抗体的研制及部分性能研究

研制人转铁蛋白的单链抗体。以纯化人转铁蛋白免疫小鼠,制备小鼠脾脏 mRNA,RT-PCR 扩增重轻链可变区基因;Linker 连接及引入 Sfi Ⅰ和 NotⅠ酶切位点构建单链抗体基因;同载体 pCANTAB 5E 连接,转化 E.coliTG1细胞,以 M13K07挽救制备噬菌体抗体呈现文库,筛选抗原阳性重组噬菌体粒子(Panning);感染 E.coliHB2151菌株,制备可溶抗体并检测其性质;测定抗体基因序列并分析同源性及结构特征。制备出4株分泌抗人转铁蛋白可溶抗体的 E.coli HB2151菌株。抗体基因只由小鼠抗体的轻重链可变区基因构成,开放读码,无终止子,并紧接一末尾为一琥珀终止密码的 E 末端序列,其对应氨基酸序列 V_H 和 V_L 部分均遵从抗体可变区特征。实验证明,可把基因工程抗体技术应用于法医血清学,以制备新型抗体试剂。     

人类线粒体DNA异质性研究进展及在法医学中的应用

线粒体DNA(mtDNA)异质性的存在使其在法医学应用变得复杂。本文对mtDNA异质性形成的可能原因、异质性的分布和遗传特点、异质性的筛查和定量方法、异质性对法医学的影响以及异质性的研究和展望等方面进行综述,探讨异质性在法医学上的应用价值。     

免疫胶体金技术及其法医学意义

<正> 1 胶体金概述 胶体金由金化合物的水溶液制备而成。在氯金酸(HAu—CI4)的水溶液中加入还原剂,如柠檬酸、鞣酸、抗坏血酸(即维生素C)和白磷等,金离子被还原而聚集成5～60 nm的金颗粒,在一定条件下呈疏水胶体状态,故称胶体金。检测溶液中的抗原(或抗体)常选用15～30 nm的胶体金颗粒。     

国外DNA测试简介

在我国刑事案件侦破和审理的过程中 ,法医ＤＮＡ检验技术发挥了显著作用。由于我国刑事司法系统对ＤＮＡ鉴定的依赖性较大 ,ＤＮＡ鉴定结论常常作为法庭判决的关键证据 ,但是 ,在实际应用中几乎不对其证据能力进行评估。因此 ,对鉴定机构而言 ,提高ＤＮＡ鉴定的质量和可信度 ,对法医ＤＮＡ检验的实验室进行测试就显得十分必要。目前 ,在ＤＮＡ检验方面国内还没有专门的测试机构 ,但在国外则有如美国的实验室测试服务公司 (Ｃｏｌｌａｂｏ ｒａｔｉｖｅＴｅｓｔｉｎｇＳｅｒｖｉｃｅｓＩｎｃ,以下简称ＣＴＳ)、英国的塞尔马克公司 (Ｃｅｌｌ…