鸡Akt基因mRNA SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为快速检测鸡细胞的增殖能力,利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR技术,建立鸡Akt基因mRNA的定量分析方法。根据GenBank中原鸡Akt基因和鸡β-actin基因序列,设计合成特异性引物,应用RT-PCR技术从DF-1细胞中扩增出目的基因的DNA片段,并将纯化后的PCR产物与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin。分别以重组质粒pMD18-Akt和pMD18-β-actin为标准品建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测的标准曲线。结果显示,建立的RT-PCR标准曲线具有良好的线性关系和特异的单个峰,能够对样品进行稳定可靠的定量检测。采用本方法检测DF-1-PrP和DF-1-count细胞系的Akt基因的相对表达量,前者为1.656 9×103,后者为2.257 4×102,DF-1-PrP细胞系的Akt基因表达量明显高于DF-1-cont细胞系(P0.01),说明PrPC及Akt在DF-1细胞系中的表达量呈正相关。结果表明,本研究建立的鸡Akt RT-PCR检测方法能够通过对Akt基因的转录量进行检测而评价鸡细胞的增殖能力。     

权责分立与风险分配:网格化管理困境分析

当前的网格化管理研究多从技术与治理角度探讨利弊,事实上,治理技术与技术治理之间存在治理组织与缺席环境的调节作用。回归治理情境,分析县域治理结构及组织激励机制和资源配置模式及公共治理任务可以发现,事务属性结构及其变迁,使得无论条块还是层级组织,均难以实现事务的清晰治理。县级组织为了规避治理风险,借用合法性强的网格化政策,实现了新时期调适性治理。网格化管理的问题在于,县域组织无法实现有效协同,从而加剧了基层权责不协调问题,引发"有组织不负责任"现象。放眼未来,只有当权责失调的治理问题逐步得到化解,网格化管理才能发挥其应有的技术效应。     

《难经》针法中的阴阳五行观

阴阳五行学说贯穿《难经》针法论述的诸多方面.在针刺取穴中重视从阴引阳、从阳引阴,针刺操作中注重阴阳相配、刚柔相济,针刺方法上注重取阴养阳、取阳养阴,针刺补泻方法提出"补母泻子"和"泻南补北"等,这些对后世针法理论的发展具有重要指导意义.     

原发性脑挫裂伤后无早期意识障碍1例

1　案例资料某男 ,2 6岁。身体健壮。 1998年 1月 2 4日 6时许 ,被人用不规则形木棒打伤头部 ,自行行走 2ｋｍ后倒地昏迷 ,送医院抢救无效 ,次日 2 1时死亡。尸检所见 :尸长 177ｃｍ。头额顶枕部有广泛皮下出血 (以右侧为甚 )伴表皮剥脱 ;头顶枕部 4条挫裂创 2 5ｃｍ× 0 2ｃｍ～ 3 5ｃｍ× 0 2ｃｍ)和右顶颞部挫裂创 ( 1ｃｍ×0 2ｃｍ)深达帽状腱膜 ,右顶枕部 1处 9ｃｍ× 0 7ｃｍ和后枕部 2处 ( 3ｃｍ× 0 5ｃｍ ,3ｃｍ× 0 3ｃｍ)的挫裂创深达骨质 ;双上肢有抵抗性损伤 ,头右顶部至后枕部颅骨有 18ｃｍ× 7ｃｍ的粉碎性骨折 ,右…     

大学班集体文化建设主体研究

随着教育体制改革的深入,人们开始更多地关注如何创办优质和一流的学校。作为学校基层组织的班集体建设越来越受到人们的重视,也就是在班集体建设的过程中,班集体文化建设日益引起了广泛的重视。本文从班集体文化建设主体的角度入手,归纳、总结、分析了班集体文化建设的几个重要主体,对班集体文化建设主体的完善提出了一系列措施。     

后金融危机时期公共金融教育探究

金融危机使得人们深刻地认识到学习掌握必要的金融知识,对于更好地适应不断变化的经济和金融形势的变化是极其必要的。所以,危机过后加强公众的金融教育,提高国民的整体金融素质,对于增加居民的收入、防范金融风险、维护金融业的安全以及整个社会的和谐稳定发展都具有非常重要的意义。     

我国对外汉语教学存在的问题及对策分析

对外汉语教学是进行我国文化传播,提高我国国际地位的重要手段,具有重要的战略意义。但是,目前我国的对外汉语教学存在很多的问题,在对外汉语教学的基础理论的基础上,探讨了我国对外汉语教学的发展策略。     

低碳技术推广与专利保护的博弈——谈低碳技术专利权人应对技术推广压力的策略

随着人类工业化的推进,环境破坏问题日益严重.为了实现可持续性发展,加大环境保护力度、大力实施低碳技术已成为全球性趋势,推广应用低碳技术已成为全人类的迫切需求.目前,包括强制许可在内的低碳技术强制推广措施已见诸于众多国际条约和国内法律法规中,对于低碳技术专利权人来说,其专利权背后的经济利益面临着前所未有的威胁.如何在现有知识产权制度框架下,既符合全球低碳技术推广的要求,又能够保障自己的经济利益,对于低碳技术专利权人来说是急需解决的问题.在这一问题上,低碳技术专利权人必须主动出击,将其技术转化到实践中去.同时平衡技术推广与专利权利的保护,从而避免强制性措施对其经济利益造成冲击.     

日本“钓鱼岛列岛国有化”的法律应对

从现代国际法主权的认定依据来看,钓鱼岛列岛自明代中期后已成为我国领土,其间我国曾因《马关条约》割让台湾而于二战结束前丧失对钓鱼岛主权,但是,二战结束后,我国根据《开罗宣言》、《波茨坦公告》之规定又重新享有.1971年日美《琉球归还协定》的范围应当仅限于琉球群岛而不包括钓鱼岛.根据联合国海洋法公约以及国际法院的相关判例,钓鱼岛因其自身特殊的地理条件不适宜拥有专属经济区,在中日海洋划界上过多地考虑钓鱼岛可能会使主权纷争愈演愈烈.作为“中界岛屿”的钓鱼岛在海洋划界时原则上应当被视为“部分效力”或“零效力”,忽略钓鱼岛的海洋划界效力,更有利于中日双方解决钓鱼岛的主权归属.