牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达

以牛分枝杆菌Vallee株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得mpb64和Ag85B两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)剪接mpb64和Ag85B,得到融合基因mpb64-Ag85B;将融合基因片段先克隆于pMD 18-T载体,再亚克隆到表达载体pET32a( )中,得到重组质粒pET64-85。该重组质粒经核苷酸序列测定,显示其中的外源片段与期望的序列一致;其BL21(DE3)转化菌经IPTG诱导表达带有6个组氨酸标签的融合蛋白;用Ni2 螯合层析方法纯化融合蛋白,Western-blotting分析结果显示,该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应。     

三、五年级学英语起点和语音发展的实验研究

本研究比较三、五年级起点的学生英语语音语调的发展.研究采用准实验设计,样本包括198名中国小学三、五年级学生和15名美国小学生.学年结束时,对被试施行朗读测验、单人单盒磁带录音并将录音带匿名编号、随机混合,由3名英美人以随机顺序各自独立评分.结果表明:无论是按学校分类、按性别分类、还是按任课教师分类,五年级被试的平均分都显著地高于三年级被试,且处于最高分数段者也多是五年级被试.     

马克思主义人权思想中国化的规律探析

改革开放30年来,马克思主义人权思想与中国实际相结合,实现了理论的中国化,而对这一过程所体现规律的揭示是至关重要的.马克思主义人权思想中国化的规律可概括为：坚持了唯物史观的理论指引;以实现人的自由和全面发展为奋斗目标;这一过程始终伴随对西方主流人权思想的批判;是马克思主义普遍真理与中国实际相结合的典范.这四个方面相互结合共同实现了马克思主义人权理论的中国化.     

China's stance on the Google/Motorola merger: Implications for competition in intellectual property-intensive sectors

China's merger enforcement agency approved the Google/Motorola merger with conditions. This pattern of approval is not in full accordance with that in other jurisdictions, including the United States and the European Union, which made unconditional approvals. This contradiction attracted ample criticism; some critics believe that China's policy is designed to protect domestic industry. In investigating the Chinese merger agency's decision and the basis for its decision making, this article finds that much of the criticism is groundless and misleading because the critics have failed to incorporate all elements of the global value chain of mobile intelligent terminals into their analyses. The investigation also shows that, although the decision makers are less experienced, their decisions are based on Chinese competition law and market realities. It is important for international firms to be aware of this pattern in merger analysis.     

IMA和H-FABP在心源性猝死法医学诊断中的应用

急性心肌缺血的发生是心源性猝死的最常见原因,而如何认定早期急性心肌缺血是法医学研究的热点,同时也是临床预防心肌梗死发生的重要环节。本文通过对缺血修饰白蛋白(ischemia modified albumin,IMA)和心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid binding protein,H-FABP)的结构、功能、临床应用价值及法医学中的应用前景进行综述,旨在分析二者是否可作为早期心肌缺血的生化检测指标用于心源性猝死的诊断,并为今后选择心源性猝死的科研方向提供借鉴。     

大熊猫轮状病毒CH-1株外衣壳蛋白VP4基因的克隆与生物信息学分析

利用MA-104细胞培养增殖大熊猫轮状病毒CH-1株,提取总RNA,运用RT-PCR扩增外衣壳蛋白VP4基因,将其与pMD19-T simple vector连接并转化DH5α,经PCR扩增和测序分析进行鉴定,用生物信息学软件预测其功能,并构建系统进化树。结果显示,成功获得大熊猫轮状病毒VP4蛋白基因,长2 362bp,包含一个2 331bp的开放阅读框,编码776个氨基酸,测序结果在GenBank中的登录号为HQ641296。生物信息学分析表明,VP4蛋白基因编码产物分子质量为86 768.8u,理论等电点为5.56,半衰期为30h(体外哺乳类网状细胞),不稳定系数为28.64,脂肪指数为82.53,总平均亲水性为-0.265,最大疏水性为2.244,最小疏水性为-2.911;无信号肽序列;跨膜结构分析显示VP4蛋白无跨膜区,位于病毒膜外区;在VP4序列中的抗原决定簇主要位于VP4的N-末端和C-末端。预测其可能包含8个N-糖基化作用位点,15个蛋白激酶C磷酸化作用位点、15个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化作用位点、12个N-豆蔻酰化位点。系统进化分析显示,大熊猫轮状病毒的VP4基因与猪轮状病毒的VP4基因的进化距离最...     

论防卫过当的主观罪过形式

防卫过当的主观罪过形式众说纷纭,莫衷一是。新刑法规定的防卫过当罪过形式不可能由过失构成,而只能表现为故意,且只能是间接故意。     

广西出口产业竞争优势现状分析及对策

广西具备发展外向型经济的良好条件,拥有沿海、沿边、沿江的区位优势、丰富的自然资源和最富集的政策资源。但是,近年来,广西的出口增长却非常吃力,每年十几亿美元出口总额中外省货源比重约占1/4左右;出口竞争优势远没有充分发挥出来。文章在分析广西出口产业竞争优势、存在制约因素的基础上,提出一些对策建议。     

甲卡西酮对大鼠血浆代谢谱变化研究

目的 应用代谢组学技术研究腹腔注射甲卡西酮大鼠血浆代谢谱的变化,筛选出可用于甲卡西酮吸毒法医学鉴定的入体生物标志物.方法 SD大鼠随机分成低剂量甲卡西酮组(腹腔注射甲卡西酮溶液3mg/kg)、中剂量甲卡西酮组(腹腔注射甲卡西酮溶液12mg/kg)和对照组(腹腔注射等量生理盐水),注射3min后收集大鼠眼眶血,应用超高效...     

山羊痘病毒RPO30基因绿色荧光蛋白质粒的构建及融合表达

为了研究针对山羊痘病毒RPO30的siRNAs的干扰效果,构建了RPO30基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达.通过对RPO30基因进行PCR扩增,克隆入表达载体pEGFP-N1,并进行双酶切及测序鉴定;将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和RPO30...