Attacin-Thanatin杂合抗菌肽的融合表达及其菌内抑菌活性

构建杂合抗菌肽Attacin-Thanatin(简称mAT)融合表达重组菌株,对其在大肠杆菌系统中的表达特性及其融合表达产物的菌内抑菌活性进行了研究.将mAT重组表达质粒pET-mAT(pe)依次转化宿主菌E.coli DH5a、BL21(DE3)、Rosetta-gamiTM(DE3)pLysS,采用IPTG诱导表达;优化筛选该抗菌肽的敏感菌株、IPTG浓度、宿主菌诱导起始浓度等,初步建立了抗菌肽菌内抑菌活性检测方法,用于研究该杂合抗菌肽的体内抑菌活性.SDS-PAGE分析结果显示,宿主菌Rosetta-gamiTM(DE3)pLysS可获得表达的融合产物,而E.coli DH5α、BL21(DE3)经IPTG诱导后未检测到目的条带;优化结果显示,以E.coli DH5α宿主菌、IPTG工作浓度0.1 mmol/L、起始诱导菌浓度D600nm值0.3为检测抗菌肽菌内抑菌活性的最佳条件;mAT融合表达产物抑菌活性的检测结果显示,宿主菌被本身所表达的杂合抗菌肽融合蛋白所抑制,增殖速度放缓.利用Rosetta-gamiTM(DE3)pLysS有效融合表达mAT并初步建立的抗菌肽菌内抑菌活性快速检测方法为进一步研究mAT奠定了基础.     

主观意图也可决定行为性质——从一起特殊的案件引发出来的浅论

世间万物是复杂的、多变的,刑事案件也是离奇的、怪异的。因此,在认定行为性质时,尤其需要针对个案的特殊性,运用刑法理论,进行具体分析。务求因事而别,因人而异,切不可一概而论。笔者作为辩护人承办的这起案件就是典型的一例。一个犯罪行为分为三个发展阶段被告人王某和被富人张某早在1980年相识,1982年第一次合伙做生     

略论社区思想政治工作创新

思想政治工作的重点从单位转移到社区,需要思想政治工作从内容到形式都应有创新:要充分发挥党员在构建和谐社会中的模范作用;思想政治工作的开展应以价值导向为主;要把理想信念教育落到实处;正确的舆论导向要和丰富群众的文化生活结合起来,增强思想政治工作的渗透力和感召力。     

比利时养老模式对我国养老体系建设的启示

比利时作为典型的欧洲发达国家,在养老体系和长期照护制度建设上积累了较为成功的经验.本研究归纳和分析比利时养老模式、相关养老法规政策、养老经费筹集以及服务提供方的资质等,意在为进一步完善我国的养老体系提供参考.当前,比利时形成了居家养老、短期照护、老年公寓、养老院、老年护理院和老年病房等6种养老模式,并具有完善的法规和政...     

数学教学中的素质教育

数学学科的特点 ,决定了数学教学在素质教育中的不可替代的作用。在教学中 ,介绍数学发展史 ,能帮助学生树立正确的人生观、价值观 ;解数学题是做“思维体操” ,能使学生形成良好的思维习惯及一丝不苟的学习作风 ;在教学中教会学生观察、类比、联想、归纳、审美的方法能培养创新精神。     

医疗责任保险制度初探

笔者从医疗风险、医疗责任保险的可保性及医疗责任保险的性质与意义等方面多角度的进行详细的论述,对医疗责任保险制度在国内外的发展及现状进行了较为客观的分析,最后结合我国实际,在借鉴国内外成功经验的基础上提出了我国建立医疗责任保险制度的初步构想。     

对作为行政诉讼“通道”的功能性概念的再认识

鉴于目前学界对具体行政行为概念的诸多歧义 ,有必要对这一作为行政诉讼“通道”的功能性概念重新命名。借鉴德国的行政处分概念 ,可将“具体行政行为”称为“行政处理决定”或“行政处理行为” ,以完善我国的行政诉讼制度     

分子印迹固相萃取法在血中苯丙胺类毒品分析中的应用

目的建立分子印迹固相萃取（MISPE）、GC/MS分析方法,用于血液中苯丙胺类毒品检测。方法 10mmol/L醋酸铵缓冲液（pH8.0）4倍稀释空白添加血液,1mL甲醇,1mL10mmol/L醋酸铵缓冲液（pH8.0）活化苯丙胺类分子印迹固相萃取柱;2×1mL去离子水、1mL60%的乙腈去离子水、1mL1%醋酸乙腈洗涤杂质;2×1mL1%甲酸/甲醇洗脱,洗脱液挥干定容,经GC/NPD、GC/MS分析检测。结果各种苯丙胺类毒品回收率均在90%以上,在20～5 000ng/mL浓度范围内线性关系良好,r2为0.995 7～0.998 9,LOQ在16～30ng/mL之间,LOD在8～15ng/mL之间。结论本方法回收率高,净化效果显著,稳定性好,杂质干扰少,可用于血液中低浓度苯丙胺类毒品的分析检测。     

我国环境法教学模式的反思与探索

环境法教学模式的核心内容是教学目的、教学内容和教学方法。在教学的目的方面,环境法旨在培养学生环境法理念、传授学生环境法律知识、训练学生环境法学研究方法,从而为社会培养和输送环境法人才。在教学内容方面,环境法教学应着重处理好教材的选择和运用、理论知识的梳理和讲解以及实证材料的补充和使用等问题。在教学方法方面,教师中心型教学法、师生互动型教学法和实践型教学法应在环境法教学活动中根据教学内容、教育阶段和课堂反应等因素适当地采用。     

试析东盟高度一体化及其对中国的影响

《东盟宪章》的顺利签署表明，东盟各国正在努力改变东盟的松散状态，试图将其建设成为更有凝聚力的地区实体。本文在考察中国的东南亚地区利益结构后认为，一个在经济上实现了内部高度整合，但在政治上仍旧保持内部多元决策机制的东盟较为符合中国的利益。即一个经济上强大但政治上较弱、经济上联系紧密但政治上相对松散的东盟对地区格局的冲击会相对较小。因此，对东盟当前的经济一体化进程，中国应持欢迎态度；但对东盟未来的政治安全一体化进程，中国应保持高度关注，并提早与东盟进行良性互动，以维护彼此的合理利益和地区稳定，防止出现某些负面效应。