旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆与原核表达

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子(Tsserpin)基因序列设计1对引物,从旋毛虫肌幼虫提取总RNA,应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,进行限制性酶切后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-Tsserpin,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经PCR、限制性酶切分析及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行了诱导表达。SDS-PAGE分析表达产物,表达产物纯化后用Western-blotting鉴定Tsserpin重组蛋白的抗原性。PCR与酶切鉴定结果显示,构建的重组表达质粒pET30a-Tsserpin与预期结果一致。测序结果表明,插入片段为1122bp,编码373个氨基酸,与GenBank中旋毛虫Tsserpin基因的相似性为99%。含有pET30a-Tsserpin重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE分析结果显示,表达产物的分子质量约为48.5ku,而且主要以包涵体形式存在。Western-blot分析结果表明Tsserpin重组蛋白可以被旋毛虫感染猪阳性血清特异性识别,提示其具有良好的抗原性,可以作为猪旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。     

油田企业经济合同管理存在的问题及对策

一个企业的经营成败与合同管理有密切关系.分析和研究胜利油田企业合同管理存在的问题,提出企业适应形势需要,改变传统的合同管理模式,实施全员、全过程、全方位的合同管理,完善以合同管理为核心的管理机制,建立严格完整的合同管理流程、加强合同管理专业队伍建设等举措,是提高油田经济运行质量的必然要求.     

油田企业推进政治优势转化的思考

实现油田企业持续健康发展,需要切实推进政治优势转化,这不仅是油田企业发展的内在要求,更是适应改革发展形势的重要命题。当前,面对油田企业的改革发展正在跳出对传统发展方式和路径的依赖的新形势下,就需要在转变作风、制度建设、履职能力、典型培养和文化引领等方面,稳步推进政治优势转化。     

劳动者维权异常名录:价值考量与制度纠偏

为规制职场“碰瓷”式维权行为,一些地方建立了劳动者维权异常名录机制。从概念来看,“维权异常”并非严格意义上之法律术语,它与虚假诉讼、恶意诉讼存在交叉。该机制虽能在一定程度上遏制“职场碰瓷”、虚假诉讼等行为的发生,缓和仲裁机关、法院的压力,并有助于社会信用体系建设,但维权异常的认定及名录发布行为在法律属性上存疑,相关的惩戒措施存在损害劳动者提起争议处理权、就业权之隐忧,更不利于劳动者的个人信息保护与企业的自律合规管理。因此,制度未来改进应确立适格的权力主体,并引入主观目的要素综合判断劳动者是否构成维权异常,预采取的惩戒手段要符合比例原则之要求。此外,亦要改进相关配套制度,如注重劳动争议纠纷的源头治理,建立健全劳动仲裁与诉讼的收费制度。     

居家养老服务供给对老年人养老满意度影响研究——基于8省市调查数据的分析

党的十八大以来,以习近平同志为核心的党中央高度重视老龄化和老年人生活,养老工作养老政策体系日益完备,居家养老服务体系初步建立。利用2019年中国老龄化和养老工作调查数据,从服务供给角度分析居家养老服务建设对老年人满意度的影响,居家养老服务总体上提高了我国老年人满意度水平,对环境满意度影响高于生活满意度;呈现较强增量效应,即服务项目数量越多,老年满意度越高;呈现异质性效应,健康护理类服务影响最大,精神文化类和权益保障类影响较大,生活辅助类没有显著正向影响。根据我国现阶段老年人年龄结构特征,养老服务要重视注重由扶弱型向普及型、从补充型向提高型转变,鼓励多元主体供给,更好满足老年人多层次需求,提高老年人多方面满意度。     

Choosing relatives for DNA identification of missing persons

DNA-based analysis is integral to missing person identification cases. When direct references are not available, indirect relative references can be used to identify missing persons by kinship analysis. Generally, more reference relatives render greater accuracy of identification. However, it is costly to type multiple references. Thus, at times, decisions may need to be made on which relatives to type. In this study, pedigrees for 37 common reference scenarios with 13 CODIS STRs were simulated to rank the information content of different combinations of relatives. The results confirm that first-order relatives (parents and fullsibs) are the most preferred relatives to identify missing persons; fullsibs are also informative. Less genetic dependence between references provides a higher on average likelihood ratio. Distant relatives may not be helpful solely by autosomal markers. But lineage-based Y chromosome and mitochondrial DNA markers can increase the likelihood ratio or serve as filters to exclude putative relationships.     

线粒体DNA短片段复合扩增系统鉴别种属的研究

目的建立线粒体DNA短片段复合扩增体系用于种属鉴定的方法。方法提取人、牛、猪、羊、鸡的DNA,用所选的3对引物复合扩增细胞色素b基因（cyt b）片段、16srRNA基因片段和ND4基因片段,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测。结果人DNA扩增产物在358bp、157bp和110bp处各出现一条带;动物DNA扩增产物均只有358bp一条带。结论线粒体DNA短片段复合扩增鉴别种属的方法可区分人源性生物检材和其它动物样本,可应用于法庭科学实践。     

法律方法与几个相关概念的比较

在我国法学研究中,法律方法、法学研究方法、法学方法论、法律方法论等概念经常被混淆。文章通过比较法律方法与法学研究方法、法律方法与美国的法律方法课程、法律方法与法学方法论(法律方法论)等概念及其所对应的研究领域,阐明我国的法律方法研究,与世界各国法学界与法律界所关注的法律方法,都是围绕法律人实施法律的工作技艺与思想方法而展开的,重点是研究和探讨法律实施中的各种有效且有益的具体制度与思想方式,这一特点决定了它不同于更为宏观的法学研究方法与法学方法论(法律方法论);同时,由于我国开展法律方法研究迫切需要解决的是与我国法律实施相关的问题,因此,我国的特殊性,决定了我国有关法律方法的研究,主要是针对我国法治建设所面临的具体问题,故而,又不同于美国的法律方法课程。正是在与相关概念的区别中,展现出法律方法研究独特的价值。     

实施“大学生村官”计划存在的问题及对策

实施＂大学生村官＂计划,是党中央从党和国家事业发展需要出发,立足当前、着眼长远作出的一项重大决策。但该项计划在实施过程中还存在许多困难和问题,各级党委、政府及高校要加强对大学生的教育引导,帮助大学生树立正确的择业观;深化教育教学改革,开展职业教育培训;规范财政投入,落实资金保障;注重对大学生村官的培养使用并做好服务管理。