旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因的克隆与原核表达

根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制因子(Tsserpin)基因序列设计1对引物,从旋毛虫肌幼虫提取总RNA,应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,进行限制性酶切后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-Tsserpin,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经PCR、限制性酶切分析及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG进行了诱导表达。SDS-PAGE分析表达产物,表达产物纯化后用Western-blotting鉴定Tsserpin重组蛋白的抗原性。PCR与酶切鉴定结果显示,构建的重组表达质粒pET30a-Tsserpin与预期结果一致。测序结果表明,插入片段为1122bp,编码373个氨基酸,与GenBank中旋毛虫Tsserpin基因的相似性为99%。含有pET30a-Tsserpin重组表达质粒的大肠杆菌BL21(DE3)诱导后得到了高效表达,SDS-PAGE分析结果显示,表达产物的分子质量约为48.5ku,而且主要以包涵体形式存在。Western-blot分析结果表明Tsserpin重组蛋白可以被旋毛虫感染猪阳性血清特异性识别,提示其具有良好的抗原性,可以作为猪旋毛虫病免疫诊断的候选抗原。     

职教本科背景下河北省高职影视多媒体技术专业人才培养模式改革与创新研究

随着社会的不断发展和科技不断进步,影视多媒体技术已成为人们日常生活中不可或缺的部分,并广泛应用于各行各业中。同时,随着职业教育不断发展,培养适应社会需求的高素质技能人才也成为职业教育的重要任务之一。影视多媒体技术专业的人才培养模式需要不断改革和创新,以适应时代和市场的需求。文章选取河北省高职影视多媒体技术专业为研究对象,分析了当前人才培养模式存在的问题和挑战,提出了相应的创新发展措施。     

物业管理合同的法律特征及相关案件的审理

近年来,随着房地产业的升温,物业管理迅速发展,起诉到人民法院的物业管理纠纷案件不断增多。本文从管理体制等几个角度,分析了此类纠纷的产生原因,并从物业管理合同的性质和法律特征入手,对审理此类案件必然涉及的诉讼管辖、诉讼主体的确认、法律适用、合同效力的认定等法律问题进行了探讨,同时对审判实践中常见的几类物业管理合同纠纷案件的处理原则提出了自己的见解。     

火车票“站、座票同价”法律问题研究

近些年来,不断有乘客因火车票站、座同价而将铁路运输部门告上法庭,然而,法院在判决时却无一例外的宣告乘客败诉。铁路运输虽为公用事业,但站、座同价这个条款是一个典型的格式条款。本文从合同法基本原则及合同效力两个方面质疑火车站票、坐票同价的不合理性,并对火车票价格制度的完善提出建议。     

浅谈农村外出务工人员离婚案件——以沾益县为例

外出务工在给农民增加经济收入的同时也给他们的家庭稳定造成了冲击。当前,基层法院外出务工人员离婚案件比例高,呈逐年上升趋势。这些案件多表现为女方起诉男方、留守方起诉外出方和诉讼主体年轻化等特征。司法实践中,农村外出务工人员离婚案件审理存在被告出庭率低、证据收集难和调解难等现象。对农村外出务工人员离婚案件的成因、特点和审判困境的思考能为提高案件审理质量提供参考。     

消费者应警惕车辆维修中的“小病大医”

小病大医、只换不修是消费者在汽车维修过程中经常会遇到的问题。某些汽车维修店,维修工人对于能小修的一定大修,能修好的却要更换零件,只修几处即可的非要整体拆修。面对高额维修单,消费者通常是目瞪口呆,却只能按单交费。那么消费者在遭遇过度维修后究竟应当如何维护自己的合法权益呢？     

互联网 + 对中国企业民主管理实践的影响

当前,"互联网+"已经升级为中国国家战略,政府出台政策号召群团组织要拥抱互联网,中华全国总工会积极推动互联网与工会工作例如企业民主管理相融合,互联网正逐渐打破传统企业民主管理政治参与现状,职工由被动参与向主动参与转变,由部分参与向全部参与转变,互联网助推中国企业民主管理回归产业民主实质。     

道德自由是人的重要本质——荀子“辨”与康德“自由意志”之比较

康德道德哲学通过对"自由意志"概念的论述与推崇,彰显人作为道德主体的存在的本质性意义,代表了西方人性论一贯高扬"自由"、"主体性"的风格。而荀子对其人性论中的"辨"概念的论述,在道德目标指向性、先验普遍性和主观自信性方面与康德不谋而合,同样代表了中国哲学中的相同风格。中西哲学家关于"道德自由"的致思具有的一致性,说明"道德自由"是人的重要本质。     

地方政府邻避项目决策正义性的评估体系构建与运用

近年来,地方政府主导的邻避项目决策正义性受到公众质疑.政府强调决策的经济、效率标准,而公众更关注自身诉求是否得到平等对待.为进一步增强地方政府邻避项目决策的正义性,促进社会正义共识的形成,必须突破传统的政府决策绩效评估方法,将正义性作为一个新的评估维度去审视地方政府决策.本文构建了能够反映公众诉求的地方政府邻避项目决策...