新城疫病毒F48E9株V基因的表达及其抗血清的制备

采用PCR方法从鸡源新城疫病毒(NDV)强毒F48E9株P基因重组质粒中扩增出了V 基因全长cDNA,并引进相应的突变位点,将其克隆到pMD18-T载体,然后亚克隆到原核表达载体 pET-30c上,重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,筛选出阳性重组质粒,并命名为pET-30c-V。将 pET-30c-V转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol／L IPTG 37℃过夜诱导表达,SDS-PAGE 及Western-blotting分析结果表明,所表达的NDV V重组蛋白主要以包涵体形式存在,分子质量约28 ku,与理论值大小相符。将包涵体用8 mol／L脲变性,经Ni-NTA柱纯化,透析复性,得到纯化的V蛋白。用复性后的V蛋白免疫21日龄SPF鸡(300 μg／只),成功制备了抗鸡NDV V蛋白的抗血清。     

三株胸膜肺炎放线杆菌基因缺失株免疫原性的研究

为深入研究猪传染性胸膜肺炎基因工程弱毒活疫苗的生物学特性和免疫原性,分别以本实验室构建的血清7型胸膜肺炎放线杆菌(APP)基因缺失株apxⅡC-/Kan+、apxⅡC-/ⅠN+和血清5型APP的基因缺失株SW1ΔⅠC为研究对象,对其进行研究。溶血活性试验证实,突变株完全失去了溶血活性。细胞毒性试验证实,缺失株SW1ΔⅠC的细胞毒性完全丧失,缺失株apxⅡC-/Kan+和apxⅡC-/ⅠN+有轻微的细胞毒性。遗传稳定性试验证实,3株缺失株在体内传5代均不会发生回复突变。毒力试验结果显示,基因缺失株apxⅡC-/Kan+、apxⅡC-/ⅠN+和SW1ΔⅠC对小鼠的半数致死量分别为亲本株的5倍、7倍和15倍。3株缺失株分别免疫小鼠后,以10LD50血清1型、5型和7型APP的剂量攻毒,小鼠的保护率可达100%。试验结果表明,3株缺失株的毒力明显降低,并能提供有效的保护力。本研究为进一步以突变株为基因工程弱毒活疫苗的研究奠定了一定基础。     

商标先用权研究——兼论我国《商标法》第三修正案

2013年8月30日通过的《商标法》第三修正案,使我国的商标法律制度更加完善。该修正案规定的商标先用权,有利于保护商标在先使用人的合法利益,遏制日益严重的商标抢注现象。该项权利是我国商标法首次设定,因此就商标先用权所涉及到的理论与适用问题有必要进行研究。本文结合我国实际,借鉴其他国家保护未注册商标的成功经验,运用逻辑推演、比较分析与实证分析等方法对商标先用权的法律性质、理论基础、适用条件、利弊缺失等进行研究。     

试论马克思对黑格尔哲学的超越与扬弃

在对市民社会的考察中,马克思关注到市民社会的内在矛盾,从而促使其开始研究政治经济学,在哲学与政治经济学研究共同促进的动力下,马克思超越了黑格尔哲学（青年黑格尔派）和费尔巴哈哲学,创立了新唯物主义。因此以1843年的《黑格尔法哲学批判》为标志,马克思的思想得到了逐步的丰富和发展。     

新民诉法实施后民行检察工作面临的问题及应对措施

修改后的民诉法实施已一年有余,新民诉法给基层检察工作提供了机遇,也带来了挑战。基层院民行案件受理数下降,监督结构变化明显,公益诉讼开展缓慢,信访压力增大。面对这种局面,本文从实际出发,对面临的困难进行了探讨,对问题存在原因进行了分析,认为基层检察院应加大宣传力度,加强队伍建设,注重沟通交流,突出监督重点,把民行检察业务工作进一步深入化。     

关于我国村庄规划法治化建设问题的思考

在城乡一体化发展的背景下,村庄规划无论是在观念上还是实践中都面临着诸多需要解决的问题,其中最为关键的,是要尽快妥善处理并应对村庄规划发展的法治建设问题。然而,这一问题至今并未引起足够重视。为促进我国村庄规划法治化建设,当前至少要着力推进如下工作:正确认识村庄规划的法律约束力;充分吸纳相关法律法规的规定性内容并形成合力;正确处理村庄规划与其他规划、制度的关系;严格遵循村庄规划编制、实施与修改的法定程序;进一步完善并加强村庄规划的法律督导体系和司法保障工作。     

全球治理视角下我国专利集中战略之构建

国家专利集中战略是建立知识产权强国的重要保证,也是衡量一国自主创新能力的重要标志。由于专利的公共物品属性催生出一系列需要跨越国界解决的问题,所以全球治理便成为解决当前国际公共事务的重要途径,其对全球性问题既提供一套全新的综合管理模式,也促使经济体在全球范围内优化资源的配置。由此,以全球治理的视角来研究我国专利集中战略,必然具有重要的理论价值和现实意义。     

双镜联合序贯中药治疗肝外胆管结石术后肝郁脾虚型患者40例临床观察

目的 观察腹腔镜、术中胆道镜双镜联合序贯中药治疗肝外胆管结石术后肝郁脾虚型患者的临床疗效,为胆道术后围手术期应用中药提供依据。方法 选取安徽中医药大学第一附属医院普外科2019年1月至2021年12月住院的肝外胆管结石患者40例,将患者随机分为观察组与对照组,每组20例。对照组患者采用双镜联合的术式加常规术后西药治疗;观察组在对照组的基础上,术后加服补中益气汤联合四逆散加减。观察患者的临床疗效,中医证候分级量化积分,胆汁引流量,炎性指标：白细胞计数、中性粒细胞百分比、超敏C-反应蛋白、血清白三烯B4,肝功能及血清胆汁生化指标。结果 治疗后临床疗效方面,对照组和观察组总有效率分别为90.00％和95.00％,差异无统计学意义。中医证候分级量化积分方面,观察组各项积分均明显低于对照组（P＜0.05）。同时相比T管胆汁引流量,观察组患者术后第5 dT管胆汁引流量即开始出现明显减少,相比对照组,引流量改善具有统计学意义（P＜0.05）。炎性指标方面,两组患者各项指标均得到改善,与对照组相比,观察组各项指标改善更明显（P＜0.05）。肝功能及血清胆汁生化指标方面,观察组各指标改显著善优于对照组（P＜0.01）。结论 补中益气汤联合四逆散加减对双镜联合治疗肝外胆管结石肝郁脾虚型患者临床疗效显著,有效地改善临床症状和体征,改善肝功能,减轻术后炎性反应,减少胆汁淤积,临床应用安全有效。     

江西民办高校教师“职业过劳”形成机理的实证研究

过度劳动问题近几年来一直是我国学者研究的热点问题之一,随着我国经济的快速发展,社会越来越提倡"以人为本"科学发展观,倡导人力资本健康稳定地发展,但由过度劳动引发的民办高校教师群体"过劳死"等一系列事件频频发生,探究过度劳动背后的原因,找到相应的解决方案变得更加紧迫。本文选取了江西省某民办高校教师作为调查研究的对象,通过问卷的形式采取样本进行分析,了解民办高校教师过度劳动的程度,找出过度劳动给民办高校教师带来的影响,并找出原因,提出解决方案。