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为快速检测鸡细胞的增殖能力,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术,建立鸡Akt基因mRNA的定量分析方法。根据GenBank中原鸡Akt基因和鸡β-actin基因序列,设计合成特异性引物,应用RT-PCR技术从DF-1细胞中扩增出目的基因的DNA片段,并将纯化后的PCR产物与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin。分别以重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin为标准品建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测的标准曲线。结果显示,建立的RT-PCR标准曲线具有良好的线性关系和特异的单个峰,能够对样品进行稳定可靠的定量检测。采用本方法检测DF-1-PrP和DF-1-count细胞系的Akt基因的相对表达量,前者为1.656 9×103,后者为2.257 4×102,DF-1-PrP细胞系的Akt基因表达量明显高于DF-1-cont细胞系(P0.01),说明PrPC及Akt在DF-1细胞系中的表达量呈正相关。结果表明,本研究建立的鸡Akt RT-PCR检测方法能够通过对Akt基因的转录量进行检测而评价鸡细胞的增殖能力。 相似文献
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自从人类1981年在美国报告了首例艾滋病以来,20年匆匆过去了。20年的漫长岁月没有能挡住艾滋病这个魔鬼的脚步。在美洲、在欧洲、在亚洲、在非洲……艾滋病没有放弃一寸土地。全球已有5500万人成了艾滋病病毒的俘虏,25岁以下的感染者超过了半数,全世界为治疗艾滋病每年要花费5000亿美元。中国大陆自1985年发现第一例艾滋病以来,16年间,艾滋病病毒感染者的数量已攀升到60万,近期的增长速度更是令人瞠目。卫生部副部长殷大奎2001年8月23日说,截止到2001年6月底, 相似文献
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农民工是我国社会主义现代化建设中出现的一个特殊群体。新生代农民工与第一代农民工相比,他们逐渐摆脱了农村人的传统消极因素,向着现代人、城里人的特性靠拢。但在这个过程中,他们产生极其复杂的心理、情绪,这对社会的稳定极为不利。深入研究这一群体的思想状况,加强新生代农民工思想政治教育是新形势下我们面临的崭新问题。 相似文献
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由最高人民检察院批捕厅与本刊联合举办的首届“全国检察机关刑事立案监督十佳案件”评选活动开展以来,受到全国各地检察机关的普遍关注,各省级检察院已推荐出一些影响较大的立案监督案件。从本期开始,本刊特辟“风云杯征文”专栏,在下半年各期杂志中选登部分案件通讯,供读者投票评选。选票于10月号刊登,欢迎读者踊跃参评。 相似文献
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近年来,中美两国在气候变化问题上的互动日益频繁,并已取得重要进展.本文回顾了20世纪90年代以来中美气候合作的发展历程,分析了当前中美气候合作的主要特征,考察了影响中美合作的深层原因,探讨了中美气候合作对全球气候制度构建产生的可能影响以及两国气候合作面临的挑战.本文发现,中美两国在气候变化问题上的互动经历了不断拓展、深化的过程.当前,中美两国合作具有三个鲜明特点:第一,围绕联合国谈判的核心要素达成共识;第二,聚焦主要排放源务实开展功能性合作;第三,“包容性”合作重在吸引地方和私人部门.中美气候合作增强的原因不仅在于以国家形式呈现出来的共同利益,更取决于关键利益集团态度的转变,同时,也是适应世界各国广泛构筑气候联盟的大趋势.中美两国围绕气候变化的合作,其影响逐渐超出双边关系的范畴.中美两国开始成为全球气候治理中强有力的“共同领导者”. 相似文献
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2014年6月23日,美国联邦调查局(FBI)再报战果,在其刚结束的为期一周的解救被迫卖淫儿童行动中,又有168名儿童获救、281名罪犯被抓。这已是FBI自2003年起开展的第8次专项全国行动。 相似文献