奶牛乳腺特异性表达人溶菌酶基因载体的构建与表达

为探讨应用转基因动物技术降低奶牛乳腺炎发病的可行性,参照人溶菌酶(human lysozyme,hLZ)基因序列(NM_000239.2)设计引物,采用RT-PCR方法从人胎盘组织中成功扩增克隆了406bp的hLZ基因成熟肽片段。应用娟姗牛酪蛋白乳腺特异表达调控元件,经过多步酶切、连接、转化、筛选、鉴定,构建成奶牛乳腺表达hLZ的载体pBCN5.2-hLZ-1.1pA-EGFP-neo(13.6kb)和pBCN-3.8-hLZ-1.1pA-EGFP-neo(12.2kb)。将构建的2个载体瞬时转染Bcap细胞,24h后可观察到EGFP的表达;通过实时定量PCR检测比较2个载体hLZ的表达丰度,结果,相对表达量分别为0.89±0.04和0.62±0.05。将线性化的pB-CN5.2-hLZ-1.1pA-EGFP-neo载体转染Bcap细胞,筛选后获得阳性细胞克隆,纯化阳性细胞总蛋白进行SDS-PAGE分析,与空白对照相比,检测到14ku的新蛋白条带。Western-blot分析中亦出现14ku的特异性条带。证实构建的载体能够正常表达hLZ基因,这为进一步研究获得自然抵抗乳腺炎的转基因奶牛奠定了工作基础。     

病危/重病人的医疗安全管理及卫生监督机制探讨

医患矛盾逐步激化,医患关系趋于紧张,缓解医患关系是摆在医疗管理者面前刻不容缓的任务。研究发现,重点环节重点管理可以降低医疗安全风险。本文从病危/重病人重点管理的角度来探讨促进医疗安全管理的有效方法,并以期推广至所有病人,同时也进一步讨论了在病危/重病人重点管理中要注意的问题。     

论贵州领导干部治理能力的现代化

领导干部是生产关系和生产力中的重要因素,其治理能力的现代化是国家治理体系现代化的重要组成部分,对于全面深化改革具有重大而深远的影响。贵州当前面临巨大发展机遇,公共领域面临思想意识多元、行为方式多变、利益诉求多样、矛盾纠纷多发等动态复杂性问题。领导干部作为实现治理总目标的关键变量和核心要素,治理能力的现代化对贵州优化资源配置、化解社会矛盾、推动全面深化改革及实现战略发展目标等意义重大。     

人民代表大会制度中需要完善的若干问题

人民代表大会制度是我国的根本政治制度,在依法治国基本方略的实施中起着极其重要的基础性作用。随着社会主义市场经济的发展和政治文明建设的进展,人民代表大会制度在代表结构、代表产生方式、代表素养、某些重要的议事方式、某些重要的程序问题上都存在一些与日益发展的法治和政治文明的要求不甚适应的地方,需要进一步完善。     

China’s view of the war threat and its foreign policy

In analyzing China’s foreign policy since 1949, people tend to take for granted the nature of China’s concern for its national security as the predominant factor in the development of its foreign policy without distinguishing changes in the functions of this factor. The evidence given in this article argues that at least as early as the late 1970s, leaders in Beijing, predominantly Deng Xiaoping, no longer held Mao’s view of the inevitability and imminence of world war, and of the Soviet threat to China’s national security. Therefore I propose that from the beginning of the Deng era in 1978, national status enhancement or muscle building through modernization had replaced national security as the persistent and principal theme in China’s foreign policy. We should not interpret the main reason for China’s increased push for the formation of an international antihegemony united front as its increasing concern about the Soviet threat to its national security. In turn, we may conclude that when China abandoned this united front foreign policy to adopt the Independent Foreign Policy in 1982, it was neither because of a new global reality that was shaping the reorientation of its foreign policy nor because only in 1982 did China rediscover the Soviet threat.     

洪秀全早期思想与基督教关系新论

本对洪秀全早期反清革命思想的产生与基督教影响的关系提出新的看法：即不是基督教唤起了洪秀全的反清革命思想，也不是洪秀全自觉地利用基督教发动农民革命，更不可能洪秀全有一段“纯粹的宗教家”的思想历程，基督教对早年洪秀全的影响与作用，只是这位欲举大事而又十分迷信的农民革命领袖提供了极其需要的，新的“君权神授 ”的内容与依据，有力地促进了他的农民革命思想体系的成熟与定型。     

曲靖市工业化水平与工业结构实证分析

工业化水平的现状,决定着未来工业化的路径选择.用"钱纳里模型"进行对照分析,曲靖目前尚处于工业化初期向中期过渡的阶段,工业经济内部结构不合理的问题较为突出.     

网络链接与我国信息网络传播权保护之辨析

网络链接是万维网的核心技术 ,是互联网信息交互与传播的重要手段 ,但同时也构成对信息网络传播权的威胁。不同链接具有不同的表现形式 ,链接技术本身不构成侵权不等于网链行为不构成侵权。网上关键词组组合、搜索引擎使用、未经著作权人同意的链接及链接有协议的侵权作品是否构成侵权诸方面问题 ,应结合中外典型案例进行探析 ,正确处理网络链接与信息网络传播权司法保护之间的关系 ,以完善相关法律