猪巨细胞病毒gB基因优势抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立

扩增了猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因的优势抗原表位区,将构建成功的gB基因优势抗原表位区原核表达重组质粒(pET32a-gB)转化入表达菌Rosetta(DE3)中进行表达,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了一种检测PCMV抗体的间接ELISA方法,并对该间接ELISA检测方法进行了优化。结果显示,最佳抗原包被浓度为1.9μg/mL,最佳血清稀释度为1∶160,二抗最佳稀释度为1∶10 000;当样品D450nm≥0.26时判为阳性,当样品D450nm<0.215时判为阴性,介于两者之间时判为可疑。用该间接ELISA方法对138份PCMV阴性血清与240份PCMV阳性血清进行检测的结果显示,它的特异性为97.83%,敏感性为97.9%,变异系数均小于10%。用该ELISA方法和Western-blot对184份临床样品进行检测,结果二者的符合率为92.4%。结果表明,该间接ELISA方法简便快捷,具有良好的特异性、敏感性及重复性,适用于对PCMV抗体的大规模检测。     

猪环曲病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

根据GenBank中猪环曲病毒(porcine torovirus,PToV)N基因的保守序列,设计合成1对针对PToV的特异性引物,建立了基于SYBR GreenⅡ检测PToV的实时荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法能很好地将PToV与猪伪狂犬病病毒、猪嵴病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、A群猪轮状病毒、猪瘟病毒、沙门菌和大肠杆菌区分开来,特异性强。检测PToV的N基因在8.65×101~8.65×108拷贝/μL范围内有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.998 9,扩增产物的熔解曲线分析只有1个单特异峰。所建立的实时荧光定量RT-PCR方法组内变异系数为0.29%~1.30%,组间变异系数为0.45%~1.80%,重复性较好。利用该方法对采集自四川部分地区的43份临床样品进行检测,实时荧光定量RTPCR检出13份阳性样品,与常规PCR检测方法的阳性符合率为100%。结果表明建立的实时荧光定量RT-PCR方法特异性较强、灵敏度高,可用于该病的临床检测和流行病学调查。     

政府公共服务外包中的风险管理研究

政府公共服务外包是创新公共服务体制机制、构建高效服务型政府的一种重要方式,也是政府体制改革的重要内容。本文在对政府公共服务外包内涵进行界定的基础上,以公共服务外包中的风险管理作为研究对象,结合交易成本理论和信息经济学的相关理论,从风险主体、风险客体和风险因素三方面对公共服务外包中的风险进行了较为系统地分析,提出了政府公共服务外包风险管理策略,以期推动公共服务外包的成功运作,提升公共服务质量。     

中国烟草行业体制改革研究

随着全球经济一体化的不断发展,中国烟草行业面临着内部和外部的双重挑战,承受着前所未有的竞争压力,行业体制改革势在必行。本文认为,由于烟草行业的特殊性,其体制改革需要拓展新的思路,在不能大幅度扩大产量和调整价格的情况下,应以节约各项生产成本及以经营管理中的交易成本为体制创新的主导思想,进而完善现有的烟草行业管理体制。     

高校加强大学生创业意志力培养的研究分析

意志力是大学生创业成功不可或缺的心理品质.大学生创业失败在意志力方面存在着：创业欲望与创业执行、创业动机多元化与社会认同、创业目标缺乏社会责任感、创业冒险精神与抗挫折能力不足之间的矛盾,高校强化大学生创业欲望,开放式办学,培养大学生坚强的意志力,成为当前大学生创业的当务之急.     

格式条款的法价值机理与规制新思路——兼评新《消费者权益保护法》第26条

格式条款因其有助于交易的迅捷而被广泛应用于各种消费领域,但其亦日益沦为经营者侵害消费者利益的工具,并愈演愈烈。因此,此次《消费者权益保护法》着重从防范格式条款滥用的角度对其进行修缮。但是,如果深入剖析格式条款制度所蕴涵的效率与公平法价值及两者间的运行机理,则会发现此次防范和规制格式条款的修改思路依然是旧有规整思路,难以取得法律修改的预期效果。合理而正确的规整思路应当是,区分不同消费领域对公平与效率价值的强弱需求,然后在遵循不同法价值机理的基础上配置相称的规制手段。     

《国际贸易实务》课程实践教学改革初探--以职业技能竞赛为推手

目前,我国对外贸易形势日益严峻,企业对优秀外贸人才的需求也更加迫切。对于高职院校国际贸易实务专业而言,核心课程《国际贸易实务》实践教学改革的效果将直接影响到人才的培养质量。职业技能竞赛,以提高学生的职业岗位实际操作能力水平为目标,对该课程的实践教学改革有着积极的促进作用。     

保险诈骗犯罪手法分析及防范策略研究

近年来,保险诈骗案件呈多发态势,扰乱了正常的保险经营秩序,阻碍了中国保险业的健康发展。研究保险诈骗犯罪及防范策略,对加强预防保险欺诈行为、维护正常的保险秩序有着重要意义。防范保险诈骗可采取以下措施:(一)保险公司自身应强化管理,提高诈骗风险控制能力;(二)保险行业内部应相互配合,搭建业内信息共享平台;(三)金融检察部门要惩防并举,加强对保险行业的保护;(四)执法部门之间需加强协作,构建线索移送通报制度;(五)公众法制宣传要点面结合,加强骗保犯罪预防效果。     

论侦查假设在视频图像侦查中的运用

在信息化背景下,视频图像侦查已经成为刑侦部门打击和预防犯罪的重要方法之一。在视频图像侦查中,侦查人员针对采集的视频图像信息运用侦查假设的方法进行研判分析,挖掘出侦查线索,化解侦查僵局,切实推进侦查工作的进程。因此,有必要以大量视频图像侦查成功案例为素材,系统地对侦查假设在视频图像侦查中运用的工作流程进行梳理和总结,从人、案情、通信工具、交通工具、现场痕迹物证和光影六个方面提出假设并验证假设。     

基于胜任力视角的边检队伍能力建设研究——以旅客检查岗位为例

基于胜任力视角研究边检队伍能力建设问题,具有十分重要的现实意义。基于胜任力视角推进边检队伍能力建设的对策包括:改进思想政治工作方法,致力于培养民警与边检队伍宗旨相一致的核心价值观;发挥制度文化的支撑作用,促进民警持久保持胜任岗位的核心价值观;创新边检专业培训工作机制,提高民警胜任岗位的综合能力;构建科学有效的绩效评价机制,为民警增强岗位胜任力提供持续动力。