国外DNA测试简介

在我国刑事案件侦破和审理的过程中 ,法医ＤＮＡ检验技术发挥了显著作用。由于我国刑事司法系统对ＤＮＡ鉴定的依赖性较大 ,ＤＮＡ鉴定结论常常作为法庭判决的关键证据 ,但是 ,在实际应用中几乎不对其证据能力进行评估。因此 ,对鉴定机构而言 ,提高ＤＮＡ鉴定的质量和可信度 ,对法医ＤＮＡ检验的实验室进行测试就显得十分必要。目前 ,在ＤＮＡ检验方面国内还没有专门的测试机构 ,但在国外则有如美国的实验室测试服务公司 (Ｃｏｌｌａｂｏ ｒａｔｉｖｅＴｅｓｔｉｎｇＳｅｒｖｉｃｅｓＩｎｃ,以下简称ＣＴＳ)、英国的塞尔马克公司 (Ｃｅｌｌ…     

免疫胶体金技术及其法医学意义

<正> 1 胶体金概述 胶体金由金化合物的水溶液制备而成。在氯金酸(HAu—CI4)的水溶液中加入还原剂,如柠檬酸、鞣酸、抗坏血酸(即维生素C)和白磷等,金离子被还原而聚集成5～60 nm的金颗粒,在一定条件下呈疏水胶体状态,故称胶体金。检测溶液中的抗原(或抗体)常选用15～30 nm的胶体金颗粒。     

北京地区汉族群体ITI的遗传多态性

<正> 间-α-胰蛋白酶抑制因子(Inter-α-trypsin in-hibitor,ITI)是由两条重链和一条轻链所组成的糖蛋白,分子量为220道尔顿。它由肝脏合成,存在于人类血浆中,正常浓度为0.5mg/ml。1990年。Vogt等首先应用等电聚焦免疫印迹和免疫固定技术在德国人群中报道了人类 ITI 的遗传多态性,发现了3个等位基因:ITI*1、ITI*2、ITI*3,并称其为一种新的遗传标记。随后国内外学者相继报道了ITI 的遗传多态性,并发现了一些罕见的等位基因。本文作者采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(IEF)免疫     

鼠抗人转铁蛋白抗体轻链与重链可变区基因库的制备

以纯化的人转铁蛋白免疫小鼠,测其血清效价,合乎要求后杀鼠取脾脏并以异硫氰酸胍和酚的混合溶液将其匀浆,再以氯仿抽提、异丙醇沉淀和乙醇洗涤,所得总RNA以oligo(dT)纤维素离心柱分离纯化制备mRNA,使mRNA达到eDNA合成所需的浓度后,反转录制备出eDNA,在合成的eDNA中加入轻、重链引物,扩增制备出小鼠抗人转铁蛋白抗体的轻、重链可变区基因库。     

抗人转铁蛋白单链抗体的研制及部分性能研究

研制人转铁蛋白的单链抗体。以纯化人转铁蛋白免疫小鼠,制备小鼠脾脏 mRNA,RT-PCR 扩增重轻链可变区基因;Linker 连接及引入 Sfi Ⅰ和 NotⅠ酶切位点构建单链抗体基因;同载体 pCANTAB 5E 连接,转化 E.coliTG1细胞,以 M13K07挽救制备噬菌体抗体呈现文库,筛选抗原阳性重组噬菌体粒子(Panning);感染 E.coliHB2151菌株,制备可溶抗体并检测其性质;测定抗体基因序列并分析同源性及结构特征。制备出4株分泌抗人转铁蛋白可溶抗体的 E.coli HB2151菌株。抗体基因只由小鼠抗体的轻重链可变区基因构成,开放读码,无终止子,并紧接一末尾为一琥珀终止密码的 E 末端序列,其对应氨基酸序列 V_H 和 V_L 部分均遵从抗体可变区特征。实验证明,可把基因工程抗体技术应用于法医血清学,以制备新型抗体试剂。