多头带绦虫TPx基因片段的克隆及原核表达

从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个氨基酸.对TmTPx基因片段进行限制性酶切后连接到表达载体pGEx-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠杆菌DH5a后筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,以IPTG进行诱导表达,用SDS-PAGE分析表达产物.结果显示,成功表达了大小约为43 ku的融合蛋白.对表达产物纯化后免疫家兔,采集血清用ELISA测定抗体效价,发现兔抗TmTPx重组蛋白的抗体能够与多头蚴原头节抗原发生特异性反应,说明该重组蛋白具有较好的免疫原性.     

东亚的变化与中日关系

冷战结束后,东亚的国际关系格局与地区政治发生了重大的结构性调整与变化。美苏相互对抗的两极体制逐渐消失,中美关系的重要性日益显现;中国的经济持续增长,国际地位迅速提高,对日本的影响力构成严峻挑战;与东南亚区域主义的有所上升形成鲜明对照,东北亚主要国家民族主义持续高涨。上述调整和变化,使日本逐步走上疏华、厌华甚至反华、制华的道路,最终导致中日关系的紧张与恶化。     

应用TmAdh3重组蛋白建立绵羊脑多头蚴病间接ELISA诊断方法的研究

为评价多头带绦虫TmAdh3重组蛋白作为脑多头蚴病诊断抗原的潜力,根据多头带绦虫TmAdh3基因组序列,人工优化合成TmAdh3基因ORF序列并连接至表达载体pGEX-4T-1,转化至大肠杆菌BL21中诱导表达,利用Western-blot分析纯化的重组蛋白的反应原性,优化检测条件,建立脑多头蚴病间接ELISA诊断方法并进行评价。结果显示,成功表达了分子质量大小为39.0 ku的重组蛋白rTmAdh3。间接ELISA检测的最适反应条件为：5.00μg/m L重组蛋白rTmAdh3在4℃包被过夜;1∶100稀释血清在37℃孵育30min;1∶10 000稀释的HRP标记的酶标二抗在37℃孵育45 min,底物避光显色10 min。应用建立的方法可检测到人工感染脑多头蚴后第3～8周的绵羊血清;对40份自然感染脑多头蚴的绵羊（剖检确认脑部有包囊）血清的阳性检出率为22.5%(9/40)。与细粒棘球蚴感染绵羊血清和细粒棘球蚴Eg95免疫绵羊血清交叉反应率为5%(4/80)。结果表明,本研究建立的以TmAdh3重组蛋白作为检测抗原的间接ELISA诊断方法可用于绵羊脑多头蚴感染早期的筛选。     

西藏那曲地区旋毛虫分离株的分子分类鉴定

从西藏那曲地区旋毛虫抗体阳性藏猪获取膈肌组织,显微镜检查后采用人工消化法收集旋毛虫肌幼虫。提取旋毛虫基因组,以旋毛虫(T.spiralis)和乡土旋毛虫(T.nativa)标准株为对照,应用线粒体核糖体小亚基及大亚基RNA特异引物进行PCR扩增,结果扩增产物为650bp,与T.spiralis一致。对西藏那曲旋毛虫分离株的5SRNA内转录间隔区基因进行PCR扩增及序列测定,与GenBank数据库中已知的旋毛虫序列进行比对分析,确定其分类地位。结果扩增到735bp的片段,与T.spiralis的相似性达到99%,仅有3个核苷酸不同,可以归为一类。结果表明,西藏那曲旋毛虫分离株应该属于T.spiralis。     

知识共享协议在博客上的应用

博客是互联网发展的产物。虽然从本质上来讲,博客空间内作品的著作权也受著作权法规制,但由于其在网络的大背景下,具有自己独特的版权问题。为了能使互联网上公众与作者的利益能够得到平衡,可以引入知识共享协议。     

中美各自的成功是彼此的机遇

<正>2023年11月14日至17日,习近平主席应美国总统拜登邀请赴美国旧金山举行中美元首会晤,同时应邀参加亚太经合组织（APEC）第三十次领导人非正式会议。这是习近平主席时隔六年再次访美,也是当选国家主席后第五次赴美。在国际社会变乱交织、中美关系出现前所未有的新变数之际,习近平主席的此次旧金山之行为呈螺旋式下跌的中美关系尽快回到健康、稳定、可持续发展轨道谋局定向,     

变乱交织时代何以维护和践行多边主义——深入学习《习近平谈治国理政》第四卷

多边主义的要义是国际上的事由大家共同商量着办,世界前途命运由各国共同掌握。多边主义的发展是国际社会由丛林法则支配的相互对立与对抗的关系转变为以制度规则协调相互利益的和平与合作关系的重要原因。当今世界变乱交织,维护和践行多边主义,推动构建人类命运共同体,是解决错综复杂时代难题,化解历史罕见多重危机的唯一正确选择。多边主义能够最大限度满足与实现各国人民要和平安全不要对立冲突、要公平正义不要强权政治、要开放包容不要封闭排他、要互利共赢不要唯我独尊的美好愿望与不懈追求。作为新兴市场国家与发展中国家的代表,中国始终站在人类正义一边,站在历史正确一边,维护和践行多边主义,在百年未有之大变局中发挥了稳定的建设性作用和积极引领作用。     

《全国法院审理债券纠纷案件座谈会纪要》相关问题探析

2020年7月最高人民法院发布的《全国法院审理债券纠纷案件座谈会纪要》,是我国债券法律框架体系当中具有里程碑式的司法解释性质文件,有利于债券纠纷案件的审理,确保金融公平的实现,维护金融稳定与安全,并进一步提高金融效率.债券投资者适当性以及债券法的域外效力等债券监管法律问题,有待于下一步立法进行完善.     

三项工程之我见

今年3月份，为进一步深化创先争优活动、加快推动首都科学发展，市委提出在全市开展领导干部“领航工程”、基层党组织“聚力工程”和共产党员“先锋工程”，为组织动员全市党组织和党员干部服务保障首都科学发展，建立了有效载体。北京市在全国率先提出以三项工程为载体深化创先争优活动，旨在将创先争优工作落到实处，是新时期加强和改进党的基层组织建设的一种创新和尝试。本刊特约部分区县的组织部长就三项工程的意义和实施情况谈自己的感受。