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261.
目的 对SCN5A-V1279I突变基因进行生物信息学分析和蛋白质功能研究,探究该突变基因与LQTS的相关性。方法 对SCN5A-V1279I的氨基酸序列进行同源比对分析,判断该突变位点在生物进化中的保守性;评估该突变的致病性并预测其蛋白质三级结构。构建野生型(WT)及突变型(V1279I)体外表达载体,细胞免疫荧光实验观察外源蛋白的表达情况;利用全细胞膜片钳技术分析研究该突变对Nav1.5通道电生理功能的影响。结果 同源比对结果表明SCN5A-V1279I突变位点具有生物进化保守性;致病性预测结果表明Mutation Taster和PolyPhen-2预测V1279I为致病性突变,而Mutation Assessor预测V1279I突变具有中度功能影响。Swiss-model和PyMOL-2.6.0两种软件的预测结果一致表明,缬氨酸突变为异亮氨酸后可导致Nav1.5通道蛋白DⅢ结构域的S3段第1279号位点的氨基酸侧链发生延长折叠改变,而S3段所在的α螺旋整体跨膜结构没有发生扭结和蛋白质错误折叠。免疫荧光实验结果显示突变蛋白可顺利表达并整合到细胞膜上且荧光强度与WT组相比没有差异;全... 相似文献