猪带绦虫烯醇化酶基因的原核表达及鉴定

为了探索猪带绦虫烯醇化酶基因的生物学功能,以猪带绦虫幼虫cDNA为模板,PCR扩增获得烯醇化酶基因的ORF,并将其克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建重组表达质粒。经IPTG诱导表达后,纯化表达产物,采用免疫印迹法分析表达产物的免疫反应性,并测定它与纤溶酶原的结合特性及酶活力。结果显示,该基因的ORF大小为1 302bp,表达大小约为53ku的重组蛋白;表达产物可被猪囊尾蚴病阳性血清识别;该重组蛋白具有纤溶酶原结合特性及酶活力。据此推测,猪带绦虫烯醇化酶可能在寄生虫入侵宿主过程中发挥作用,有作为药物靶标或疫苗候选分子的潜力。     

湖北基层组织协商民主建设的实践与思考

一、湖北省基层组织协商民主建设的基本做法随着我国《村民委员会组织法》和《居民委员会组织法》的颁布实施,我省城乡基层组织协商民主逐步开展,先后涌现出一批成功典型。一是议事型协商。这类协商主要是指城乡基层组织针对居民反应的突出问题,通过干部收集梳理形成议题,召集相关人员按照一定的流程进行商讨、议决,由村（居）委会执行督办,达到办实事、解难事、做好事,消散民怨,聚拢民心,提高基层治理水平的目的。     

一对革命伴侣一段钻石婚姻--记徐向前元帅、王树声大将警卫员李树林的传奇人生

在中国人民解放军建军77周年之际,笔者采访了曾经亲身经历《中原突围》的老八路李树林。采访中笔者不仅了解到老人出生人死的革命生涯,还了解到他富有传奇色彩的爱情故事,以及今天他所表现出来的一个共产党员和一个老兵的博大胸襟。     

当前中亚地区民族问题的特点及对丝绸之路经济带建设的影响与对策北大核心CSSCI

中亚地区在丝绸之路经济带构建过程中具有极其重要的战略地位,伴随着地区格局和国际形势的不断演变,中亚地区民族问题及相关因素出现了新的变化和特点。民族问题可能影响中亚国家经济政策的连续性和稳定性,破坏中亚地区正常经济秩序,威胁我国在中亚地区投资安全。要防范区域内民族问题给丝绸之路经济带建设带来的风险,利用当前区域内有利民族因素推进丝绸之路经济带建设,积极发挥丝绸之路经济带建设在解决中亚地区民族问题中的作用。     

苏维埃政权在重庆的探索建立对新时代地方人大工作的启示

1927年大革命失败后,中国共产党开始了独立领导中国新民主主义革命的伟大历程,探索建立了工农兵苏维埃政权,在红色首都瑞金两次召开全国苏维埃代表大会,开启了中国共产党领导下人民当家作主的伟大预演.之后,苏维埃运动如同星星之火,在革命根据地普遍开展起来.当时的重庆是川陕革命根据地和湘鄂川黔革命根据地的有机组成部分,在苏维埃...     

小反刍兽疫病毒Nigeria75/1株F基因的克隆与原核表达

提取小反刍兽疫病毒(PPRV)疫苗株Nigeria 75/1的总RNA,用RT-PCR方法扩增F基因并克隆到pMD18-T载体中,以鉴定正确的质粒为模板克隆去掉N端信号肽和跨膜区的F基因(F-1)并亚克隆于原核表达载体pET-30a(+),得到重组质粒pET30-F-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析,同时将重组蛋白免疫SPF家兔制备抗体,进行间接免疫荧光检测并用ELISA测定抗体效价.结果显示,目的基因正确插入了表达载体,在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达,用重组蛋白免疫3次后,兔血清抗体达到较高水平,Western-blot分析说明表达产物能够与兔血清抗体发生特异性反应,间接免疫荧光试验显示重组蛋白免疫兔阳性血清能够识别PPRV Nigeria 75/1株全病毒抗原.表明,重组蛋白在原核表达系统内得到了高水平的表达,并且具有较好的反应原性.     

豆状囊尾蚴人工感染家兔抗体水平的消长

取人工感染豆状带绦虫犬自然排出的孕卵节片,虫卵计数后以不同数量感染家兔,定期采血,待囊尾蚴成熟后扑杀,计数.同时,用豆状囊尾蚴粗制抗原所建立的ELISA诊断方法,检测家兔的抗体变化情况.结果显示,家兔在感染后第3周血清抗体呈阳性,且抗体水平逐步上升,第8周达到最高水平,直至第10周扑杀时仍呈较高的阳性水平.抗体水平随感染数量的增加而升高,虫体负荷随感染强度的增加而逐步升高,感染虫体数量的多少对抗体出现的时间影响不大.研究结果为该病的流行病学调查及免疫预防奠定了基础.     

论《侵权责任法》构建的死亡赔偿制度

《侵权责任法》确认了死亡赔偿金的＂继承丧失说＂,将＂被扶养人生活费＂归入死亡赔偿金,确认了近亲属的精神损害赔偿请求权,从而搭建起了中国死亡赔偿制度三大骨架：相关财产损失、死亡赔偿金、精神损害抚慰金,从根本上厘清了中国死亡赔偿的脉络,终结了学界在该领域的诸多争议,为中国死亡赔偿制度的发展铺平了道路。     

我国诚实信用原则制度体系的构建

要充分发挥诚实信用原则在市场经济活动中的作用,就必须重视诚实信用原则制度体系的构建。在我国,诚实信用原则制度体系的构建既有积极条件,也有消极条件。诚实信用原则制度体系的构建主要包括诚实信用的立法、执法与司法机制,国家公务行为的诚实信用机制,诚实信用的中介服务机制,诚实信用的信息机制,诚实信用的社会监督机制,违反诚实信用原则的处罚机制等。     

应用FTIR技术对尸体内外精液留存时间的研究

目的 应用傅里叶变化红外光谱(Fourier Transform Infrared,FTIR)技术和化学计量学方法鉴定尸体内外精液(斑)的留存时间。方法 利用猪阴道模拟尸体内环境,取新鲜精液分别留存于体内外0～168 h,采集红外光光谱数据,通过化学计量学方法建立主成分分析(Principal Components Analysis, PCA)和偏最小二乘(Partial Least Squares, PLS)回归模型。结果 体内外精液(斑)红外光谱峰位随时间变化不明显,PCA结果有较好的聚类关系,在PLS回归模型中预测的偏差值为15.786 3 h,R²为0.922 4,CARS算法选取的特征波数点位于1 000～1 180、1430～1 480、1 700～1 760 cm^-1等波长段。结论 红外光谱技术对于鉴定体内外精液(斑)留存时间具有一定的可行性,体内外精液(斑)的降解趋势有所不同。