快速PCR扩增体系的建立及法医学应用

目的建立快速PCR扩增体系,探讨其在法医实践中的应用价值。方法设置不同的缓冲液、酶浓度与Mg SO4浓度、热循环参数等,观察不同参数对扩增结果的影响,建立快速PCR扩增体系。使用该体系对常见检材进行STR分型,与常规方法扩增的结果比较,考察其分型准确性与扩增用时。结果本文建立的快速PCR扩增体系含DNA TyperTM19试剂盒的Primer Mix(5×)2μL;Ta KaRa试剂的Fast BufferⅡ(10×)1μL,Speed STARTMHS DNA Polymerase(5U/μL)0.3μL,Mg SO4(50mmol/L)为0.1μL。扩增程序为95℃120s;95℃2s、61℃15s,27个循环;72℃60s。结论快速PCR扩增体系分型结果准确,用时仅19min,缩短了常规扩增用时,有较大的法医学应用价值。     

八色荧光复合扩增体系构建初探

目的建立八色荧光38个基因座的复合扩增体系。方法采用八色荧光标记技术,对38个基因座Amelogenin、D5S818、D21S11、D7S820、CSF1PO、D2S1338、D3S1358、vWA、 D8S1179、D16S539、D1S1677、PentaD、TPOX、TH01、D22S1045、D18S51、FGA、D6S1043、D13S317、D12S391、PentaE、D2S441、D1S1656、D19S433、D10S1248、D11S4463、D1S1627、D3S4529、D1GATA113、D17S974、D6S1017、D4S2408、D9S2157、D6S474、D2S1776、D18S853、D20S482及D14S1434进行复合扩增,应用GA118-24B遗传分析仪进行电泳检测,应用Gene Typer V1.0软件进行数据分析。结果本文成功建立了38个基因座的八色荧光复合扩增体系,基因座间均衡性良好,阳性对照分型结果准确。结论包含38个基因座的八色荧光复合扩增体系构建成功,为后续更多八色试剂盒的开发奠定了基础。在提高我国DNA检验试剂水平、遗传分析...     

MHSeq Typer47试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用效能评估

目的探讨MHSeqTyper47试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用价值。方法采用MHSeqTyper47试剂盒对113份亲缘关系个体DNA样本进行基因座复合扩增及文库构建,使用MiSeq FGx测序仪进行测序,测得的数据应用MHTyper数据分析软件进行基因分型,计算亲缘关系指数评估该试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用效能并与GlobalFiler^TM试剂盒进行比较。结果MHSeqTyper47在三联体鉴定中CPI值1.43×10¹¹～6.15×10¹⁸,二联体鉴定中CPI值3.75×10⁵～1.53×10¹³,全同胞鉴定中CFSI值7.73×10¹～2.59×10¹⁶,三联体、二联体和全同胞关系对均与无关个体对可以完全区分。MHSeqTyper47和GlobalFiler^TM试剂盒联用在二级亲缘关系中的系统效能为0.466 2。结论MHSeqTyper47混合DNA鉴定试剂盒在一级亲缘关系鉴定中有较高的应用价值;与Glob...     

用α-珠蛋白-3′HVR探针研究DNA纹印

<正> 用α-珠蛋白-3′HVR探针,经Southern印迹法,对100名不相关个体及4个家系的32名相关个体的DNA进行了检测,所产生的DNA纹印具有高度的多态性,在132名个体中无一相同。家系分析表明,DNA片断严格按照孟德尔方式遗传。该探针的应用,将在法医亲子     

内蒙古呼伦贝尔汉族人群18个STR位点遗传多态性

短串联重复序列（STR）是广泛存在于人类基因组中具有高度多态性的遗传学标记[1-3],常用于人类遗传学和法医学研究,其等位基因频率具有地区差异性。本文采用DNATyperTM19试剂盒（公安部物证鉴定中心研制）[4-7],对内蒙古呼伦贝尔市汉族人群18个STR位点的遗传多态性进行调查,旨在为相关检验提供数据。     

05式警用转轮手枪弹壳接触DNA检验方法的比较

目的比较05式警用转轮手枪弹壳表面接触性DNA检验方法,为实际检验提供参考和借鉴。方法制备40例击发后手枪弹壳的模拟样本,分别用两步转移法提取弹壳表面不同部位检材,采用两种DNA提取法和两种扩增试剂盒对样本进行STR分型检验,比较评价检验结果。结果避开发射药残留区域采用两步转移法提取样本,有助于提高检出率;Chelex-100联合Microcon-100法提取模板DNA的产量最高可达1.18ng,高于Mini M48试剂盒法(0.91ng);MiniFilerTM试剂盒的等位基因检出率(23.61%)高于IdentifilerTM试剂盒(6.41%)。结论采用选择适当区域提取检材,采用Chelex-100联合Microcon-100法提取DNA,经MiniFilerTM试剂盒扩增,进行弹壳接触DNA分型的效果较好。     

香港特区政府化验所生化组的质量保证体系

香港特区政府化验所生化组自1991年起参加美国CTS(Collaboraive Testing Service Inc)和英国Cellmark Di-agnostics的资格测试,历年均合格.他们通过了ASCLD(American Society of Crime Laboratory Directors)的质量保证体系认证.ASCLD的认证是极为严格的,通过后还定期进行检查,通过ASCLD认证的实验室出具的检验报告非常具有权威性.以下对他们的质量保证体系进行简介(参照其《质量保证手册》).1 人员化验所生化组由15人组成,分级很明确,有两名高级化验师、5名化验师和8名技术员组成,高级化验师负责全组的行政及技术管理工作,具体案件分发给化验师.每个化验师带1名技术员,化验师指导技术员做具体检验工作.任何新到生化组的人员都要经过培训,盲测达标后才能上岗.每年全组人员还要参加国际性的资格测试.     

限制性组合分析法推定男女混合斑中个体分型初探

混合斑是指包含两私或两名以上个体的混合生物检材,红多数情况下,此类检材的DNA分型往往表现为两人或多人的混合分型,使结果分析较为复杂[1]．本义尝试采川2005年国际法医遗传学会（ISFG）推荐的关于混合斑结果分析中的计算方法对混合斑案件中单一个体DNA分型结果进行分析。     

HaeⅢ和HinfⅠ酶解DNA指纹图的比较——一例乱伦案的亲子鉴定

<正> DNA指纹技术已经在法医生物物证鉴定中被日益广泛地应用。从理论上说,两种不同的限制性内切酶酶解同一个体DNA产生完全不同的指纹图,虽有这方面的一般性报道,但无进一步的研究。作者用α—珠蛋白-3’HVR探针比较了HinfI和HaeⅢ酶解的DNA指纹图,并将此结果应用于案例鉴定,报道如下。     

法医DNA鉴定实验室质量控制和质量保证

1　ＤＮＡ鉴定实验室质量控制和质量保证基本原则1 1　技术原则技术原则是ＤＮＡ鉴定实验室质量控制和质量保证标准的主要原则 ,也是ＤＮＡ鉴定实验室质量控制和质量保证标准的具体要求体现 ,它对ＤＮＡ鉴定实验室中的人员、实验方法、检验程序、实验设备等有明确详细的要求。世界上ＤＮＡ检测技术比较发达的国家都相应采用了一些国际组织制订的标准或自己订立标准 ,比较有影响的ＤＮＡ鉴定实验室质量控制和质量保证标准是美国国家研究委员会推荐的ＤＮＡ鉴定实验室质量控制和质量保证标准以及欧洲ＤＮＡ分析技术工作组发布的质量控制及质量…