猪IFN-γ mRNA竞争性RT-PCR定量检测方法的建立

无菌分离的猪外周血单个核细胞(PBMC),经ConA体外刺激培养15 h后提取细胞总RNA。以此总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增到了435 bp的IFN-γ基因。把扩增到的IFN-γ基因与pMD18-T载体连接,构建了pMD-IFN435重组质粒。用另一对引物对重组质粒pMD-IFN435内部进行PCR扩增,得到了257 bp(含PstⅠ酶切位点)的基因片段,将此基因片段连接到pMD18-T载体上构建了pMD-IFN257重组质粒。将pMD-IFN257双酶切(PstⅠ SalⅠ)后回收的目的片段与pMD-IFN435双酶切(PstⅠ SalⅠ)后回收的目的片段连接,得到了含有367bp目的片段的重组质粒pMD-IFN367,即内标准DNA模板。以定量后的pMD-IFN367与2倍梯度稀释的pMD-IFN435进行竞争PCR扩增,建立了能够准确、方便定量检测猪IFN-γmRNA的标准竞争曲线的线性回归方程(y=0.414x-1.864)。     

论中国共产党在革命时期推进党的建设科学化的基本历程

新民主主义革命时期党的建设科学化历史进程可以分为四个阶段：第一阶段提出坚持马克思列宁主义建党学说,探索q-国共产党的建党规律;第二阶段提出党员思想和党内生活科学化,探索党内生活规律;第三阶段提出马克思主义中国化,探索党的思想理论建设规律;第四阶段提出为做好执政准备,探索党的执政规律。     

科学发展 峨山启示

峨山是新中国成立后的第一个彝族自治县,是云南省第一个实行民族区域自治的地方,也是云南省43个革命老区县之一。＂十一五＂以来,峨山县认真贯彻落实科学发展观,牢牢把握发展第一要务,充分找准自身县情特点,围绕建设中国第一个生态彝族自治县目标,深入实施＂生态立县、工业强县、农业稳县＂发展战略,     

深化医药卫生体制改革 新平县城乡居民基本医疗保障一体化工作显成效

城乡居民基本医疗保障一体化是统筹城乡协调发展的重要内容,是打破多元制基本医疗保障体制,建立更具普惠性、公平性基本医疗保障制度的重大举措,是从根本上消除城乡居民＂看不起病＂,实现＂病有所医＂基本而有效的制度安排。2011年以来,新平县以推进医药卫生体制综合改革为契机,在全省率先探索实施城乡居民基本医疗保障一体化工作。通过一年多的努力,新平的城乡居民基本医疗保障一体化工作取得了显著成效,创造了住院补偿封顶线全省最高、报销比例全省最高、大病救助补偿比例全省最高、多次住院起付线超过600元不再重复计算、0-7岁参保儿童住院免起付线、对合法生育的新生儿实行母婴共享住院保障6个全省第一,实现了城乡居民医疗待遇均等和全覆盖、高标准、高报销。新平的生动实践,为全省统筹城乡、提高居民基本医疗保障水平做出了榜样。为此,本刊记者再次走进新平,了解他们的思路和举措,借以成文,把新平的经验和成效介绍给全省人民,以促进交流和学习。     

打造卓越烟区 创建一流企业 再铸曲靖烟草新辉煌

七彩云南,山川壮丽,资源丰富,物华天宝。云烟便是云南丰富物产中一颗璀璨的瑰宝。作为云南的优势产业,近年来,云南烟草紧紧围绕卷烟上水平这一中心任务,狠抓烟叶生产结构调整,促进烟叶从量到质的提升,确保了云南烟叶优势地位不动摇。在珠江源头,曲靖市烟草专卖局(公司)准确了解国内、国外烟叶发展新形势,把握现代烟草发展新方向,抓住卷烟上水平重要战略机遇,转方式,提质量,调结构,大力开展原料供应基地化、烟叶品质特色化、生产方式现代化三化建设,努力提高优质烟叶原料保障能力,在打造卓越烟区、创建一流企业,做优做强曲靖烟草的道路上迈出了坚实步伐。     

扬州警方全面推进保安监管工作有序开展

江苏省扬州市现有保安服务公司11家,自行招用保安员的单位514家,保安员达3万人。自2011年以来,扬州市公安局坚持以“两定两抓”（定目标、定措施;抓达标、抓提升）为主线,紧紧抓住信息警务大发展、大跨越的有利时机,以加强信息化条件下的保安监管工作为主线,以保安监管信息系统为依托,扎实推进保安监管工作创新创优,努力打造新亮点、实现新突破、开创新局面,积极培育统一、开放、竞争、有序的保安市场,努力为党的十八大胜利召开、建设“三个扬州”（创新扬州、精致扬州、幸福扬州）创造良好的社会治安环境。     

把握发展新形势 顺应人民新期待 努力把“两区”打造成为昆明北部崛起新引擎

统筹区域发展,是我国认真贯彻落实科学发展观,从全局出发,以资源为基础,以制度建设为保障,整合社会资源,发挥各地区比较优势,帮助和扶持滞后地区快速发展,从而实现共同进步的重大举措。     

略论毛泽东对党的建设科学化的主要贡献

毛泽东探索党的建设科学化取得了诸多积极成果,作出了开创性重大贡献,为今天我们进一步提高党的建设科学化水平奠定了坚实基础。其主要贡献是:提出党内生活科学化命题;完整提出党的建设伟大工程的目标;概括三大法宝,科学揭示党的建设与党的政治路线的内在关系;确立党的思想路线,提出马克思主义中国化命题;找到科学处理党内矛盾的武器——批评和自我批评;倡导全党的学习竞赛,提高全党马克思主义理论水平;从党的生命的高度重视党的政策策略问题和党内团结问题;以进京赶考的心态开始全国执政,为共产党执政奠基;首倡在党内造成生动活泼的政治局面。     

求爱担心被拒绝 打劫女孩前男友

辽宁大连男青年曲某高中时暗恋女同学乔某,可当时乔某已经有了男朋友刘某。后来乔某与刘某分手,曲某想对乔某表白爱意,又怕自己一事无成,表白后会被乔某拒绝,为此很苦恼。     

荔湾区打造广州市“会客厅”

广州市荔湾区通过。文化引领”。整合利用荔湾传统历史文化资源。着力建设五区一街文化商业特色街区（荔枝湾文化休闲区、陈家祠岭南文化广场区、沙面欧陆风情区、十三行商埠文化区、水秀花香文化生态区、上下九商业步行街）,打造广州市的。会客厅”．实现西关历史文化保护和文化资源经济价值的再创造。