鸡白细胞介素-6-2嵌合基因的融合表达及其表达产物活性的研究

为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方法对表达的rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白(重组融合蛋白)进行纯化。采用间接ELISA方法检测重组融合蛋白分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体的特异性免疫反应活性,采用MTS法检测重组融合蛋白体外促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示,成功构建了ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因及其重组表达质粒rpQE-30-ChIL-6-linker-ChIL-2,表达的重组融合蛋白的分子质量约为40ku,纯化后的纯度在96%以上。该重组融合蛋白可分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体发生特异性免疫反应,并具有显著的促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞增殖活性,其活性优于任一重组蛋白对照。本研究结果初步证明了rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在对鸡免疫细胞的增殖作用方面与rChIL-6和rChIL-2蛋白的作用相似,为进一步研究rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。     

环境多元主体共治的集体行动、网络结构及其模式演变 ——基于杭州与合肥都市圈的观察

在具有空间和领域外溢性的环境问题治理中,多元主体共治模式逐渐成为国家和地方打破环境污染治理困局的重要政策途径,因此在理论上需要进一步审视多元主体在环境共治中的行为本质,将主体间关系结构融入区域治理网络层面,从而识别并揭示区域环境共治中的多元主体集体行动逻辑与发展方向。在集体行动及其网络属性的理论探讨基础上,文章以杭州与合肥两个都市圈为案例,从共治主体的同质性与均衡性及网络结构的紧密性与依附性角度,对该区域环境共治网络的结构属性和演化形式进行分析。研究发现目前杭州与合肥都市圈的环境治理模式分别实现了由单核凸显型和松散参与型向多元协同型的演变,以政府为核心主体引导、多元主体共同参与的协同型治理模式成为未来环境共治的有效路径走向。     

论警务革新对刑事微罪案件立案的影响

在世界警务革新的趋势下,我国的警务革新也在悄然进行。我国警务革新有其独特的复杂性,不仅要继续沿着专业化、现代化的道路前进,还要积极应对后现代警务革新因素的挑战。社区警务、问题导向警务的引入将柔化刑事微罪立案的处置边界,其优越之处是有利于社会纠纷的化解、丰富刑事微罪案件的处置方式。但应注意,基于我国警务变革所处的特定阶段以及刑事法治环境的特色,警察刑事微罪案件的立案裁量空间不宜过大,不能逾越基本的法律界限及主要的社区警务,问题导向警务活动宜集中于侦查阶段,而非立案阶段。     

网游超级IP进击“共享经济”

2019年12月26日上午,备受关注的《梦幻西游》网络游戏直播侵权纠纷在广东省高级人民法院进行公开宣判,二审驳回上诉,维持原判,网易获赔2000万元。无独有偶,盛趣游戏(原盛大游戏)也很"同步"地对外高调发布了《传奇》维权进展:两个月三地法院接连胜诉,明确《传奇》在华权益归属世纪华通。这个公告的时间节点是2019年12月23日,纯属偶遇,却并非巧合。     

对党忠诚与建言行为:公职人员的“忠谏”之路

习近平总书记在全国组织工作会议上指出:"贯彻新时代党的组织路线,建设忠诚干净担当的高素质干部队伍是关键。"忠诚是干部队伍建设质量的根本前提。根据"信仰—态度—行为"的内在逻辑,这里的忠诚可诠释为对党忠诚、组织忠诚和建言行为。论文聚焦三者之间的关系,借助"行为公共管理学"的研究视角,通过问卷调查法(N=409),探讨公职人员群体"忠"与"谏"之间的作用机制及其边界条件。结果发现:(1)对党忠诚正向作用于建言行为(组织建言和政策建言);(2)组织忠诚部分中介对党忠诚与建言行为的正向关系;(3)公共服务动机正向调节对党忠诚与政策建言、组织忠诚与政策建言的正向关系,其中,前者的调节是以组织忠诚为部分中介;(4)中庸价值取向正向调节对党忠诚与组织建言、政策建言的关系,这一调节亦通过组织忠诚的中介实现。基于这些结果,论文提出"忠而后谏"机制以及"公心促忠谏"与"中庸助忠谏"效应,以更好地理解中国场景下的公共组织建言行为规律。     

视频业维权乱象

针对视频网站产业的知识产权难题,业内共同的目标应是有朝一日彻底清除盗版,而非以＂维权＂之名炒作自己、打压对手     

实时荧光定量PCR检测硅藻UPA基因在溺死诊断中的研究

目的建立硅藻UPA条形码基因的实时荧光定量PCR检测方法,探讨其在溺死诊断中的应用价值。方法对Gene Bank中登录的硅藻UPA基因序列进行比对获得同源序列,据其设计硅藻门通用引物。对2种人体常见共生菌(大肠杆菌、双歧杆菌)、3种浮游细菌、15种浮游藻类、32具尸体(其中生前溺水死亡28例,死后抛尸1例,陆地死亡3例)的组织样本(肺、肝、肾)及尸体发现地水样提取DNA,采用设计的引物进行特异性、灵敏度、重复性试验,分析检材中硅藻检出情况,统计硅藻阳性率,以上述组织样本的微波消解-真空抽滤-自动扫描电镜法检测结果对建立的q PCR检测方法进行比较评估,比较该方法与PCR-毛细管电泳检测法的灵敏度。结果引物UPA99仅对硅藻标准株(针杆藻、舟形藻、直链藻、小环藻、菱形藻)DNA具有扩增,扩增产物熔解曲线平稳,峰尖且窄,熔解温度为(87±1)℃。以p MD18-T重组质粒为标准品,检测区间为1.56×10~2-1.56×10^-5ng/μL,建立实时q PCR方法的灵敏度为1.56×10^-5ng/μL,而PCR-CE方法的灵敏度为1.56×10-3ng/μL。批间及批内变异系数均低于2%,具有较高的重复性和稳定性。对于生前溺水尸体肺、肝、肾的检出率依次为89.3%,71.4%,64.3%。结论基于硅藻UPA基因设计通用引物,建立的q PCR硅藻检验法特异性高、灵敏度高、重复性好,应用于溺死诊断具有较好的应用前景。     

殚精竭虑谋报国——记爱国民主人士唐伯球

45年前,有一位民主人士为振兴湖南工矿事业殚精竭虑,后步入政界,与程潜密切配合,为湖南和平解放作出贡献。他,就是第一届、第二届湖南省政协副主席、省参事室主任唐伯球。少年立志,走工业救国之路唐伯球,原名启虞,后改名伯球,字以行,1891年3月1日生于湖南省桃源县漆家河乡。其父为前清秀才,唐幼年随父读《三字经》、《幼学琼林》等启蒙读物,由此唐伯球养成了爱读书的习惯,看到什么书都喜爱阅读,小小年纪即从书本上获得了许多知识。清末,其父在常德与人兴办高等普通学校,并任国文教员。11岁的唐伯球,随父入校就读,与林伯渠同学,并与覃振结为…     

嗐,你这忙人

当今之世,连空气中也弥散着物化的浮嚣之气。人们都在忙,忙得连串门的闲暇都没了。我们知道,你也忙,一年三分之二的时间五湖四海地在外忙,不知“忙”进兜里多少实惠。你看,连你的胃也忙破