禽流感病毒M2e多拷贝重组蛋白的原核表达及其免疫原性分析

为了获得流感病毒M2e多拷贝重组蛋白并分析其免疫原性,通过比对GenBank中H5和H9亚型流感病毒的M2基因,选择其N端由23个氨基酸组成的胞外域(M2e)序列进行合成,并将4个M2e序列与3个位于HA246~260T/B细胞表位交叉串联,在其末端添加酵母转录因子,然后克隆到pGEX-6P-1载体中,表达重组蛋白。SDS-PAGE和蛋白免疫印迹试验分析表明,重组蛋白成功表达,而后纯化获得高纯度产物。经纯化的重组蛋白与弗氏佐剂混合后肌肉注射BALB/c小鼠,二免2周后采集小鼠血清并用ELISA检测M2e抗体水平;同时分离脾细胞并用ELISPOT检测特异性T细胞的数量。ELISA结果表明重组蛋白能诱导免疫组小鼠产生高水平的M2e特异性抗体;ELISPOT分析显示,在M2e肽段的刺激下,免疫组小鼠每1×106个脾淋巴细胞中的斑点形成数达150个。结果表明,成功表达的重组蛋白具有良好免疫原性,为广谱型流感病毒亚单位疫苗的研制奠定了基础。     

猪环曲病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

根据GenBank中猪环曲病毒(porcine torovirus,PToV)N基因的保守序列,设计合成1对针对PToV的特异性引物,建立了基于SYBR GreenⅡ检测PToV的实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法能很好地将PToV与猪伪狂犬病病毒、猪嵴病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、A群猪轮状病毒、猪瘟病毒、沙门菌和大肠杆菌区分开来,特异性强。检测PToV的N基因在8.65×101~8.65×108拷贝/μL范围内有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.998 9,扩增产物的熔解曲线分析只有1个单特异峰。所建立的实时荧光定量RT-PCR方法组内变异系数为0.29%~1.30%,组间变异系数为0.45%~1.80%,重复性较好。利用该方法对采集自四川部分地区的43份临床样品进行检测,实时荧光定量RTPCR检出13份阳性样品,与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%。结果表明建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异性较强、灵敏度高,可用于该病的临床检测和流行病学调查。     

基于过程管理的城市灾害应急管理综合能力评价体系研究

城市灾害应急管理综合能力是衡量该地区城市灾害管理水平的重要指标,建立科学合理的城市灾害应急管理能力综合评价体系是城市灾害管理的重要课题。本文借鉴了国内外城市灾害应急管理能力的研究成果,建立了基于过程管理的城市灾害应急管理综合能力评价体系,该系统包括灾前预警能力评价、灾中应急能力评价和灾后恢复能力评价等三个分系统以及12个子系统,并用综合评价表对政府部门的应急反应能力进行了实证分析。     

浅议空壳公司经济犯罪的治理

利用空壳公司实施的经济犯罪隐蔽性强、具体作案手法不断翻新。目前,我国存在诸多影响空壳公司经济犯罪治理的问题。对此,公安机关需要从加强信息分析、完善监管机制、消除作案动机等方面开展治理,探讨新形势下空壳公司经济犯罪治理面临的挑战、制约因素和应对之策。     

从日本公害判例看忍受限度论

<正> 前言所谓忍受限度论,是战后日本在公害判例中所提出的一种法律学说。它主张在社会生活中,如果侵害超过了忍受限度,不论加害者是否设置了相当设备,都认定为负有损害赔偿的责任。而过去日本,在优先发展经济观点支配下,出现了一些保护工业的判例。这些判例主张,只要企业按照其性质,安装了适当设备,即使偶尔对他人造成损     

论人类心理的文化普遍性研究策略

心理学家对于人类心理的普遍性本身及如何对其加以研究却一直没有加以明确的分析说明.对这些问题加以澄清以及阐明目前心理学家对人类心理共性的研究,对于人类心理共性的研究,心理学需要与人类学不同的研究策略.尽管研究者对人类心理的文化普遍性的兴趣日益增加,但在心理学领域还没有一套心理学家一致同意的可以据以考察人类心理的文化普遍性的方法论标准.制定出一些有助于研究者探究人类心理的文化普遍性的准则尤为必要和紧迫.     

我国技术市场发展历程与展望

技术市场作为科技体制改革的突破口,有力地促进了科技与经济的结合,对促进经济增长方式转变和经济结构调整,发挥了不可替代的基础性作用。梳理把握技术市场发展现状,研究新形势下技术市场发展的新思路,对于进一步推动我国社会主义市场体系建设和国家创新体系建设具有重要意义。     

西方自由贸易理论与发展我国劳动密集型产业的思考

我国拥有丰富而且廉价的劳动力资源,以劳动要素和资源禀赋差异形成的比较优势参与国际分工。带动了国内劳动密集型产业的快速发展。但这种优势目前正在面临挑战。要努力实现人力资源优势由数量型向质量型的转变,将比较优势转化为竞争优势,营造核心竞争力,推动产业升级。     

网络文化对高校青年学生价值观的影响及对策

网络的发展对人们的工作、生活以及价值观念产生了重大影响,由网络衍生出来的网络文化,在体现社会进步的同时,也给我国高校青年学生价值观教育也带来了严重的冲击。应加强高校网络德育工程建设,完善校园网建设,加强高校德育队伍建设,以利于青年学生价值观的形成和发展。     

安全监管、政府规制与社会和谐——中国煤矿事故原因探析及其解决出路

煤矿事故的频发问题,已经成为我国构建和谐社会和实现社会经济可持续发展的瓶颈,也是公共政策部门以及学术界关注的热点问题之一。本文首先从宏观的角度对矿难发生的原因进行了分析,同时基于监管机构和煤矿企业的利益考虑,构建了一个博弈模型,探讨了我国煤矿事故发生的微观原因。最后,文章提出了降低事故发生率,建设和谐社会的政策建议。