口蹄疫病毒3A蛋白和FLAG标签的融合表达与血清学分析

通过对比各短肽标签,选择由8个氨基酸组成的FLAG标签弥补口蹄疫疫苗毒株OZK 3A蛋白的93～102位10个氨基酸缺失,原核表达FLAG与3A的嵌合蛋白,并命名为3AF。同时也表达了OZK毒株原始3A蛋白。分别以3A和3AF蛋白作为免疫原免疫6～8周龄雌性BALB/c小鼠,采用ELISA和Western-blot分析融合蛋白的血清学反应活性。结果表明,3A蛋白和3AF蛋白均能在大肠杆菌中有效表达,且主要以可溶性形式表达。纯化的3AF蛋白能与FLAG单抗特异性反应而未能诱导免疫小鼠产生针对该标签的抗体,体现了体外和体内的生物反应性差异。FLAG标签对3A蛋白的表达水平、表达形式等未产生显著影响。本研究为下一步FLAG标记病毒的拯救及其应用奠定了基础。     

旋毛虫半胱氨酸蛋白酶基因TsCP1的克隆与序列分析

为了研究旋毛虫半胱氨酸蛋白酶的功能,根据GenBank中旋毛虫EST数据库的半胱氨酸蛋白酶基因部分cDNA序列设计引物,以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,克隆到旋毛虫半胱氨酸蛋白酶基因(TsCP1)的完整开放阅读框序列,利用生物信息学软件对其进行预测分析。结果表明,TsCP1cD-NA序列含有一个由1 101个核苷酸组成的开放阅读框,编码由366个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质的分子质量理论值为41.9ku,理论等电点为7.46。TsCP1二级结构中α螺旋占31.4%,β折叠占15.3%。TsCP1第1～19位氨基酸残基为信号肽序列,具有3处N-糖基化位点,而且具有半胱氨酸蛋白酶的保守活性位点Cys173,His309及Asn333残基,另外在酶前体序列中有与组织蛋白酶F特征基序ERFNAQ相似的LKFNAQ序列,表明该蛋白属于半胱氨酸蛋白酶家族的组织蛋白酶F亚类。同源性分析表明与其他寄生性蠕虫组织蛋白酶F的一致性在40%以上,系统进化分析表明与吸虫的组织蛋白酶F属于不同的进化分支。     

论宽严相济刑事司法政策视野下前科消灭制度的构建

一、对我国前科终身制法律规定的检讨犯罪前科作为一个学理上的词汇,在我国现行法律法规中并没有专门规定。关于前科之定义,一种观点认为:"所谓前科,是由于法院因行为人实施犯罪而对其判处刑罚且刑罚已经执行完毕或者被赦免后在一定期间内的一种法律地位。"①另一种观点则认为:"前科是指曾被宣告犯有罪行或被判处刑罚的事实。被宣告犯有罪行可以是人民法院进行的,也可以是人民检察院进行的,至于被宣告犯有何种罪行或者被判有何种刑罚及刑罚是否执行,均不影响前科的成立。"②     

当前就业问题形成的相关因素分析与政策选择

就业形势日益严峻,失业群体不断涌现,已成为当前我国和谐社会发展的一个重要障碍。只有强化政府责任,优化就业结构,提升就业、再就业能力,构建公共就业服务体系,才能为更好地解决就业问题拓开路径,进而推进社会主义和谐社会建设。     

农村地区盗窃犯罪的高发原因、特点及侦查对策

当前,盗窃犯罪已成为阻碍新农村建设的一大不利因素。这类犯罪具有发案率高、侵害对象范围广等特征,左右着农村刑事案件的总量。因此,基层侦查部门应认真研究此类案件的高发原因和特点,采取有针对性的措施,提高打击这类犯罪的能力,为建设新农村、构建和谐农村社区创造良好的治安环境。     

论赔礼道歉民事责任方式的适用

赔礼道歉源于道德责任,是集话语性、强制性、人身性、惩罚性于一体的责任方式。其实质是行为人认识到自己行为的错误而产生的内疚感,是"自向性行为",法院的强制性适用不能达到赔礼道歉的目的。赔礼道歉的内容应当作出明确解释。在现行法律规定下,法院在判决中应当谨慎适用,更不可超出法律规定之外适用赔礼道歉。     

情感过滤假设理论在大学英语教学活动中的应用

20世纪80年代初,美国著名语言学家克拉申提出了二语习得模式,其中"情感过滤假设理论"阐述了学习者学习成绩的好坏跟学习者学习的动机、兴趣和焦虑度有直接关系,在学生第二语言习得的教学活动中,教师应充分考虑学生的情感因素,要想使学生的学习情感过滤达到最低,教师应创新教学思想,激发学生学习动机;应完善教学模式,选择合适的课堂教学方法,培养学生学习兴趣,并且创造良好学习氛围,增强学生自信,减少情感焦虑.     

基本经济制度视域下国企混合所有制改革的基本思路

混合所有制经济的性质取决于其资本结构和控股资本的所有制性质,并因资本构成类型不同和控股资本的所有制性质不同而有所差异.推进国有企业混合所有制改革,必须坚持中国特色社会主义的发展方向,遵循基本经济制度,不仅不能削弱而且应当增强公有制的主体地位,以有利于增强国有经济宏观控制力和影响力.因此,应以国有资本控股为主流,倡导不同法人的国有资本相互融合,形成由不同法人国有股构成的股份制企业.在资本混合上应以增量混合改革为主,各级政府在混合所有制改革的指导思想上应保持清醒的认识.     

全球金融空间变化趋势与国际协调

目前,世界经济陷入长期低迷,金融脆弱性加剧,全球金融空间呈现出新的变化趋势,体现为数字金融发展对金融地理的影响、全球金融空间功能性分化、全球金融中心的多极化与生态化。这些变化趋势推动着全球金融空间内主体多元化与功能结构的改变,随之而来的风险包括全球金融治理效率低下、国际经济政策协调空间被挤压等。为此,作为新兴大国,中国应敦促国际社会以新型网络化治理增加国际协调空间,以帕累托改进化解国际金融监管协调困境,并在"一带一路"建设与金融开放进程中,做到工具理性与价值理性统一,营造出具有区域特色的金融生态,以便在全球金融空间变化过程中,对本国在空间中的定位与伙伴国的选择进行清晰的预判。     

215例枪支上接触DNA检材的检验分析

目的分析215例枪支上接触DNA提取、送检及检验结果,探讨枪支上接触DNA检出情况及可能影响检验结果的影响因素。方法收集自2013年以来受理的215例涉案枪支上接触DNA检材,按照提取部位、检出率、送检时间、检验方法进行分类并对数据进行统计分析。结果215例接触DNA成功检出35例,检出率为16.28%;枪支上不同部位接触检材的检出率无明显差异;硅膜法与改良硅珠法的检出率无明显差异;送检时间早的检材检出率高于送检时间晚的检材并具有统计学意义。结论枪支上接触DNA的检出率与提取部位、送检时间、检验方法等因素有关,日常类似检材应合理提取、及时送检并采取正确检验方法。