鸡myostatin基因成熟区段DNA的克隆及其在甲醇酵母中的融合表达

根据GenBank中鸡myostatin(AF019621)成熟区段的cDNA序列设计了1对引物,利用PCR技术扩增了萧山鸡myostatin的成熟区段,构建了重组真核表达载体myostatin-pPIC9K,并在甲醇酵母中融合表达了myostatin蛋白。结果发现,萧山鸡myostatin基因存在2处碱基变异:T204→C204(编码的氨基酸没有变),C205→T205(编码的氨基酸由Pro变成Ser),从而产生了1个EspⅠ或Bpu1102Ⅰ限制性内切酶酶切位点。核苷酸序列同源性分析表明,myostatin基因成熟区段DNA在不同物种间具有高度的保守性。SDS-PAGE鉴定结果表明,表达的目的蛋白(26 ku)具有生物学活性。     

猪血凝性脑脊髓炎病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据GenBank中的猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)S蛋白基因的保守序列设计合成1对特异性引物,经PCR扩增S基因并构建含有该基因片段的重组质粒,将该重组质粒作为阳性标准品,建立了检测HEV的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法。结果显示,该方法线性关系良好,相关系数为0.994;敏感性高,检测下限为1.6×104 copies/μL;特异性强,与牛冠状病毒、伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒不发生交叉反应;并且重复性好,组内、组间的变异系数均小于2%。应用该方法对采集的20份疑似HEV感染病料进行检测,其中16份为阳性,而用常规PCR检测同样的样品,仅8份为阳性。表明建立的SYBRGreen Ⅰ real-time PCR方法具有快速、特异、敏感、重复性好等优点,可用于临床上HEV的检测及定量分析。     

鸡毒霉形体H3株TM-1基因的克隆与序列分析

对鸡毒霉形体内蒙古分离株H3 株的TM 1基因进行了克隆和序列分析。根据巳发表的MGS6株TM 1蛋白基因序列分析设计了 1对引物 ,以H3 株DNA为模板进行PCR扩增 ,得到约 0 .8kb的片段 ,将该产物克隆到pUCm T载体上 ,得到重组质粒。经Kieser法、质粒PCR法、PstⅠ单酶切等方法鉴定后 ,测定H3 株TM 1基因序列 ,并与已知S6株TM 1基因序列进行了比较 ,结果表明 ,MGH3 株与S6株TM 1基因核苷酸序列同一性为 96.5 7% ,氨基酸同一性为95 .42 %。这些结果为进一步研究MGH3 株的基因免疫和基因工程疫苗等奠定了基础     

政权"内卷化"与国家建设的悖论——从"文化权力网络"的理论逻辑出发

所谓"政权扩张的内卷化",是指一种社会或文化模式在某一发展阶段达到一种确定的形式后便停滞不前,无法转化为更高形态的现象.对发展中国家而言,政权内卷化往往是现代化过程中的"陷阱".本文认为,从"文化权力网络"的逻辑出发,关键在于给予民众民主权刺,通过民主,至少是部分的民主自治来解决地方政权经纪化的问题.但对于绝大部分后发现代化国家来说,在完成国家民主化转型的过程中,在经济发展与社会稳定之间往往要作出艰难的权衡,如何迈出这一步,不仅对学者是一种考验,同样也考验着执政者.     

基于行动导向的公安行政文书课程教学模式探讨

公安行政文书作为一门基础性的警务课程，是在完成公安任务的具体过程中来体现其实用价值的。公安行政文书的“警务课程”性质，决定了它的课程教学应当定位于“行动导向课程模式”。这种教学模式要求教师创设一种仿真的学习环境和气氛，以学员为中心，以任务为载体，组织并指导学员在完成具体任务的行动中，手脑并用，做学结合，身体力行地荻取专业能力、方法能力和社会能力。     

三十年来军队院校改革与发展的回顾与展望

改革开放以来,军队院校建设指导思想实现了三次重大历史性转变,逐步形成了成熟的办校方针和办学思想;军队院校体系规模结构经历了五次重大战略性调整,建立了特色鲜明的新型院校体系;军事人才培养模式由"单一"走向"多元"、由"相对封闭"走向"全面开放",形成了丰富多样的人才培养格局.     

城市独生代核心家庭老龄者的看护困境与模式选择——基于相关调查的分析

中国的独生代有着特殊的心理、行为和消费价值观,这些观念反映在对老龄者的看护问题上有着特殊的表现形式.随着老龄者看护需求的不断增大,传统家庭的看护功能越来越弱化和困难,本文基于相关调查,分析了城市中独生子女核心家庭老龄者的看护现状,并对其看护模式选择提出了建议.笔者认为,解决的根本途径在于,在完善我国养老保险和医疗保障的同时,需要引入看护保险制度的设计.     

改革开放以来中国社会文化生态分析

社会文化生态指的是在特定历史条件下，处于变近过程中的社会文化系统在多元价值要素复杂互动的作用下所显示出来的整体存在状态，这种存在状态不是静止状态，而是在与政治系统和经济系统的互动中持续进行着价值内容的更新，通过价值内容的更新，文化生态得以不断展现出新的性质和特点。改革开放以来的中国社会文化生态表现为传统与现代交织中的价值多元。     

中国现代化进程中的三次伟大革命

国际环境与特殊国情决定了中国现代化与西方国家有不同的道路.近一个世纪以来,辛亥革命、新民主主义革命和社会主义革命、改革开放,是中国现代化进程中的三次伟大革命.这三次革命既体现了历史继承性,又体现了理论上的超越和实践中的新开拓.三者的共同主题是振兴中华,在振兴中华的过程中最终实现了对资本主义的摒弃和对社会主义的选择.中国特色社会主义则在对前人的继承和超越中,迎来了民族复兴的光明前景.     

中国搜索引擎遭遇拷问——百度MP3案法律问题分析

2005年9月16日,北京市海淀区人民法院对上海步升音乐文化传播有限公司诉北京百度网讯科技有限公司(以下简称“百度”)录音制作者权侵权纠纷一案 (以下简称“该案”)作出一审判决,被告百度公司败诉并已上诉1。该案引起了连锁反应,七大唱片公司紧接着在北京市第一中级人民法院提起诉讼,指控百度未经许可