旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆与原核表达

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子(Tsserpin)基因序列设计1对引物,从旋毛虫肌幼虫提取总RNA,应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,进行限制性酶切后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-Tsserpin,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经PCR、限制性酶切分析及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行了诱导表达。SDS-PAGE分析表达产物,表达产物纯化后用Western-blotting鉴定Tsserpin重组蛋白的抗原性。PCR与酶切鉴定结果显示,构建的重组表达质粒pET30a-Tsserpin与预期结果一致。测序结果表明,插入片段为1122bp,编码373个氨基酸,与GenBank中旋毛虫Tsserpin基因的相似性为99%。含有pET30a-Tsserpin重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE分析结果显示,表达产物的分子质量约为48.5ku,而且主要以包涵体形式存在。Western-blot分析结果表明Tsserpin重组蛋白可以被旋毛虫感染猪阳性血清特异性识别,提示其具有良好的抗原性,可以作为猪旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。     

牛肉问题对韩美FTA的影响分析

2008年4月,韩国总统李明博与美国就牛肉问题签署协议,引发了民众集体游行的牛肉风波事件.透过该事件,回顾韩美两国在牛肉进出口问题上的磋商历程,发现两国特别关心的牛肉问题,就韩国而言旨在通过开放牛肉市场推进美国国会尽早批准韩美FTA;就美国而言在于借助对韩牛肉出口,打破在世界牛肉市场上的出口困境.牛肉风波及其后续处理结果,对韩美FTA被两国国会正式审议通过有着极大的影响,韩美FTA的前景更多地取决于美国因素.     

组成新发典型甲型H1N1流感病毒8个基因片段的变异性分析与疫病流行原因初探

为探索新近暴发的甲型H1N1流感病毒各基因片段的变异性与本次疫病流行的内在原因,以NCBI GenBank中报道的l株新发的典型H1N1甲型流感病毒A/New York/1669/2009(H1N1)作为研究对象,运用在线BLAST和CLUSTAL X等生物信息学软件对其PA、NP、M、PB1、PB2、NA、HA和NS基因片段进行了比较分析.结果表明,新发甲型H1N1流感毒株的PB1、NP基因来源于人源谱系流感病毒,HA、NA、NS、M基因来源于猪源谱系流感病毒,PB2和PA基因来源于禽源谱系流感病毒.此外,新发甲型H1N1流感病毒的HA和NA分别在第249和386位新出现1个"-NTT-"、"-NFSI-"的糖基化位点.HA的6个潜在抗原决定簇中有3个发生了氨基酸序列改变,NA则是12个中有5个发生了改变.表明,这些抗原基因的大范围重组与高频率变异可能是造成这次流感暴发与大规模流行的根本原因.     

新农村建设与加强农民国民意识的统一

农民国民意识的加强与新农村建设之间具有内在的统一性。培养精神独立、理性健全、崇尚科学的现代农民,对促进社会主义新农村建设具有重要的现实意义。     

浅谈俄罗斯选举制度

选举是古老的政权组织形式,是由选民依照法律规定的程序和方式,推举民意机关代表或国家公职人员的政治活动。选举制度是选举活动中必须遵循的有关选举的基本原则、程序、方式、方法等一系列规则制度的总称。各国在宪法或宪法性法律和宪法惯例中都规定了本国的选举制,有些国家还有专门的有关选举的制定法和判例法。文章简要介绍俄罗斯的选举制度。     

论职务协助的程序

在行政法上,职务协助是一个重要却备受冷落的制度。综观各国行政法制发达的国家,都规定了较为系统的职务协助或者相关的制度。然而,我国行政法学界对此似乎缺乏应有的关注,研究的广度和深度都还有待于进一步加强。     

国际关系对宪法发展的影响及其最新动态

国际关系是宪法运作的外部环境 ,国际关系的发展成为宪法发展的一个重要因素。考察近代宪法产生以来的国际关系与宪法发展的联系 ,可以明晰世界范围内宪法产生、发展的脉络 ,也将有助于把握未来宪法发展的最新动态     

广西参与中国——东盟无障碍旅游区建设策略与方案探讨

本文从广西与东盟各国在旅游交通、旅游行业政策与谅解方案、旅游人才培养与人才服务体系、文化交流、信息平台建设沟通等方面的合作,对广西参与中国-东盟无障碍旅游区建设策略与方案进行探讨,提出一些对策和建议,希望能对中国-东盟无障碍旅游区建设有参考作用.     

原发性脑干损伤神经元凋亡及caspase3的表达

目的观察原发性脑干损伤（PBSI）致死者脑干神经元凋亡及caspase3的表达情况,探讨其法医学意义。方法选择法医学检案中30例确定为原发性脑干损伤致死者脑干,按伤后不同存活时间（t≤5min、5min〈t≤15min、15min〈t≤1h、1h〈t≤24h）分为4组,以5例非脑干损伤死亡者脑干为对照组;分别运用常规HE、免疫组化和TUNEL染色检测中脑、桥脑及延脑重要核团内神经元凋亡及caspase3的表达情况。结果原发性脑干损伤后15min～24h出现明显神经元细胞凋亡（23.2%～35.9%）和caspase3阳性表达（28%～54%）,并呈现随损伤时间进行性增加的趋势,与对照组有显著性差异（P〈0.01）。结论原发性脑干损伤早期即出现神经元凋亡及caspase3表达增加,并随损伤时间的延长呈进行性增加,可据此辅助诊断原发性脑干损伤死亡。     

计算机X线成像测量青少年四肢长骨推算身高

目的 应用计算机X线成像(computed radiographv,CR)测量活体上肢骨及胫腓骨正位片上相关指标,建立适合当代中国四川地区汉族14～18岁人群运用上肢骨及胫腓骨推算身高的数学模型.方法 对194例14～18岁四川汉族健康青少年进行左侧肢体上肢骨及胫腓骨正位摄片,测量特定标志点间距离,同时准确测量其身高....