GFP标记的重组新城疫病毒HN基因乳酸菌表达载体的构建及原核表达

为构建具有示踪特性的新城疫病毒(NDV)HN基因乳酸菌穿梭表达载体,采用PCR方法扩增NDV HN基因与绿色荧光蛋白(GFP)基因,将两基因克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,转化入表达宿主菌BL21(DE3)后利用IPTG诱导表达。用荧光显微镜检查重组菌的绿色荧光效应,采用SDS-PAGE和Western-blotting检测其在大肠杆菌中的表达情况。结果显示,NDV HN和GFP基因与表达载体pW425et正确重组。荧光显微镜下可见阳性重组菌落的绿色荧光,且该重组菌传代30代次以上,荧光效应依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63ku的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western-blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性血清所识别,具有反应原性。构建了GFP标记的重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体且能在大肠杆菌中表达。     

“垂直”并非灵丹妙药

●哪个领域问题突出,哪项工作进展受阻,总有人将根源归结为没有实行垂直管理。●有权、有钱单位都垂直管理后,还要地方政府干什么?●如果垂直管理仅仅停留在权力的切割和转移层面,将会使管理体制更加混乱,管理效果更差。     

胆囊内植黄牛胆汁成分变化规律的研究

胆囊内植黄牛胆汁成分变化规律的研究李建基，王春，阎青，刘思当，马玉忠（山东农业大学泰安２７１０１８）目前，胆囊内培植牛黄技术成果的推广工作已有十余年的历史，但培植牛黄的形成机理至今尚不十分清楚。胆汁中许多物质可能在牛黄形成中具有重要作用，如胆红素、胆...     

“票决制”四川省委的民主取向

四川省委书记张学忠说,实行“票决制”后,尽管自己对票决的干部只有一票的表决权,但也要大力推行这一制度。     

牛分枝杆菌Ag85A基因的克隆及序列分析

以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板 ,以Ag85A成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增 ,获得了 90 0bp的DNA片段。通过T A克隆技术 ,将PCR产物克隆至pGEM T载体。经鉴定 ,成功地构建出了克隆载体pGEM T 85A。     

关于在农村发展青年党员的若干问题

近年来,各级农村基层党组织把在青年中发展党员作为农村党的建设和在材思想政治建设的一项重要任务来抓,重视加强在青年积极分子中培养和发展党员,一大批优秀青年加入了党组织,为农村党组织泣入了新鲜血液。但总的来看,农村青年党员的比例不高,申请入党的青年人数较少,未能形成一支数量充足、素质较高的积极分子队伍,一些基层组织忽视对农村青年的培养教育,时申请入党的青年不是很关心,不是够热情,有的甚至长期不做发展青年农民入党的工作,存在着业务培训多,政治上关心少、指导不力的问题,有的虽然采取了一定措施,却又疏于检…     

海上绑架勒索事件的基本特征及危机谈判策略

当前,世界百年未有之大变局加速演进,我国倡导共建一带一路国际合作如火如荼。随着我国对高安保风险国家和地区国际合作的不断深入,针对我国公民的海上绑架勒索事件频繁发生。例如,2020年5月13日,一艘悬挂中国国旗的拖网渔船被劫持,18名船员被扣为人质,3天后获救;①2020年11月13日,14名中国船员在西非几内亚湾海域被劫持,12月3日凌晨获救。     

仇和昆明车改

2010年初,在仇和的力主下,昆明市的车改再次引起全国的关注:取消官员专车,不分级别,人均400元车补……