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为构建A型口蹄疫病毒(FMDV)多抗原表位杆状病毒表达载体,将A型FMDV上5个B细胞表位(VP1140-160aa、VP270-80aa、VP352-67aa、3B29-42aa和3D16-30aa)和4个辅助性T细胞表位(VP1200-213aa、VP420-34aa、3A21-35aa和3D346-370aa)通过人工合成的方法串联起来构建复合多表位基因B。然后将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac HTB。将酶切和测序鉴定正确的阳性重组质粒pFastBac HTB-B转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将PCR鉴定正确的重组杆状病毒质粒利用CellfectinⅡReagent转染至Sf9细胞。通过间接免疫荧光试验和Western-blot检测表达情况。结果显示,能够得到与A型FMDV猪抗阳性血清结合的蛋白,大小约为22.3ku,与预期结果相符。结果表明,成功构建了A型FMDV多抗原表位杆状病毒表达载体,并在昆虫细胞中正确表达,为下一步蛋白纯化奠定了基础。 相似文献
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目的 采用网络药理学、分子对接及体外实验验证的方法,探讨肉桂酸治疗慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)的潜在靶点及作用机制。方法 通过网络药理学在线数据库预测肉桂酸靶点及CHF靶点,取交集靶点于String数据库构建蛋白互作网络,通过Cytoscape 3.7.2软件进行可视化分析,筛选出核心靶点,使用Metascape数据库进行GO和KEGG富集分析,预测肉桂酸治疗CHF的作用机制,采用分子对接技术及体外实验验证上述结果。结果 网络药理学分析结果发现,肉桂酸潜在靶点187个,与6 094个CHF疾病靶点相交,得到132个交集靶点,涉及CASP3、JUN、PTGS2、MMP9、TLR4等10个核心靶点。GO和KEGG富集分析显示,肉桂酸治疗CHF的作用主要与细胞对活性氧的反应、对氧化应激的反应等生物过程有关,涉及细胞凋亡等信号通路。分子对接结果显示,肉桂酸与10个核心靶点均具有良好的结合活性。体外实验结果显示,肉桂酸能显著降低心肌细胞H9c2凋亡率及活性氧水平(P<0.05),降低c-Jun、PTGS2、MMP9、TLR4 mRNA表达水平(P<0.05)和caspase-9、caspase-3、Bax蛋白表达水平(P<0.05),升高Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05);使用乙酰半胱氨酸后,细胞凋亡率、活性氧水平及Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),与肉桂酸作用一致。结论 肉桂酸能够调节多个信号靶点、抑制心肌细胞氧化应激损伤及细胞凋亡,发挥治疗CHF的作用,肉桂酸是苓桂术甘汤防治CHF的重要物质基础之一。 相似文献
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在马克思主义民族话语体系下,民族具有历史性、特征性和发展性,奠定了民族实体理论的基础。我国学者于20世纪80年代提出了民族实体理论,包括民族属性、民族特征、民族结构、民族意识等相关概念。目前来说,中华民族已经成为一个有着共同的语言、共同的地域、共同的文化、共同的经济生活等自然属性的社会主义民族实体,并发展出了鲜明的和合和大一统心理特征。同时,中华民族又是有着强烈民族自我认同意识的多元一体结构的民族实体。在中华民族和各民族单元都为民族实体的现实语境下,因国家发展目标的确立和现代民族国家建构的需要,更应铸牢中华民族共同体意识,加强中华民族的实体建设。 相似文献
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正中央纪委监察部网站开设每周通报栏目,点名道姓曝光违反中央八项规定精神的案件,形成震慑和警示。但也有网友提出疑问,说近期公布的部分案件情节轻微,为何在雷霆万钧查办腐败大案要案的情况下,还要着眼于这些看上去很微小的违纪行为?其实,熟悉医学的人都明白癣疾难除的道理。一些看似不太严重的皮肤疾病,却很难根治,往往会反复发作;而治疗癣疾需在症状消失之后,有较长一段时间的用药, 相似文献
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正国家助学金设立的初衷是为了缓解部分家庭经济困难,无法支付正常的学费和基本生活费的高校大学生的经济压力。2007年5月,《国务院关于建立健全普通本科高校高等职业学校和中等职业学校家庭经济困难学生资助政策体系的意见》出台,从政策上扩大了家庭经济困难学生的资助力度和资助覆盖的学生人数。据教育部全国学生资助管理中心网的数据统计显示,2015年全国学生资助总额已经突破了1 500亿元,8 400多万人次学生获资助,其中,全国普通高校学生资助总额达到了847亿元,比上一年增长130亿元,增幅达到18%。 相似文献
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正20世纪80年代初期,在国家的区域发展战略上,曾经提出"一线一轴"的构想,其中,一轴即为长江。2014年,"打造黄金水道,建设长江经济带"被写入政府工作报告。长江是中国第一、世界第三大的河流。长江黄金水道贯通东中西部、通航能力强,目前干线货运量约20亿吨,位居世界内河第一,为莱茵河、密西西比河的10倍和4倍。国家实施长江经济带战略,这是在"西部大开发"、振兴东北老工 相似文献
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