弓形虫烯醇化酶2基因的原核表达与鉴定

为深入研究弓形虫烯醇化酶的生物学功能,根据已发表的eno2基因序列设计引物,通过RTPCR方法扩增弓形虫RH株的eno2基因。将eno2克隆到载体pET-28a(+)中后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达并优化表达条件,SDS-PAGE分析表达情况,并通过Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定其免疫活性。结果显示,eno2基因全长1 353bp,编码444个氨基酸,与GenBank中登录的弓形虫烯醇化酶基因的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性均高达99.8%,与其他物种的烯醇化酶的同源性较低。在pH7.5、28℃和IPTG终浓度0.1mmol/L条件下,重组蛋白ENO2得到高效可溶性表达,分子质量约为55ku。Western-blot结果显示,重组蛋白能被感染弓形虫的犬阳性血清识别,说明ENO2具有较好的反应原性,可以作为血清学诊断抗原。IFA表明,NO2在弓形虫的细胞质和细胞核中均有分布。结果表明,本研究成功获得了可溶性、具有良好免疫活性的弓形虫重组蛋白ENO2,为深入研究其生物学功能奠定了基础。     

保险法理论的发展与保险实务的应对及挑战——以《保险法司法解释二》的实施为中心

《最高人民法院关于适用〈保险法〉若干问题的解释（二）》就保险实务中若干重问题予以了规定,包括保险利益、追溯保险、如实告知义务的内容以及保险金给付与其他请求权之间的关系等,此次解释或采纳了最新的保险法理论研究成果,或根据保险法原理突破了传统法规的不合理适用规则,为更好地保护保险消费者权益以及保险业的发展创造了良好的司法环境.     

微滴式数字PCR技术用于生物样品种属鉴定和绝对定量

目的 运用微滴式数字PCR技术进行生物样品的种属鉴定和绝对定量.方法 选择人mtDNA两个编码基因ND4和16S rRNA,设计特异性引物与探针,用人来源及常见动物样本验证种属特异性,再用重组质粒和2组共16份人来源生物检材,倍比稀释.使用微滴式数字PCR技术进行种属检验和绝对定量,验证其灵敏度和稳定性.结果 人重组质粒FAM （ND4）可进行人来源样品的检测,其检测结果与各级稀释梯度基本吻合,微滴式数字PCR技术可以检测出反应体系中低至单拷贝的DNA.结论 微滴式数字PCR技术可以进行生物样品的种属鉴定和绝对定量,并具有很高的灵敏度和特异性,可应用于日常法医物证检验.     

各利益相关者在医院与社区双向转诊合作中的责任与机制简

针对目前双向转诊中信息不能共享、药品获得和费用报销障碍、社区人力服务水平相对较差等问题,从双向转诊中各利益相关者角度分析在双向转诊实施过程中政府、医疗机构（医院与社区卫生服务机构）、患者与家属各自应当承担的责任,提出相应的措施及改进机制。     

Windows Phone 7智能手机的取证

作为新兴的智能手机,Windows Phone手机呈稳步发展趋势,并越来越受到人们的关注.在介绍了WindowsPhone 7手机的系统架构和安全模型后,就取证遇到的问题详细地描述了取证方式,探讨了如何对Windows Phone 7智能手机进行取证.通过使用原生级方法和Windows Phone SDK访问Window Phone 7内核和其他数据来获得手机的有价值信息,同时通过一系列工具来分析手机上的文件.结果表明,能够从Windows Phone 7手机中有效寻找到短信、电子邮件、社交活动等证据资料.     

中国传统契约“原因条款”研究——兼与欧陆民法原因理论之比较

中国传统契约中的原因条款,不仅是一种事实,还具有重要的法律意涵,它既是直接引致订立契约的原因,同时也作为一方当事人订约的动机,体现对社会经济需求的某种满足。确定产权合法有效转移的契约本身又作为"产权"转移的重要原因,产权的有效移转和契约的有效成立在传统契约实践中是紧密联系的。明确契约之债的"原因",本身有助于更准确地对契约"定性",也能更方便地确定契约是否合法、有效。从交易安全与契约定性的角度看,中国传统契约中的原因条款亦具有现代价值。     

网络犯罪的形势及其对国际刑法的影响

人类活动在任何领域所取得的成功都将导致需要相应机制控制的犯罪。随着全球互联网技术的发展,人类社会正在面临着一场深刻的革命,互联网是一把“双刃剑”,在其给人类社会生活带来无尽便利的同时,网络犯罪也随之成为全球所面临的重大问题,其必将为国际刑法的发展带来许多新的问题和挑战。     

死刑具有最有效的威慑作用论之否定

死刑具有最有效的威慑功能这个神话一直为许多学者大肆宣扬,并成为了广大统治者控制犯罪的信条。但是二百多年来,不少学者提出了相反的看法,并不断地论证"死刑具有最有效的威慑作用"的非科学性。对"神话"的证伪有两大进路,一是从逻辑思维的角度进行,另一途径是从实证分析的角度进行。通过对"神话"的证伪,可以为政治家、立法者、司法者正确对待死刑提供科学理论指导。     

实施贵州旅游精品战略的几点建议

近年来,贵州旅游业的发展取得了显著的成就,但也存在一定的问题。实施旅游精品战略,是更好更快地发展贵州旅游业的必然选择。要强化旅游精品战略意识、打造特色旅游精品,以旅游产业集群为核心,实施旅游精品战略,政策倾斜,促进贵州旅游精品战略的实施。     

喀斯特石漠化对贵州民族地区经济发展的影响及防治对策

贵州是一个少数民族聚集的山区省份,也是一个喀斯特面积最集中的省份。喀斯特地型往往与贫困落后相联系,由于环境质量下降,自然生态退化严重,影响了我省民族地区经济和社会的发展,加强对喀斯特石漠化的治理,对贵州民族地区经济的发展具有重要的意义。