猪脑心肌炎病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

为了建立猪脑心肌炎病毒(EMCV)的检测方法,根据GenBank中EMCV 3D基因的保守序列设计并合成1对引物和1条TaqMan探针,经过反应条件的优化,建立了该病毒的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。该方法线性关系好,以重组质粒标准品构建的标准曲线的相关系数达到0.998;敏感性高,检测下限为10copies/μL,比普通PCR敏感100倍;特异性强,只有EMCV呈阳性,而与猪口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、BHK-21正常细胞均无交叉反应;重复性好,组内与组间的变异系数均小于1.5%。应用所建立的检测方法,对猪源EMCV GXLC株人工感染小鼠的脑、心、脾中的病毒载量进行了检测,同时对临床采集的153份可疑病料进行了检测。结果表明,本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于EMCV的检测及定量分析。     

埃塞俄比亚社区警务

一、情况简介埃塞俄比亚社区警务以阿姆哈拉州为代表,不仅是一项深入人心的伟大工程,而且可以帮助政府消除政治权力带来的不良影响。1.开展情况埃塞俄比亚社区警务的开展主要体现在以下两个方面:一方面,国家在积极发展和传播社区警务政策。令人信服的是,这项社区警务政策在埃塞俄比亚全国范围内为民众提供了更多获得警务服务的机会,即便是一些生活在非常偏远地区的民众也能获得机会。     

鱼腥草素钠诱导临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡

目的 观察鱼腥草素钠对临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡的影响。方法 利用DAPI染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞核的形态；利用FITC-VAD-FMK染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞metacaspase活性；分别在JC-1染色和DCFH-DA染色下，采用流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，MMP)和活性氧(reactive oxygen species，ROS)水平；利用Annexin Ⅴ-FITC/PI染色和流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞的凋亡率。结果 一定浓度的鱼腥草素钠作用下，临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内ROS水平、生物膜细胞凋亡率、metacaspase酶活性明显升高，MMP水平明显降低，生物膜细胞核出现碎裂和皱缩。结论 鱼腥草素钠能够诱导耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡。     

小儿智力咀嚼片提取工艺研究

目的优选小儿智力咀嚼片的最佳提取工艺。方法以远志酸的含量为指标,利用正交设计法考察溶剂种类、溶剂用量、提取时间以及提取次数对实验的影响,确定最佳提取工艺参数。结果最佳提取工艺参数为:以60%乙醇为溶剂,加10倍量,提取0.5 h,提取2次。结论该工艺可用于小儿智力咀嚼片的提取。     

正交试验法优选大血藤提取工艺

［摘要］目的 优选大血藤的最佳提取工艺。方法 以干膏得率和红景天苷的含量为指标，采用正交设计法考察溶剂用量、提取时间以及提取次数对干膏得率和红景天苷含量的影响，确定最佳提取工艺。结果 最佳提取工艺参数为：加6倍量水，提取3次，每次提取1 h。结论 优选的提取工艺切实可行，可以作为大血藤的提取工艺。