无血凝性兔出血症病毒VP60蛋白分子特性的分析及其在大肠杆菌内的高效表达

分离出1株在4、25、37℃条件下均不能凝集人"O"型红细胞的兔出血症病毒(RHDV),命名为SQ-1株;采用RT-PCR扩增获得病毒主要结构蛋白VP60蛋白基因,并对目的基因进行测序及分析;将目的基因定向克隆入原核表达载体pET-30a的多克隆位点,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,纯化重组蛋白,用Western-blot检测其反应原性。测序与同源性分析结果显示,该毒株属于RHDV抗原遗传变异株(RHDVa),所扩增的VP60基因的ORF为1 740bp,编码579个氨基酸残基,与世界上其他RHDV毒株的核苷酸序列的同源性为89.9%～98.0%,与已报道的无血凝特性的病毒株whn-1株及低血凝性的Rainham株的核苷酸序列的同源性分别为95.2%及90.8%。重组质粒经IPTG诱导后目的基因获得表达,重组蛋白与预期大小一致,分子质量约为60ku,主要以包涵体形式存在。Western-blot检测证实,纯化蛋白能够与RHDV阳性血清发生良好的杂交反应,说明该重组蛋白具有良好的反应原性。     

大学生诚信教育的环境分析

对大学生的诚信教育是一项复杂的系统工程。它不仅需要学校大力加强学生诚信素质的培养,而且需要良好的外部环境的熏陶与配合。社会、家庭与学校应高度重视诚信教育,营造良好的诚信环境,加强诚信教育的方法研究以及建立必要的诚信机制,探索建立一种适用的大学生诚信教育体系。     

贯彻"三个代表"要求坚持"三个文明"一起抓--兼论社会主义政治文明建设

江泽民同志提出“建设社会主义政治文明”及其基本特征和“三个文明”全面发展的概念 ,反映了党在不断深化对社会主义建设规律认识上的一个新飞跃 ,是对科学社会主义的一个重大理论创新与贡献 ;坚持社会主义“三个文明”一起抓是全面贯彻“三个代表”学说的内在要求 ;进一步推进社会主义政治文明建设 ,就要大力增强全党全社会政治文明意识 ,坚定不移地走适合国情的政治发展道路 ,以实现中华民族的伟大复兴。     

论山西农业学大寨运动中的几个问题

在"文革"前,山西的农业学大寨运动基本上是健康的;"文革"中的教训是极其深刻的.这一运动毕竟是一场在党的领导下以改变农业生产落后面貌为目的的农业生产运动,因而取得了一定的成就.     

关于“和谐公安”及其运行机制的思考

构建社会主义和谐社会既给公安工作提出了新的更高要求,也赋予了公安机关更大责任和更重任务."和谐公安"理念的提出正是回应现实需求与公安发展规律的优先选择,体现了新时期人民公安工作的重要特征.为此,公安系统必须以维护社会和自身的和谐为工作的目的和宗旨,从进一步提高"以人为本"的执法理念、深入推进"三基"工程建设和切实改进公安队伍的结构等方面着手,努力构建和谐的公安队伍和公安体系.     

开启理论探索的"新航程"——读《西方国际政治学:历史与理论》(第二版)

经过近一个世纪的长足发展,西方国际政治学已经逐渐成长为一个极其重要而相对复杂的知识谱系。王逸舟教授新近出版的《西方国际政治学:历史与理论》对这门学科做出了一种较为清晰的全景式探索。本书重点揭示了学科的多元化发展轨迹,强调了一些本源性思考的学科意义,点明了主流理论自我更新的能力,并适当介绍了研究方法、未来发展趋向等内容。本书真实反映了作者与西方众多理论巨人之间的直接对话,是一个指引读者系统而准确地理解西方国际政治学的航标。     

欠发达地区农村公共服务体系建设研究

党的"十七"大提出缩小区域发展差距,"必须注重实现基本公共服务均等化",为此要加大对欠发达地区公共财政转移支付力度,可通过每年的全国人民代表大会审计财政预算来保证。公共服务市场化改革,在欠发达地区拟推行"公共服务项目实名制有价证卷"的政府补贴方法。从制约因素来认识欠发达地区农村公共服务建设,就要大力发展本地区经济。欠发达地区农村公共服务体系的构建,要解决三个问题:欠发达地区农村公共服务体系的子系统中基本公共品供给;界定各种公共产品提供者的责任;落实各级政府责任的机制。     

未成年人人身损害赔偿中误学费赔偿问题浅析

“误学费”是指在未成年人人身损害赔偿案件中,未成年人因侵权行为所导致的身体损害而遭受到的就学利益的损失.根据现代民法侵权损害的“全面赔偿”原则,参照就学时间损失、就学机会损失的标准,“误学费”的赔偿范围应当包含:补课费、生活费、精神损失费.     

计量与案例:法律实证研究方法的细剖析

法律实证研究方法可以分为计量研究和案例研究两大类。它们各自又可以再细分,如前者可分为基于原始生成数据、人工数据、实验数据作出的研究;后者可以分为基于假想案例、日常案例、全景式案例、罕见案例作出的研究。每种具体研究方法的优缺点都值得深入分析。正确认识其分类与短长可以帮助我们更好地选择、使用这些研究方法,有针对性地进行学术批评、回应,及进行有效的学术跟进、完善。     

卡介菌多糖核酸对泌乳奶牛外周血PMN吞噬功能及活性氧释放的影响

为探讨卡介菌多糖核酸(polysaccharide nucleic acid fraction of Bacillus Calmette Guerin,BCG-PSN)对泌乳奶牛外周血嗜中性粒细胞(neutrophil,PMN)吞噬功能及活性氧(reactive oxygen species,ROS)释放的影响,选取处于泌乳初期的健康奶牛,无菌采集颈静脉血,肝素抗凝。不同浓度的BCG-PSN(终浓度分别为0、2、5、10、40、80μg/mL)与全血共孵育2h,加入FITC标记的大肠杆菌悬液10μL,37℃20min后,放入冰水中终止吞噬反应;溶血素裂解红细胞,0.01mol/L、pH 7.2PBS洗涤2次,重悬后FL1通道检测PMN对大肠杆菌的吞噬率。不同浓度的BCG-PSN(终浓度分别为0、2、5、10、40、80μg/mL)与全血共孵育2h后,加入乙酸肉豆蔻佛波酯(phorbol myrisate acetate,PMA)刺激PMN,其中PMA刺激的终浓度为100ng/mL,同时每个浓度梯度设无PMA(等量PBS代替PMA)刺激对照;37℃作用15min后加入双氢罗丹明123(dihydrorhodam...