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采用反转录-聚合酶链反应扩增了牛轮状病毒NCDV株VP6基因,将其定向插入原核表达载体pProHTa中,构建了重组表达载体pProHTa-NCDV-VP6,重组菌经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,目的蛋白获得表达,表达的蛋白大小约52ku,且有生物活性。以纯化的重组VP6蛋白作为包被抗原,建立了检测牛轮状病毒血清抗体的间接ELISA方法,并与传统的琼脂扩散试验进行了比较。结果显示,建立的间接ELISA的敏感性较琼脂扩散试验高1×104倍。表明,该间接ELISA的建立为牛轮状病毒感染血清抗体的检测提供了一种简单、快速、灵敏的方法。 相似文献
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表达传染性腔上囊病病毒VP2蛋白重组乳酸菌的构建及其免疫保护效果 总被引:1,自引:0,他引:1
为探讨表达传染性腔上囊病病毒(IBDV)VP2蛋白重组乳酸菌的口服免疫效果,采用RT-PCR方法扩增了1株IBDV流行毒株的VP2基因,再分别亚克隆到干酪乳杆菌和乳酸乳球菌的表达载体pPG2和PNZ8112中,并分别电转化干酪乳杆菌L.casei393和乳酸乳球菌NZ9000的感受态细胞,构建了重组菌pPG2-VP2/L. casei393和PNZ8112-VP2/NZ9000.分别经20 g/L乳糖和1 ng/mL的乳链菌肽诱导表达后,对菌体裂解物进行了SDS-PAGE和Western-blot分析.结果显示,重组菌pPG2-VP2/L.casei393和pNZ8112-VP2/NZ9000的裂解物中分别出现大小约为53 ku和50 ku的反应带,大小均与预期结果相符,表明目的蛋白在重组菌中得到了表达.重组菌pPG2-VP2/L. casei393和pNZ8112-VP2/NZ9000分别口服免疫SPF雏鸡后,均刺激机体产生了特异性抗IBDV VP2蛋白的血清抗体;攻毒保护试验结果显示,其保护指数分别为62.5%和37.5%,表明重组菌免疫雏鸡后,对IBDV的攻击均具有不同程度的免疫保护作用. 相似文献
378.
暴力犯罪是不良社会成员在暴力文化的指导和推动下产生的严重危害社会的犯罪行为。暴力文化的传播直接刺激了社会成员的暴力犯罪欲望,降低了人们对暴力行为的抑制心理;暴力文化的传播成为社会成员模仿暴力行为,学习犯罪技能的示范教材,暴力文化的传播扭曲异化了社会成员的价值观念,使青少年养成残忍冷酷的性格特征。 相似文献
379.
精准监督体现为监督理念、监督方式、监督范围、监督对象等各方面的适当性。实现民事检察精准监督既要准确定位监督思路,又要精准把握监督标准。在监督思路上,要做到"五求",即转变观念求新、监督重点求精、程序规范求严、审查手段求全、监督质效求好。在监督标准中,要重点关注生效裁判结果监督领域的重点问题,准确把握民事检察精准监督的标准,实现民事检察精准监督。 相似文献
380.
曾庆红同志在中央党校2004年春季学期开学典礼上的讲话指出:“我们要树立大教育、大培训观念,干部培训和轮训要从满足学员获得岗位培训学历需求为主向满足学员能力提高需求为主的转变,从单纯教育培训在校学员为主向面向全党、为开发人才资源做贡献转变。我们要坚持以能力建设为核心,重点培养党员干部的学习能力、实践能力,着力提高党员干部的创新能力。”这是中央领导在新形势下对干部教育提出的新要求。 相似文献