口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达

为验证siRNAs对口蹄疫病毒(FMDV)复制的抑制效果,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增Asia 1型口蹄疫病毒Jiangsu/China/2005株的3C基因,克隆入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-N1中,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染PK-15细胞,检测EGFP的表达和3C基因转录水平。结果显示,经PCR及双酶切鉴定,目的基因片段大小与预期相符,测序结果与Jiangsu/China/2005株相应序列一致。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内有EGFP表达,实时荧光定量PCR检测到细胞内有3C基因的转录。证实,成功构建了FMDV 3C基因与EGFP共表达质粒并在PK-15细胞中获得了表达。     

新经济组织发展对统一战线工作的影响

新经济组织是改革开放和建立社会主义市场经济体制以来,在我国发展起来的一切非公有制经济组织的统称。它从无到有、从小到大,现在已成为社会主义市场经济的重要组成部分。它的发展对统一战线工作的影响巨大。应多措并举,促进新经济组织更快发展。     

大学生创业难的影响因素和对策探究——以天津市高校大学生为例

大学生创业已经成为越来越多大学生改变生活质量、实现理想抱负的方式之一。但是受到诸多因素的影响,大学生创业形势与就业形势一样不容乐观。基于对天津市在校大学生、已毕业大学生群体进行实证调查的基础上,分析大学生创业难的影响因素,并从政府、社会、高校、家庭和大学生自身五个方面提出相应解决对策。     

高校网络文化建设中思想政治教育主导性作用探微

网络文化愈来愈深刻地影响着大学生学习、生活的各方面,给高校思想政治教育工作带来了机遇和前所未有的挑战。充分发挥思想政治教育的主导性可以确保网络文化建设的正确方向,规范大学生的网络行为,提高大学生的网络文化素养。高校在网络文化建设中必须坚持社会主义核心价值观的引领,培养一批具有思想政治教育背景的高素质网络文化管理者,并积极利用新媒体这一有力工具,充分发挥思想政治教育的主导性作用,增强网络时代思想政治教育的有效性。     

促进高级研究的制度性战略

柏林自由大学是德国一流的研究型大学。为应对高等教育国际化、德国人口减少和人才外流的挑战,满足国家对高层次人才的需要,高等教育必须实现制度性战略转型。德国柏林自由大学进行了促进高级研究的制度性战略改革,构建起一个创新型的网络体系。其中,集群发展中心、研究生教育中心和国际交流中心是这一网络体系的核心构架。     

叶下珠水提物对裸鼠人肝癌移植瘤HBx和VEGFR3表达的影响

目的 探讨乙型肝炎病毒x基因（hepatitis B virux x gene, HBx）和血管内皮生长因子受体3（vascular endothelial growth factor receptor 3, VEGFR3）基因与乙型肝炎相关肝癌的相关性,以及叶下株水提物（aqueous extract of phyllanthus urinaria L, AEP）对HBx和VEGFR3蛋白表达的干预作用。方法 将60只Balb/c-nu裸鼠随机分为10组。分别复制转染HBx、氯霉素乙酞转移酶（chloramphenicol acetyltransferase,CAT）和VEGFR3基因的HepG2肝癌细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,用AEP进行干预,以生理盐水、环磷酰胺（cyclophosphamide,CTX）作为对照,共治疗6周。观察模型复制后不同时间各组裸鼠的移植瘤生长状况,采用酶联免疫吸附试验检测各组裸鼠血清甲胎蛋白（alpha fetal protein, AFP）水平,采用Western blot方法检测移植瘤组织中HBx和VEGFR3蛋白表达水平。结果 肝癌移植瘤模型复制成功。各组裸鼠体质量均随着时间显著增长。实验结束时,接种HepG2-HBx细胞的各组中,AEP处理组肿瘤质量显著低于CTX处理组（P＜0.05）,其AFP水平显著高于NS处理组（P<0.05）,其移植瘤组织中HBx表达水平显著低于NS组（P<0.05）。接种相同肝癌细胞的各组中,AEP处理组VEGFR3表达水平最低,但与CTX组VEGFR3表达水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;AEP组和CTX组VEGFR3表达水平显著低于NS组（P＜0.05）。对于相同的处理因素,接种HepG-HBx细胞和HepG-CAT细胞的裸鼠移植瘤组织中VEGFR3表达水平均显著低于接种HepG-VEGFR3细胞的裸鼠（P＜0.01）。结论 AEP通过直接抑制HBx蛋白和VEGFR3蛋白表达,及通过抑制HBx蛋白表达而间接抑制VEGFR3蛋白表达,达到对肝癌移植瘤生长的抑制作用。     

传染性腔上囊病病毒VP3蛋白模拟表位的筛选

为了研究传染性腔上囊病病毒(IBDV)的致病机理及研制有效的IBDV疫苗,利用噬菌体展示技术对IBDV VP3抗原表位进行了筛选。以4株IBDV VP3单克隆抗体HRB-3F、HRB-7B、HRB-7C和HRB-10E作为筛选分子,对噬菌体随机15肽库进行3轮吸附-洗脱-扩增淘洗,从每株单克隆抗体筛选到的噬菌斑中随机挑取20个单克隆噬菌斑,通过间接ELISA和竞争抑制ELISA检测,共选出13个单克隆噬菌斑,经噬菌体gⅢ部分基因的核苷酸序列测定,确定了8个15肽为IBDV抗原表位。这8个15肽在一级结构上没有3个以上连续氨基酸与IBDV Gx(Gen-Bank登录号:AY444873)VP3的氨基酸序列相同,但二级结构上均以β折叠为主,并且与单抗的结合可被VP3蛋白有效地抑制。证实,筛选的是IBDV VP3的模拟表位。     

对摧泪瓦斯手枪检验的初探

通过对一支德国造摧泪瓦斯特种手枪的检验,对该枪的结构、性能、用途等进行了剖析,报道如下。 1996年11月份,伊犁地区检察分院从某受贿嫌疑人家中查获特种手枪一支、子弹2枚,要求检验确定枪支、子弹的性能和用途。 送检枪支为德国制造的口径8mm的特种手枪(枪号36812)。枪支较新,加工精     

大意终成玩“火”者

今年元月九日深夜,座落在本市东北隅的宝山县罗店五金交电批发部的仓库大楼里突然闪出了火光,接着"哔卟"乱响的火舌腾腾而起,残酷地吞食着堆放在仓库里的物品,一些闻警而来的仓库值班人员和破门而入的救火者,由于找不到灭火器材,眼睁睁地看着大火沿着楼梯过道迅速向上蔓延……每秒钟以万元而计的损失,竟在这束手无策的延宕中累积着,整整几十分钟过去了,当消防战士疲倦地放下水枪时,人们才意识到:在一至五楼仓库过道里曾经堆放着的洗衣     

“把百姓期盼的事办好”-追记肇东市黎明镇长富村党总支原书记李凤山

有这样一个人,在村党总支书记岗位上一干就是37年;有这样一个人,人们淡忘了他的名字,却记住了他的“大干”绰号;有这样一个人,得到过时任国家副主席的习近平同志“对党忠诚、群众信赖”的高度评价;有这样一个人,曾获得省劳动模范并被评为“感动龙江”人物;有这样一个人,他带领的村党总支被评为“全国先进基层党组织”。