口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达

为验证siRNAs对口蹄疫病毒(FMDV)复制的抑制效果,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Asia 1型口蹄疫病毒Jiangsu/China/2005株的3C基因,克隆入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-N1中,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染PK-15细胞,检测EGFP的表达和3C基因转录水平。结果显示,经PCR及双酶切鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与Jiangsu/China/2005株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内有EGFP表达,实时荧光定量PCR检测到细胞内有3C基因的转录。证实,成功构建了FMDV 3C基因与EGFP共表达质粒并在PK-15细胞中获得了表达。     

链球菌猪主要致病种和型多重PCR检测方法的建立

根据GenBank中登录的链球菌属保守基因(EF-TU)、猪链球菌种保守基因(GDH)、C群马链球菌兽疫亚种保守基因(M-like)、猪链球菌型特异性基因(SS1型CPS1I、SS2型CPS2J、SS7型CPS7H和SS9型CPS9H)的序列设计合成7对引物,建立了一次性在属、种、型3个水平上检测链球菌猪主要致病种和型(C群马链球菌兽疫亚种和猪链球菌1、2、7、9型)的多重PCR方法。结果显示,该多重PCR在退火温度为61℃时可一次性扩增出7条符合预期大小、序列正确的基因条带;特异性试验和准确性试验结果均符合预期,无非特异性、交叉反应、假阳性、假阴性条带出现;对16株临床分离鉴定链球菌的检测结果与细菌学鉴定及单纯PCR鉴定的符合率均为100%;敏感性为0.08ng/μL;5次重复试验的结果也完全一致。结果表明,建立的多重PCR方法具有高度特异性、准确性、敏感性和稳定性,适用于猪场链球菌病的监控和流行病学快速诊断。     

牛羊赤羽病病毒环介导等温扩增检测方法的建立

为建立一种能够快速、简便地检测牛、羊赤羽病病毒的分子生物学方法,根据赤羽病病毒特异性S基因的6个特异区域设计了2对引物,首次建立了赤羽病病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法,对LAMP反应条件进行了优化,并将其与普通PCR方法进行比较。结果显示,LAMP检测方法的特异性好,只对赤羽病病毒进行扩增,且操作简便。本研究确定的最佳反应温度为63℃,核酸检测的最低检出限为1.08ng/μL,比普通PCR的灵敏度高2个数量级。该方法为赤羽病病毒的一种最新的快速、简便的检测方法,可用于出入境牛、羊赤羽病的快速检测。     

广东省6～15周岁汉族人牙龄的研究

目的研究广东省6～15周岁人群牙齿钙化的规律,建立根据牙齿钙化程度推断未成年人年龄的方法。方法观测2 710例（男性1 363例,女性1 347例）广东省6～15周岁汉族人全口曲面断层影像片,对其下颌牙齿钙化程度进行评分分级,所得数据经SPSS软件统计分析,建立根据牙齿钙化程度推断年龄的方程,并以100例（男60例、女40例）研究外样本进行盲测。结果数据统计显示,两侧同名牙钙化评分分级值的差异无显著性意义（P〉0.05）,而性别间差异有显著性意义（P〈0.05）;下颌单侧8颗牙齿的钙化评分分级值与年龄相关系数（r）女性为0.552～0.759,男性为0.672～0.838;所建回归模型拟合优度（R2）均在0.7以上,估计值标准误男性为0.91～1.11岁,女性为0.92～0.98岁;盲测推测年龄与真实年龄平均误差男性为0.429±0.282岁、女性为0.399±0.252岁。结论本研究所建方法推断结果准确可靠,可用于广东地区6～15周岁人群年龄推断。     

中国北方汉族人群FUT6基因3个SNPs遗传多态性

目的对中国北方汉族人群FUT6基因编码区序列特征及等位基因多态性进行调查。方法测序分析30例中国北方汉族人FUT6基因整个编码区序列并鉴定其单倍型,采用复合PCR与复合限制性内切酶结合的RFLP法分析FUT6基因rs778805（C370T）、G855A及rs61147939（C907G）3个SNPs遗传多态性;应用Haploview4.1软件进行相关统计分析。结果 30例测序样本中共检出8个SNPs和6种单倍型,149例中国北方汉族个体C370T、G855A、C907G基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡。杂合度分别为0.544、0.416、0.510;多态信息含量为0.375、0.372、0.367;个人识别能力为0.600、0.651、0.603;非父排除率为0.187、0.186、0.183。PCR-RFLPs检出13种基因型,单倍型变异度为0.646。Haploview4.1软件分析表明3个SNPs处于连锁不平衡状态。结论中国北方汉族人群FUT6基因编码区序列呈现出高度多态性;C370T、G855A、C907G位点多态性分布良好,但处于连锁不平衡状态。     

中国汉族6-18周岁男性牙齿生长发育的年龄研究

目的研究牙齿钙化程度与年龄的关系,建立利用牙齿钙化程度推断中国汉族6～18周岁男性年龄的办程。方法通过对6568名6～18周岁汉族男性全口曲面断层影像上牙齿的钙化程度进行评分;将分级值及其对应年龄输入SPSS软件进行分析,建立推断年龄的方程模型;从研究样本外随机抽取已知年龄的样本160例进行卣测,,结果同名牙齿钙化评分值侧别间秩合检验结果P〉0．05;下颌左侧恒牙钙化评分值与年龄相关分析结果r值均存0．7以上,下颌同名牙间相关系数r均在0．9以上;所建回归模型拟合优度R^2=0．828,估计值标准误为1．23岁;阿测平均洪差为0．423±0．269岁。结论本研究所建立的方法准确可靠,可用于中国汉族6～18周岁男性人群的年龄推断。     

云南省10个少数民族遗传分化和基因流动

目的 基于9个CODIS STR基因座(CSFIPO、FGA、THOI、TPOX、vWA、D3S1358、D5S818、D7S820和D13S317)分型数据,探寻云南地区10个主要少数民族的遗传分化及基因流动特征.方法 计算出各基因座的杂合度和分化指标F、θ、f和Gst.分别采用Phylip 3.6和Arlequin...     

弘扬现代大学精神增强高校道德建设

高等学校作为人类文明历史发展的产物,是传承文化和培养人才的重要场所。高等学校所培养的人才不仅需要掌握较扎实的专业知识,更重要的是还应具备高尚的思想道德情操。文章从当前高校道德建设方面入手,结合大学精神的特征、内容与功用等,探析了其对高校道德建设的重大作用,以期通过培养与构建现代大学精神来引领高校道德建设。     

女性在整形美容实践中的角色分析

随着经济的繁荣与医学的发展,整形美容业在我国悄然走俏,并逐渐成为一种普遍的大众消费形式.尽管整容导致毁容的事件频频出现,广大爱芙女性仍不改初衷,前赴后继地加入"整形美容战"中.然而,女性在这场没有硝烟的战争中扮演着何种角色?对此大致有两种对立的观点:被动受害者和主动行动者.整容看似是一种自我的积极改变,本质却是通过"自残"抵抗自己无力改变的命运,因此广大女性应理性地看待这一行为,做出科学合理的决断.     

我国房地产登记机构赔偿责任的法律思考

房地产登记机构的赔偿责任是我国当前不动产物权登记立法中的重大、疑难问题之一,理论上对此也多有纷争。从我国房地产登记的立法精神以及实践做法来看,登记机构的赔偿责任应当认定为以过错归责为原则的国家赔偿责任。在共同责任形态下,应当根据侵权责任法的原理科学分配登记机构的赔偿责任形态。同时,应当借鉴国外经验,适当限制房地产登记机构的赔偿范围,并建立以专项赔偿资金为主体、以追偿和罚款所得为补充的资金保障制度。