猪IL-18基因的原核表达及重组蛋白的纯化

以pcDNA3.1-pIL-18为模板,采用PCR技术扩增到了猪白细胞介素18(IL-18)的成熟蛋白基因,通过KpnⅠ SacⅠ双酶切及连接反应,构建了pET32c-pIL-18原核表达质粒。经过限制性内切酶分析、PCR鉴定及DNA序列测定证实,重组质粒中的基因片段连接正确。之后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),于37℃、1.0 mmol/L IPTG条件下诱导表达。菌体裂解产物经SDS-PAGE分析,在分子质量约为33 ku处出现了预期的目的蛋白。用8 mol/L脲对表达产物变性,经Ni2 -NTA柱纯化,透析复性,得到了纯化的IL-18蛋白。Western-blot分析证实,纯化的重组IL-18蛋白具有反应活性。上述研究结果为重组IL-18的应用奠定了基础。     

欧盟共同外交与安全政策高级代表阿什顿

2009年11月19日,欧盟召开特别峰会,推选欧盟委员会贸易委员凯瑟琳·阿什顿（Catherine Ashton）为欧盟共同外交与安全政策高级代表。根据欧盟《里斯本条约》,阿什顿的新职务合并了原欧盟共同外交与安全政策高级代表、欧盟委员会对外关系委员两个职位,同时她还兼任欧盟委员会副主席,以协调委员会其他涉外部门工作。阿什顿遂成为“既有钱、又有权”的首位欧盟“外长”。     

完善制度 创新方式 努力探索人大司法监督工作新途径

《中华人民共和国各级人民代表大会常务委员会监督法》于2007年1月1日正式实施。昆明市人大内务司法委员会通过建立健全监督工作机制,探索司法监督工作方式,加强制度创新,使司法监督工作有序进行。本文谨就监督法颁布实施以来,昆明市人大内务司法委员会依法开展人大司法监督工作的有关情况作简要交流。     

牛病毒性腹泻病毒长春分离株P125基因的克隆与序列测定

以MDBK细胞培养致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)NCD毒株,采用异硫氰酸胍一步法提取总RNA,并根据BVDV NADL参考株序列设计合成的1对引物(W1与W2),进行反转录PCR(RT-PCR),扩增出P125基因区约400bp的片段.经pGEM-T载体连接后克隆、测序,并与已发表的NADL、Osloss、SD-1、184、D、H、Yak等BVDV毒株序列进行比较.结果表明NCD株P125基因区无插入或缺失变异,但存在着核苷酸的替换;经聚类分析初步认为NCD株属于Ⅰa型.NCD株与长春184、H株核苷酸序列差异较大,而亲缘关系较近,表明BVDV在同一地区存在不同进化来源的毒株.     

2015年英国大选探析

2015年5月7日,英国举行新一届议会选举.根据5月8日公布的投票结果,卡梅伦领导的保守党赢得议会下院650席中的331席,超过议会半数.卡梅伦蝉联首相后,组建了新一届保守党内阁,多位内阁重臣留任.苏格兰民族分离主义、“脱欧”情绪上升成为新一届英国政府面临的两大挑战.     

大型民俗活动风险防控研究

相对于蓬勃发展的民俗活动实践,大型民俗活动安全管理研究明显落后。作为典型大型民俗活动,六月六活动组织折射出国内大型民俗活动的风险概况。由实地调研可知,各级人员风险意识不足、当地安保配备与应急管理能力不足是大型民俗活动最大的隐患。场地设施的可靠性与疏散安排的合理性对活动风险影响最大,民众情绪、行为等人为因素和社会环境因素复杂,风险性较高。鉴于民俗活动在少数民族地区意义重大,并且每年举办一次,其周边环境建设应彻底规划,安保的配备与培训也应常态化、并积极储备。     

马克思主义视阈下的可持续发展理念

马克思主义蕴涵丰富的可持续发展思想。一定程度而言，马克思主义本身就是关于可持续发展的科学。马克思主义不仅为可持续发展奠定了哲学基础，而且给人类和自然的可持续发展提供了科学的方法论；马克思主义对资本主义生态危机展开了深刻的批判，并为中国特色社会主义可持续发展道路指明了方向。     

地方政府依法行政的基本态势、问题及其对策探讨——以珠三角Z市为例

地方政府依法行政工作呈现出全面推进的良好态势,社会总体评价较好。但市县政府在行政决策、政务公开、行政审批、简政放权、行政执法等方面仍存在不足。全面推进地方政府依法行政、建成法治政府,应进一步推进政务信息公开,完善行政决策机制,深化行政审批改革,严格规范公正文明执法,强化行政权力的监督制约和问责;从加强法治教育、增强服务意识等方面入手,强化依法行政意识,进一步提高依法行政能力和行政效率。     

论我国民族自治地方自治立法的法治化探究

随着我国依法治国、建设社会主义法治国家治国方略的实施,立法已经成为我国社会主义法制建设的重要组成部分,而民族自治地方立法又是我国立法体制中的重大特色。从依法治国战略的角度考察,民族自治地方立法在法制建设进程中存在的诸多问题却直接影响了法治化水平的提高,并势必制约我国民族区域自治法制建设的健康运行。     

我国营利性事业单位改革的若干思考

营利性事业单位的改革是我国改革大局中的一个难题。营利性事业单位的改革目标是实现企业化和建立现代企业制度。为此,必须针对改革过程中存在的问题,在明晰产权、转变观念、科学管理等方面下工夫。