负载灭活口蹄疫病毒树突状细胞启动的CD4~+T细胞应答

为研究负载灭活口蹄疫病毒(iFMDV)树突状细胞对CD4+T细胞的活化效应,用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白介素-4(rmIL-4)将小鼠外周血单核细胞诱导分化成树突状细胞(MoDCs),以信号阻断法制备淋巴结CD4+T细胞,利用负载iFMDV的MoDCs与CD4+T细胞共培养,以iFMDV+MoDCs作为对照,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。用溶酶体抑制剂处理MoDCs,2h后再负载iFMDV,并与CD4+T细胞共培养,对照组则用iFMDV+MoDCs+CD4+T细胞,用ELISA检测不同时间培养上清液中IFN-γ的含量。结果显示,在共培养后第9和48小时,CD4+T细胞组与对照组比较差异均极显著(P<0.01)。共培养后第24和36小时,CD4+T细胞组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。溶酶体抑制剂处理后,共培养第9、24、36和48小时组与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。这表明MoDCs可通过溶酶体-MHC-Ⅱ途径向CD4+T细胞提呈iFMDV抗原,并且活化的CD4+T细胞可分化成Th1细胞。     

狂犬病病毒抗体免疫金标检测试纸的制备及其应用

为了建立一种快速检测狂犬病病毒抗体水平的方法,用浓缩提纯的狂犬病病毒CVS11株作为胶体金标记抗原,以金黄色葡萄球菌A蛋白为检测线上的捕获抗原,制备狂犬病病毒抗体水平检测试纸条。应用该试纸条进行临床样品检测,结果表明,以稀释后的犬全血或血清作为检测样品,试纸条检测的灵敏度为0.002U/mL,特异性试验证明该试纸条与犬细小病毒、犬瘟热病毒、犬腺病毒2型犬科疾病阳性血清没有交叉反应,稳定性试验证明该试纸条在室温下保存的有效期为12个月,检测结果与快速荧光抑制试验的符合率为95.12%。证实该狂犬病病毒抗体免疫金标检测试纸可以方便、快速、灵敏、特异地检测狂犬病病毒的抗体水平。     

鸡肠相关性淋巴组织中IFN-γ和IL-2 mRNA表达的动态变化

通过实时荧光定量PCR方法,检测鸡在胚胎时期和出壳后初期肠道相关性淋巴组织(GALT)中IFN-γ基因和IL-2基因mRNA的表达水平,从而了解鸡GALT免疫功能的建立情况并反映鸡在此阶段的免疫状态。结果显示,胚胎20日龄和出壳后1日龄各肠段GALT中均有少量IL-2mRNA和IFN-γmRNA的表达。盲肠扁桃体、直肠和食管扁桃体中IL-2基因的表达水平在出壳后4日龄时显著升高(P<0.05),而在7日龄时又略有下降。除食管扁桃体外,各肠段GALT中IFN-γmRNA的表达水平在4日龄时显著升高(P<0.05),而空肠、回肠和直肠中其表达水平在7日龄时又显著下降(P<0.05)。各肠段在第2周内IL-2基因和IFN-γ基因表达水平迅速升高,并在14日龄时达到最高峰,之后各日龄都趋于稳定。另外,各日龄同一肠段IFN-γ基因的表达水平要明显高于IL-2基因的表达水平。证实,鸡GALT在出壳后4日龄就初步具有细胞免疫功能,直至第2周尤其是14日龄时其功能基本达到成熟水平。     

国际商事仲裁错误裁决司法审查救济制度的缺陷与克服

内国法院的司法审查对于保障国际商事仲裁的公平公正具有重要而积极的作用。但是,作为当事人权利救济的主要甚或唯一途径,司法审查制度却存在救济范围有限、救济效力不确定、与国际商事仲裁本质不相容等缺陷,限制了仲裁解决国际商事争议的独特优势及潜力的发挥,阻碍了国际商事仲裁的发展。克服这些缺陷的有效方法是仿效国际商品仲裁和国际海事仲裁等实践,设立仲裁内部上诉机制供当事人选择适用。     

当前涉黑犯罪的特点与成因调查——以重庆11个典型案件为样本

重庆的典型案件表明,当前涉黑犯罪仍以追求巨额经济利益为终极目标,并以合法公司掩护下的非法经营活动为主要获利途径,以文化素质较低的无业青壮年为主要涉案人员,以感情联络、"家规"和公司制度为对内约束、控制成员的主要方式,以暴力、"保护伞"和群体事件为对外形成非法控制或重大影响的主要手段,严重动摇了当地的经济、政治和社会生活基础。究其原因,主要有:价值观、利益观的扭曲和满足需求方式的异化,基层行政执法和行业治理的不力,社会帮扶制度的不完善,亚文化的不良影响,国家工作人员的非法保护,法律制度的不完善和治理对策的不科学。     

小反刍兽疫病毒非结构蛋白V基因的克隆及其编码蛋白的结构与功能

采用RT-PCR技术从小反刍兽疫病毒总RNA中扩增到P基因一段896bp序列,克隆至pET-30a(+)载体中,对其进行最大开放阅读框691位定点突变(插入一个G碱基),获得小反刍兽疫病毒V基因,利用生物信息学软件对麻疹病毒属V蛋白氨基酸序列进行比对,同时使用I-TASSER服务器对小反刍兽疫病毒V蛋白三级结构进行同源建模,分析其结构与功能。结果显示,小反刍兽疫病毒V蛋白氨基酸序列与麻疹病毒、犬瘟热病毒、牛瘟病毒和海豹瘟病毒V蛋白的相似性分别为61.1%、56.0%、61.7%和51.7%,三级结构预测显示V蛋白由多α-螺旋的N-端结构域、中间结构域和含锌指结构的C-端结构域组成。本研究成功克隆了小反刍兽疫病毒V基因,预测分析了V蛋白结构和功能的关系,为其分子生物学和功能的进一步研究奠定了基础。     

印楝油两性不育灭鼠颗粒制剂对高原鼠兔抗生育作用的研究

为筛选印楝油两性不育灭鼠颗粒制剂的最优主药量,并探究其对高原鼠兔的抗生育作用,将主药浓度为300g/kg和400g/kg的印楝油两性不育灭鼠颗粒制剂分别进行摄食系数的研究,筛选出适口性较好的制剂,进一步研究适口性较好的制剂对高原鼠兔怀孕率和生殖器官的影响,并用免疫组织化学法检测输卵管和子宫的细胞凋亡情况。结果显示,主药浓度为300g/kg、400g/kg的颗粒制剂对高原鼠兔的摄食系数分别为0.97和1.87,二者之间差异显著(P<0.05);主药浓度为400g/kg的印楝油颗粒制剂对高原鼠兔的抗生育率为70%,对睾丸、附睾、子宫、输卵管和卵巢均有明显的病变影响,并且促进子宫细胞凋亡。结果表明,主药浓度为400g/kg的印楝油两性不育灭鼠颗粒制剂适口性良好,对高原鼠兔有良好的抗生育作用,有望用于草原鼠害的防制。     

埃博拉病毒苏丹型核蛋白的原核表达及纯化

将目的基因NP亚克隆入原核表达质粒pET-28(a)中,构建了重组表达载体pET-28(a)-S-NP,然后用重组质粒转化BL21(DE3)感受态细菌,并利用IPTG诱导蛋白表达。将表达的蛋白利用His-Band Ni+柱进行亲和层析纯化,Western-blot鉴定表达蛋白。结果显示,重组质粒经双酶切后可得到与目的片段长度相同的特异性条带;测序结果显示此特异性条带与参考序列完全匹配,没有突变。纯化后的蛋白经SDS-PAGE和Western-blot鉴定,表达正确。结果表明,成功构建了重组表达质粒,且表达产物正确。     

论患者知情同意权的行使与紧急救治的关系

随着公众观念的转变和法律意识的增强,医患之间的冲突已成为当今社会的一个突出矛盾。医疗纠纷多与患者知情同意权有关,在对患者知情同意权详细了解的基础上,重点分析紧急情况下患者的知情同意权与医生紧急救治措施实施之间的冲突,以期寻找到合理解决之道。     

美国社会的维护者:李普塞特社会保守主义思想论析

李普塞特是美国著名的政治学家和社会学家,也是新保守主义阵营的领军人物。在社会领域,他的保守主义思想主要表现为四个方面:对新社会运动的批判、对美国社会文化价值体系的推崇、对工人阶级的警惕和对中产阶级的推崇、对美国社会权威危机的担忧。总的来看,他维护现行的美国社会秩序和文化价值体系,对破坏现行秩序和价值的因素进行了揭示和批判。