猪IFN-γ基因的融合表达及其表达产物的生物学特性

依照猪IFN-γ(pIFN-γ)成熟蛋白基因序列设计引物,将已扩增的pIFN-γ基因克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了GST-pIFN-γ融合表达载体,该载体转化宿主菌BL21后用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行了筛选和优化,筛选出最佳诱导表达条件后大量诱导表达,可溶性的表达产物经GST琼脂糖凝胶亲和纯化;包涵体经DOC洗涤、SKL变性溶解、透析复性进行纯化.经SDS-PAGE和Western-blot分析,证实得到了高纯度的融合蛋白,该蛋白的分子质量为42ku.选择FMDV和PRV两种不同的病毒(RNA病毒和DNA病毒)进行GST-pIFN-γ抗病毒活性测定.结果表明,GST-pIFN-γ融合蛋白可有效抑制这两种病毒引起的细胞病变,其对FMDV的抑制作用远远大于对PRV的抑制.对GST-pIFN-γ融合蛋白的稳定性及机体毒副作用的研究表明,该pIFN-γ的稳定性有较大提高,而毒副作用大大降低.     

试论生产调度管理系统在炼油企业的应用

本文首先阐述了生产调度管理系统的设计原则与要求,进而分析了生产调度管理系统的构成,最后对生产调度管理系统在炼油企业中的应用效果进行论述。期望通过本文的研究能够对提高石油炼化企业的生产能效和经济效益有所帮助。     

廉洁军队:人民军队建设的鲜明指向和不懈追求

历史反复证明,廉洁出凝聚力,廉洁出战斗力。革命战争时期人民军队反腐倡廉建设处于开创与探索时期,这一时期多重举措促使人民军队反腐倡廉建设取得显著成效,战争环境为军队反腐倡廉建设提供了有利条件,成功经验为军队反腐倡廉建设开创了基本范式,但也带有革命战争年代的历史局限性。社会主义革命和建设时期是人民军队反腐倡廉建设不断探索的曲折发展时期,这一时期人民军队反腐倡廉建设从建设思路上看,依靠群众运动推进;从建设目标上看,过于强调清除腐败;从建设模式上看,被动应对打击为主。改革开放和社会主义现代化建设新时期是人民军队反腐倡廉建设不断创新的发展时期,与改革开放以前相比,这一时期人民军队反腐倡廉建设呈现出思路由运动反腐向依法治腐转变、手段由惩治为主向预防为主转变、方式由被动应对向主动出击转变、目标由理想绝对向科学务实转变、格局由应急单打向系统治理转变的鲜明特点。     

对公民个人信息之刑法保护界限的思考

现如今人们的日常生活以及工作中充斥着信息化技术,随着时代的不断进步,在互联网技术的支持下,人们之间的联系也逐渐变得更为紧密,信息化成了这个时代的特点之一.基于这一背景下,人们在享受信息化技术便捷性的同时,各种问题也随之出现,其中个人信息安全性成了重要隐患.为了切实保障公民的权益,我国制定了各种相关的法律条文,虽然国家对...     

A型产气荚膜梭菌α毒素His-68基因的定点突变与结构分析

利用定点突变技术,将A型产气荚膜梭菌α毒素(CPA)第68位组氨酸(CAT)定点突变成甘氨酸(GGT),构建了含CPA突变基因表达质粒的重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)。经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pMCPA-H68G含有CPA-His68Gly突变基因,且基因序列和阅读框架正确。重组菌株BL21(DE3)(pMCPA-H68G)表达产物经SDS-PAGE分析,其表达量占菌体总蛋白相对含量的31.65%。应用EXPASY服务器上的SOPMA法对CPA和CPA-His68Gly突变体分子进行二级结构的预测,同时模拟了其三级结构。结果显示,CPA和CPA-His68Gly突变体的二级结构主要是由α螺旋和无规则卷曲组成的,三级结构非常相似。