残缘璃眼蜱subolesin基因的原核表达及表达产物的反应原性分析

为研究残缘璃眼蜱subolesin基因的生物学特性以及寻找新的抗蜱和蜱传病疫苗候选抗原,根据GenBank上登录的小亚璃眼蜱subolesin基因核苷酸序列设计特异性引物,以残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱的饥饿成蜱cDNA为模板,扩增出subolesin基因的完整阅读框(ORF)。将残缘璃眼蜱subolesin基因的PCR产物经EcoRⅠ+NotⅠ双酶切后连接至表达载体pGEX-4T-1,把重组质粒pGEX-4T-1-subolesin导入感受态细胞BL21(DE3)中,在37℃、1mmol/L IPTG条件下诱导表达。利用SDS-PAGE分析subolesin基因的体外表达特征;用Western-blot分析Subolesin蛋白的反应原性。结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱subolesin基因的ORF长度分别为492、492、486bp,分别编码163、163、161个氨基酸。subolesin基因序列和推导的氨基酸序列的比对结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱与参考的小亚璃眼蜱的核苷酸序列同源性分别为98%、98%、89%,氨基酸序列同源性分别为98%、99%、93%。SDS-PAGE和Western-blot结果显示,重组残缘璃眼蜱Subolesin蛋白的分子质量为45ku,纯化的subolesin重组抗原可与抗残缘璃眼蜱全蜱血清、残缘璃眼蜱唾液腺、卵巢血清有较强的反应原性。     

刑事政策视野下我国暂缓起诉制度之构建

暂缓起诉制度具有深厚的法理基础和重要的价值意蕴,虽然学界对我国是否应当建立暂缓起诉制度存在争论,但权衡利弊,我们认为,在我国建立暂缓起诉制度是很有必要的。     

现代农业视角下的职业农民培育问题探析

现代农业的发展与职业农民的培育息息相关。目前我国的农地制度、教育体制、城乡二元体制成为职业农民形成的主要制度障碍。为此,从发展现代农业的视角,应从稳定土地承包经营权,规范农地流转制度;大力发展农村职业教育;打破城乡二元格局;促进农业分工和专业化;培育农村人力资本形成机制;积极吸引农村以外人才从事农业等方面入手,铲除阻碍职业农民培育的制度性障碍。     

让杭州散发璀璨的光芒

城市灯光夜景是城市品味的展示,也是城市魅力的体现。每座城市都有着自己不同的历史文化、发展定位、社会功能和结构特点等,因此城市亮灯工程不是静态的平面设计,而是立体的、持续性的、扩展性的、孕育文化认同感的一种深层次活动。有着2200多年历史的杭州是华夏文明的发祥地之一。自古以来杭州一直在政治、经济、文化等方面散发着璀璨的光芒。     

创城市管理机制走和谐发展新路

崇文区面积16.46平方公里,是"首都功能核心区"之一,也是具有3000多年历史、850多年建都史、举世闻名的历史文化区,有着深厚的历史和人文底蕴.     

高职学生实施人文素质教育探析

针对当前高等职业教育(高校,下同)学生思想品德缺失的状况,在高校思想政治教育工作中,强调高校应发挥育人功能,积极创造育人环境,强化大学生人文素质教育的培养.     

一人公司犯罪主体论

一人公司属于刑法上的单位主体。经公司人格否定评价后的一人公司仅就特定事项在公司法上丧失公司人格,但仍具备成立单位主体的前提。如果因为犯罪行为而构成特定事项上的人格否定,则不能成为单位主体。经“单位主体否定”评价后的一人公司若属于有组织犯罪,应追究其自然人的刑事责任。     

基于竞争中性的政府监管:国际比较与改革方向

基于竞争中性的政府监管改革是高质量发展的现实需要,也是扩大对外开放的必由之路。横向对比"澳版""OECD版"和"美版"竞争中性原则在针对市场、强调重点、政府干预以及实施成效等方面的异同,并利用PMR指标对我国竞争中性效果进行国际比较,发现我国竞争中性原则还未得到深入贯彻,改革步伐远落后于他国。从纵向上来看,我国经济改革与竞争中性具有兼容性,但存在行政垄断、市场准入、隐形补贴等方面的监管非中性现象与法律缺失的异质性因素。基于此提出避免过度干预,激发竞争中性潜能;加强公正监管,累积竞争中性动能;完善法律机制框架,构筑竞争中性势能;发挥各方合力,打造竞争中性智能的监管改革方向。     

民营企业老板向企业家发展的路径选择

民营企业能否在深化改革的过程中保持持续发展的势头,已成为民营企业老板必须思考和解决的问题。民营企业要持续发展,必须解决的问题几乎都与民营企业老板有关。民营企业老板能否解决好自身即企业内部的问题将直接关系到企业的命运。     

融资犯罪刑法规制路径优化探索

以融资犯罪的整体规范视角分析当前合法、非法或者构成犯罪的民间融资行为,有助于全面把握我国刑法规制各类直接或者间接融资犯罪的规范功能与结构,动态地考察与反思当前融资监管行政法律规范与融资市场机制刑法规范之间的缺位、越位、错位问题。解决融资犯罪刑事控制结构性失衡与紊乱的关键在于:在制度执行上实现直接融资与间接融资市场机制刑法平等保护,在规范适用上实现融资犯罪主观与客观构成要件证明压力分散与均衡。