实时荧光定量PCR检测硅藻UPA基因在溺死诊断中的研究

目的建立硅藻UPA条形码基因的实时荧光定量PCR检测方法,探讨其在溺死诊断中的应用价值。方法对Gene Bank中登录的硅藻UPA基因序列进行比对获得同源序列,据其设计硅藻门通用引物。对2种人体常见共生菌(大肠杆菌、双歧杆菌)、3种浮游细菌、15种浮游藻类、32具尸体(其中生前溺水死亡28例,死后抛尸1例,陆地死亡3例)的组织样本(肺、肝、肾)及尸体发现地水样提取DNA,采用设计的引物进行特异性、灵敏度、重复性试验,分析检材中硅藻检出情况,统计硅藻阳性率,以上述组织样本的微波消解-真空抽滤-自动扫描电镜法检测结果对建立的q PCR检测方法进行比较评估,比较该方法与PCR-毛细管电泳检测法的灵敏度。结果引物UPA99仅对硅藻标准株(针杆藻、舟形藻、直链藻、小环藻、菱形藻)DNA具有扩增,扩增产物熔解曲线平稳,峰尖且窄,熔解温度为(87±1)℃。以p MD18-T重组质粒为标准品,检测区间为1.56×10~2-1.56×10^-5ng/μL,建立实时q PCR方法的灵敏度为1.56×10^-5ng/μL,而PCR-CE方法的灵敏度为1.56×10-3ng/μL。批间及批内变异系数均低于2%,具有较高的重复性和稳定性。对于生前溺水尸体肺、肝、肾的检出率依次为89.3%,71.4%,64.3%。结论基于硅藻UPA基因设计通用引物,建立的q PCR硅藻检验法特异性高、灵敏度高、重复性好,应用于溺死诊断具有较好的应用前景。     

社会文化生态与全面建设小康社会

全面建设小康社会是一项涉及经济、政治、文化、生态等诸多因素的系统工程,其中,能否从深层次上充分认识和准确把握当代小康社会得以顺利实现的一个重要客观基础--社会文化生态基础,能否自觉地将社会文化生态系统的稳定、优化与这一建设有机地结合起来,在一定程度上乃是涉及全面小康建设成败的一个关键因素。     

毒杀他人耕牛贩卖销售有罪

案情简介：某村村民马玉的长子石祥，因犯故意伤害罪被判处10年有期徒刑。于2003年刑满释放。石祥刑满释放后，恶习不改，经常欺邻骂众，打骂父母，虐待其13岁的儿子。尤其严重的是。在2004年4月的一天晚上，石祥欲对其17岁的养女进行强奸。被母亲马玉得知后将该女救出。数日后，马玉趁石祥不在家将该女送出去打工。石祥得知后，恼羞成怒，经常持械责骂其父母，追问养女的去处，并扬言要杀死全家。     

高效液相色谱法测定小鼠血清中可卡因的含量

目的 建立一种测定血清中可卡因含量的高效液相色谱方法。方法 以0.04mol/L磷酸盐缓冲液(含有0.26 mmol/L四丁基胺盐,pH3.2)-乙腈(83:17)为流动相,血清样品采用2％异戊醇正己烷-0.1 mol/L HCl液液反萃取法处理,用Kromasil C18色谱柱分析血清中可卡因的含量。紫外检测波长为235nm。结果可卡因的最小检出浓度为25ng/ml,回收率71％。结论所建方法测定血清中可卡因含量灵敏度高,简便易行。     

试论经济目的

《经济合同法》第2条规定:“经济合同是法人之间为实现一定经济目的,明确相互权利义务的协议。”经济目的是指合同当事人通过合同所取得的一定物质利益或为了满足生产业务上的需要的预期目标。经济目的对于合同的形成、合同的效力、合同的价值的影响是很大的。这是因为,任何一种行为,都是由一定的目的所支配的,法律行为也是     

关于创建学习型企业的几点思考

开展“创争”活动,是对员工学习权、发展权和精神文化权益的有效保护,有利于进一步提高企业的核心竞争力。目前创建学习型企业存在五个障碍,可以通过五条途径和五项创新达到目的。     

互联网思维在党建工作中的作用机制北大核心CSSCI

在互联网时代,党的建设一个显著特征就是互联网思维借助技术影响力,由外而内跨界介入党建工作领域,并通过作用机制将思维物质化。在重新界定互联网思维的基础上,从技术、制度和理念三个维度解构互联网思维在党建工作中的作用机制,并对其功能进行区分和评价具有现实意义。     

新时代伟大斗争的历史特点

新时代伟大斗争前所未有地具有许多新的历史特点。为更好地认识和把握这些特点,需要从理论上进行系统梳理。主体、对象、方法是马克思主义实践观、认识论和方法论研究的基本范畴,也是构成新时代伟大斗争的必备要素,能从结构上比较完整地回答谁来斗争、斗争什么、怎么斗争等重大问题。     

手指缝间的财富

大家都知道手机具有收发短信功能．但是知道利用手机短信来赚钱的人却不多，那一定要有敏锐的市场头脑和敢于接受新事物的勇气，徐黄清就是其中的一位。     

浮游生物PCR检测及其在溺死鉴定中的研究进展

溺死鉴定是法医学中的重点和难点之一,目前在相关法医学案件中,主要采用法医病理学尸检与传统硅藻检验等方法综合分析进行鉴定。传统硅藻检验存在灵敏性较低,易于污染等不足。采用PCR法检测尸体不同脏器组织中是否存在水中浮游生物的DNA标记,适用范围广,信息量丰富,灵敏性和特异性较高,有较好的法医学应用前景,有望成为鉴定溺死的新方法。本文对相关研究进展进行综述,为相关研究和实践参考。