鸡毒霉形体H3株TM-1基因与鸡白细胞介素2基因串联子在大肠杆菌中的共表达

运用DNA重组技术将鸡白细胞介素2基因和鸡毒霉形体H3株TM-1基因进行串联,插入到pET-30a( )质粒的EcoRⅠ和HindⅢ多克隆位点间,经PCR鉴定、双酶切鉴定和序列测定,表明已成功构建了含鸡毒霉形体H3株TM-1基因和鸡白细胞介素2基因的融合基因,将含有此融合基因的重组质粒命名为pET-30a( )-TM-1-IL-2。将此重组质粒转化E.coliBL21(DE3)菌株。经IPTG 37℃诱导表达4 h后,SDS-PAGE电泳结果显示,此融合基因得到了表达,所表达出的融合蛋白的分子质量约为43 ku,主要以包涵体形式存在。表达产物在尿素存在下经超声波处理,获得了纯化的融合蛋白。这为进一步研究鸡白细胞介素2及鸡毒霉形体的生物学活性奠定了基础。     

过年

在中国,人们把过春节叫过年.这是一年中最隆重、最盛大的节日,它承载了中国人最热烈的情感和美好寄望. 办年货 进入腊月,年越来越近,年味也越来越浓,但真正的过年是从腊八开始的.俗话说:"吃了腊八饭,就把年货办."小时候,物质非常匮乏,人们家里也都没钱,年货都是一点一点置办的,不到年三十就准备不齐.人们见面总是问:"齐了吧...     

加快建立阶段性的社会矛盾缓冲处理体系

当前我国正处于传统社会向现代社会、农业社会向工业社会、封闭社会向开放社会变迁和发展的转型时期,这一时期既是经济社会发展的关键时期,也是矛盾的重要凸显期。而我省目前人均GDP已进入由7000美元向10000美元     

北平和平解放的几点启示

正2019年1月31日是北平和平解放70周年纪念日。今天大家齐聚这里,以座谈的方式回顾历史,纪念北平和平解放70周年,很有意义。只有铭记历史,致敬英烈,才能不忘初心,牢记使命,珍惜当下,接续奋斗。按照这次座谈会的安排,我主要从军事方面谈谈对北平和平解放的认识和理解。第一,强大的军事实力是争取北平和平解放的     

应用弓形虫McAb—RIHA对甘肃省羊猪血清弓形虫循环抗原的检测

应用已建立的分泌抗弓形虫MCAb杂交瘤细胞株(3C_2)诱导小鼠腹水,在50％(NH_4)_2SO_4溶液中4℃保存二年后,经盐析纯化,致敏戊二醛化鞣化绵羊红细胞制备抗弓形虫单克隆抗体反向间接血凝诊断试剂(MCAb-RIHA)检测已纯化的弓形虫可溶性抗原,灵敏度为7.43μg/ml;应用该诊断试剂对甘肃省部分弓形虫流产高发区的绵山羊血清435份(其中天祝县125份、古浪县121份、景泰县189份、高台县种猪场猪血清65份和人工感染羊兔的血清29份进行了弓形虫循环抗原(CAg)检测,共检出CAg阳性血清160份,阳性率30.3％(160/529),同时用IHA和RIHA诊断法对529份血样进行了血清、抗体(Ab)和CAg的检测和比较。结果表明,用以上两法同时检测的529份血样结果:151份Ab阳性,阳性率28.5％(151/529),107份中Ab、Ab均为阳性,占CAg阳性总数66.9％(107/160),占Ab阳性总数70.9％(107/151)。仅检出CAg阳性数53份,仅Ab阳性数44份,各占阳性总数的33.1％(53/160)和29.1％(44/151)。证明受检羊群和猪场同时存在既往感染史(Ab)和现症感染(CAg)。进而证明McAb-RIHA方法对弓形虫病早期诊断、流行病学监测具有实用价值。     

弓形虫自然弱毒株毒力稳定性及生物学特性的研究

研究结果表明:①用弓形虫自然弱毒株(QHO)包囊继代繁殖的速殖子和经不间断连续20次继代的速殖子10~2～10~7虫量分别感染小鼠,进行稳定性试验。前者不致死小鼠,并可持续存活30～150天以上,后者可在6～11天使小鼠全部致死,表现与RH株毒力相同。继之,将毒力变异和未变异的速殖子分别经-196℃液氮冻存4～9个月,复苏后感染小鼠,仍表现各自毒力特性。②用不同剂量的QHO株包囊(1～100个)和速殖子10~4分别腹腔感染小鼠观察虫体消长规律,二者在腹液中都可形成大量速殖子,同时在10～14天逐渐消失,通过镜检和盲传证明虫体在腹液中不复存在。继经21天左右在脑组织中形成大量包囊,终生存留。③温度敏感性和低温保存期的观察:包囊在4℃12天、-12℃和-25℃5天、56℃5分钟均不再具有感染性;速殖子4℃27天仍具有感染性;而经-196℃液氮中长期保存的包囊和速殖子都可成功地复苏,并具有各自的毒力和致病性。     

绵羊和山羊的弓形虫性流产

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是人和动物常见的寄生原虫之一。1954年Hartly等人就认为弓形虫感染是引起绵羊流产的重要原因之一。近年来的研究又证实,弓形虫感染引起的山羊围产期疾病(流产、死产及胎儿干尸化)比绵羊更为严     

抗弓形虫单克隆抗体试剂的研究——抗弓形虫单克隆抗体理化特性的测定

以分泌物抗弓形虫单克隆抗体杂交瘤细胞株3C_2接种BALB/C小鼠腹腔,所诱发的腹水McAb经反复冻融8次、冻干1次、饱和(NH_4)_2SO_4盐析3次,室温4℃及-20℃下保存5个月和不同pC缓冲液稀释等不同条件处理之后,其抗体活性无明显变化。从而证明该McAb性质稳定,能适应较复杂的环境,为建立弓形虫病免疫学诊断试剂盒以及该试剂盒的贮存、包装和运输等提供了科学依据。     

弓形虫特异性转移因子的初步研究——皮肤迟发型超敏反应及免疫保护性

转移因子(Transfer Factor,TF)是白细胞中有免疫活性的T一淋巴细胞所释放的一种免疫效应因子之一,由低聚核苷酸和多肽组成,分子量低于10000道尔顿、能够通过半透膜而被透析。该物质能将供体的某一特定细胞免疫功能特导地传递给受体,从而激发和增强受体的细胞免疫功能。Klesius等(1977)用球虫特异性TF注射牛,球虫排卵量比对照组减少了40％,1978年他又用牛卵形球虫特异性TF给10只小白鼠腹腔注射,结果可保护该鼠对卵形球虫的临床感染,Ross(1981)等证明了免疫羊的TF能把对艾氏毛圆成虫感染的抵抗力成功地转移给易感羊,使其对毛圆成虫的寄生减少了30～70％。但目前尚未见到有关TF在弓形虫病的免疫反应及免疫保护性方面的报道。本试验对TF转移弓形虫特异性免疫反应及其对弓形虫感染的免疫保护性进行了初步探讨。     

亲合素—生物素系统在检测弓形虫抗体上的应用

应用亲合素-生物素系统(ABS)的试剂进行ABC-ELISA,并与常规ELISA和IHA予以比较,结果表明:在从90只山羊血清中检测弓形虫抗体阳性上,ABC-ELISA为56例(62.22％),常规ELISA为40例(44.44％),IHA为21例(23.33％);在检出弓形虫阳性抗体的滴度上,ABC-ELISA比常规ELISA敏感1.59倍,比IHA敏感3.07倍。ABC-ELISA与常规ELISA和IHA均呈线性正相关。因此,ABC-ELISA为弓形虫病的免疫学诊断和单克隆抗体的检测提供了比常规ELISA和IHA更敏感的新手段。