鸭疫里氏杆菌外膜微孔蛋白基因的克隆和序列分析及PCR检测方法的建立

根据GenBank中的鸭疫里氏杆菌(RA)外膜磷酸盐选择性微孔蛋白(Porin)基因序列设计特异性引物,以血清1、2、6、10、11、13、14和17型RA菌株的基因组DNA为模板均扩增出大小为1 212bp的目的片段,序列比对显示该基因在8种血清型菌株间同源性均大于99.6%。针对保守性最高的357bp片段设计特异性引物,建立了PCR检测方法,对鸭致病性大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、鸭巴氏杆菌及鸭肝炎病毒均未扩增出目的条带,表明该方法具有较高的特异性;敏感性试验显示最小检出量为73.96pg的基因组。应用建立的PCR方法对分离自吉林、河北及北京的8个菌株进行扩增,均在357bp处扩增出清晰的目的条带,与细菌分离鉴定的符合率达100%。本研究为RA的鉴定提供了新方法,为RA外膜微孔蛋白的后续研究提供了理论依据。     

GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建及原核表达

为构建具有示踪特性的新城疫病毒(NDV)HN基因乳酸菌穿梭表达载体,采用PCR方法扩增NDV HN基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因,将两基因克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,转化入表达宿主菌BL21(DE3)后利用IPTG诱导表达。用荧光显微镜检查重组菌的绿色荧光效应,采用SDS-PAGE和Western-blotting检测其在大肠杆菌中的表达情况。结果显示,NDV HN和GFP基因与表达载体pW425et正确重组。荧光显微镜下可见阳性重组菌落的绿色荧光,且该重组菌传代30代次以上,荧光效应依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63ku的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western-blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性血清所识别,具有反应原性。构建了GFP标记的重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体且能在大肠杆菌中表达。     

行业协会限制竞争行为的反垄断法规制

行业协会是被我国<反垄断法>规制的主体之一,由于其自身性质和特点,在实践中既可以雏护和规范竞争秩序,也可能成为限制竞争的工具.行业协会的限制竞争行为与一般的经营者相比,还存在隐蔽性强、持续时间长、危害范围广等特点,各国对行业协会的限制竞争行为一般采用了较为严格的规制措施.相比美国、德国、日本等国的反垄断立法,我国<反垄断法>在对行业协会限制竞争行为的规制上存在诸多不足,主要表现为认定标准不明确,行业协会的范围不明晰,豁免制度不完善和法律责任体系不健全等,有必要通过立法对行业协会进行明确界定,并针对存在的问题进行立法完善.     

略论高职院校秘书专业建设的几个常规问题

高职院校秘书专业建设主要包括专业名称、职业背景、培养目标、课程体系、培养模式和建设规划等一些常规问题。应该从＂正名＂的意义上进行专业命名,从社会期待和业务工作需求的角度确定能力培养的范畴,其培养目标应该以就业为导向并且有不同层面,其课程体系应该与职业能力和职业资格相对应,用独特的课程模式和实训模式来体现培养模式,并重视师资培育和硬件设施的配置。     

浅谈变形及残损弹头上痕迹的分析和利用

进膛痕迹、线膛痕迹、坡膛痕迹、拔弹痕迹是弹头经枪械运动循环后,在弹头上形成的四种主要的弹头痕迹。此四种痕迹,可客观地反映出枪械内部主要元件的主要特征及其上的凸凹抗丘的细节特征。此四种痕迹成为弹痕检验中区分发射枪种、认定发射枪支的客观依据和事实基础。但是由于实际发射情况的千变万化,弹着客体材质的千差万别,在实际工作中从现场提取的弹头往往是变形的,甚至是残损的。因此,射击弹头的损伤变形程度受弹头本身结构材料、客体性质、不同的贯穿方式等诸多因素的影响。     

生态文明视角下当代中国先进文化建设研究

先进文化就是能够反映和支撑社会历史前进方向的文化,它是人类文明进步的结晶,代表未来的发展方向,代表人民的根本利益,是推动人类社会前进的精神动力。"与时俱进"是先进文化的基本特征。从整个人类文化的角度看,人类文明的前进方向就是先进文化的前进方向。生态文明是继工业文明之后的一种新的生存和发展理念。当代中国的先进文化建设应反映生态文明的理念和要求。     

论城市房屋拆迁中物权的行政法保护机制

城市房屋拆迁中物权的行政法保护,要求在明确公共利益范围的基础上构建科学的城市房屋拆迁法律体系,以缜密的拆迁程序为主线严格规制拆迁规划、征收、许可等拆迁执法行为,以构建补偿安置制度为核心全方位完善城市房屋拆迁中的行政补偿、行政复议和行政诉讼等救济制度。     

植入式广告法律监管海外经验之管窥与启示

植入式广告作为一种新兴的广告传播形式,渗透到一切可能的传播领域,产生显著的传播效用,成为传统显性广告的重要补充形式。植入式广告的泛滥或未受节制,使节目广告化的现象影响了节目质量及观众的收视权益,并侵蚀影视媒体的公信力。美国、日本的植入式广告法律监管做法和欧盟关于植入式广告监管的最新进展,为我国提供了有益的借鉴——通过修订更合时宜的管理规范并在合理有效的行政监管的基础上,进一步走向行业自治。     

试论信息时代政府再造与电子政务之关系

电子政务是信息时代政府再造的理性选择 ,信息时代的政府再造和电子政务关系密切 :电子政务是政府再造的重要手段和推动力 ;而政府再造又必须为电子政务建设建立坚实的基础 ,二者的有机结合可以更好地实现政府再造的重要目标 ,最终建立一个适应信息时代要求的政府治理模式。     

美国内珀维尔市物业管理简介(二)

(上接 2005年第 1期第 42页)2　物业管理委员会(1)通过业主选举会议,从业主中选举物业管委会委员,决定物业管委会委员的名额,并由当选业主组成物业管委会。所有管委会委员都要经业主选举委任,但每年至少要有三分之一的管委会委员任期期满。如果一个单元有几位房主,则只有其中一位可以合法成为同一届管委会委员。(2)管委会的权力和义务。(3)管委会委员的协调。(4)管委会委员退出管委会办公室的办法。(5)管委会可行使经理职责或管理代理。(6)管委会制订每年的支出预算报告,单列储备金、资本费用、修理费和房地产税等,并在实施前 30天交业主一…