鸡毒害艾美耳球虫小热休克蛋白基因EnsHsp20的克隆表达与蛋白定位

克隆、表达毒害艾美耳球虫小热休克蛋白基因EnsHsp20,检测其天然蛋白及其在虫体内的亚细胞定位。以毒害艾美耳球虫子孢子的总RNA为模板,用RT-PCR扩增EnsHsp20基因后,连接至pGEM-T Easy载体;测序后构建pET28a(+)-EnsHsp20表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3);经双酶切和测序鉴定后,将重组菌诱导表达;表达产物经Western-blot鉴定、纯化与复性后,免疫BALB/c小鼠,制备小鼠抗rEnsHsp20多克隆抗体;利用多克隆抗体,分别用Western-blot和间接免疫荧光试验检测子孢子和第2代裂殖子中EnsHsp20的天然蛋白及其定位;最后,应用qRT-PCR分析EnsHsp20基因在未孢子化卵囊、子孢子和第2代裂殖子中的转录水平。结果显示,该基因全长549 bp,编码183个氨基酸,预测分子质量为20.3 ku;重组蛋白主要以包涵体形式存在,可以被6×His标签单抗和鸡抗毒害艾美耳球虫、抗柔嫩艾美耳球虫、抗堆型艾美耳球虫和抗巨型艾美耳球虫的阳性血清识别;在第2代裂殖子中检测到EnsHsp20的天然蛋白,分子质量约为36 ku;EnsHsp2...     

不是最多 却是最好——从第九届中国艺术节看中国油画之格调

以“中国风格，时代丹青”为主题的第九届中国艺术节美术作品展在羊城广州高调开幕。之所以说“高调”，一是本届艺术节由国家文化部主办，中国国画院承办，广州市人民政府与艺委会鼎力支持；二是本届艺术节凝聚了中国60年尤其是改革开放30年以来最高水平的老中青三代画坛精英代表性作品精选，特别是老一辈画坛大师整体阵容的全面展示，堪称中国当代绘画艺术成就的“视觉盛宴”和“全国优秀美术作品展览”的高端平台。     

用就业的心情面对就业——对大学生就业问题的几种看法之看法

今年全国又有几百万大学毕业生从校园走向社会,新的就业"洪峰"滔滔涌来。作为就业最厚重板块之一的大学生群体,他们将面临着登上社会舞台扮演什么角色的挑战和机遇。"毕业即失业",陈小曼对这种说法持对"毕业即失业"的不同看法     

论自学考试教育的特色和科学发展

本文从自学考试的考试制度的灵活性和开放性、考试制度的主导性、文凭的权威性、学习者的自我导向性、终生教育等从五个方面讲述了自学考试教育的特色。在客观的分析了自学考试教育在我国经济高速发展阶段所面临的困境的基础上提出了推进自学考试的制度创新,提高自学考试的质量,以及从社会人才的需求几个方面来科学发展自学考试教育。     

牛IFN-γ单克隆抗体的制备及鉴定

为进一步研究牛IFN-γ(BoIFN-γ)单克隆抗体在牛免疫学以及牛疫病诊断中的应用,用原核表达的重组牛IFN-γ(rHis-BoIFN-γ)免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,免疫3次后取其脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。用建立的间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经3～5次亚克隆,最终获得12株能稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株。Ig亚类鉴定结果显示这12株杂交瘤细胞均为IgG,其中5株为IgG1,3株为IgG2a,4株为IgG2b。这12株杂交瘤细胞在体外具有稳定分泌抗牛IFN-γ单克隆抗体的能力。Western-blot及间接ELISA证明这12株单克隆抗体均可特异性地结合rBoIFN-γ蛋白。间接免疫荧光试验显示,这12株单抗均与真核细胞BHK-21表达的rBoIFN-γ产生荧光反应,证明这些单抗能够与接近天然的BoIFN-γ反应,证实了单抗的特异性。ELISA叠加试验表明,3C2与1H4、1G6与1G4针对不同表位,1A10、1B2、2B9、3C4四株和1C1与1G6、1G4与3C2、1A10与1G8针对相同或相近的表位。     

消费信贷与金融发展关系研究

采用1997—2009年相关数据,对消费信贷与金融发展的关系进行研究。协整检验结果表明,消费信贷与金融发展之间具有长期均衡关系。进一步地,Granger因果检验表明,消费信贷对金融发展有着显著影响,而金融发展对消费信贷的影响较弱。应通过政府对市场供给不足的消费信贷业务给予支持、政府为贷款人提供担保或保险,以及改变消费观念等途径来带动我国消费信贷的发展,进而推动金融业的持续发展。