牛轮状病毒VP6蛋白间接ELISA检测方法的建立

采用反转录-聚合酶链反应扩增了牛轮状病毒NCDV株VP6基因,将其定向插入原核表达载体pProHTa中,构建了重组表达载体pProHTa-NCDV-VP6,重组菌经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,目的蛋白获得表达,表达的蛋白大小约52ku,且有生物活性。以纯化的重组VP6蛋白作为包被抗原,建立了检测牛轮状病毒血清抗体的间接ELISA方法,并与传统的琼脂扩散试验进行了比较。结果显示,建立的间接ELISA的敏感性较琼脂扩散试验高1×104倍。表明,该间接ELISA的建立为牛轮状病毒感染血清抗体的检测提供了一种简单、快速、灵敏的方法。     

表达传染性腔上囊病病毒VP2蛋白重组乳酸菌的构建及其免疫保护效果

为探讨表达传染性腔上囊病病毒(IBDV)VP2蛋白重组乳酸菌的口服免疫效果,采用RT-PCR方法扩增了1株IBDV流行毒株的VP2基因,再分别亚克隆到干酪乳杆菌和乳酸乳球菌的表达载体pPG2和PNZ8112中,并分别电转化干酪乳杆菌L.casei393和乳酸乳球菌NZ9000的感受态细胞,构建了重组菌pPG2-VP2/L. casei393和PNZ8112-VP2/NZ9000.分别经20 g/L乳糖和1 ng/mL的乳链菌肽诱导表达后,对菌体裂解物进行了SDS-PAGE和Western-blot分析.结果显示,重组菌pPG2-VP2/L.casei393和pNZ8112-VP2/NZ9000的裂解物中分别出现大小约为53 ku和50 ku的反应带,大小均与预期结果相符,表明目的蛋白在重组菌中得到了表达.重组菌pPG2-VP2/L. casei393和pNZ8112-VP2/NZ9000分别口服免疫SPF雏鸡后,均刺激机体产生了特异性抗IBDV VP2蛋白的血清抗体;攻毒保护试验结果显示,其保护指数分别为62.5%和37.5%,表明重组菌免疫雏鸡后,对IBDV的攻击均具有不同程度的免疫保护作用.     

涉婚姻登记行政诉讼起诉期限的适用

在婚姻登记行政诉讼中,对超过起诉期限问题的处理有不同方式,存在突破起诉期限限制而径行实体裁决的情形,影响了司法权威与司法公正。针对婚姻登记起诉期限适用中存在的价值选择、是否主动审查起诉期限以及无效之诉是否受起诉期限限制等争议,本文提出审查认定婚姻登记行政诉讼起诉期限的思路,在准确把握行政诉讼起诉期限蕴含的法律精神基础上,依法主动审查起诉期限,准确认定起诉期限起算时限,超过5年起诉期限的,原则上不予审查,但请求对2015年5月1日之后作出的婚姻登记行为确认无效的除外;同时,为促进婚姻登记争议实质化解,积极发挥司法建议、法律释明作用,引导当事人通过行政纠正或检察监督等程序处理。     

β- D- 葡萄糖苷酶对5种菊花总黄酮的影响

目的 基于菊花传统加工过程中“杀酶保苷”的炮制原理,研究在不同炮制过程中,β- D- 葡萄糖苷酶对不同药用菊花总黄酮的影响。方法 模拟抑制酶、激活酶、杀灭酶的加工炮制原理,分别与不同药用菊花总黄酮进行反应,并以乙腈- 0.2%醋酸水为流动相进行梯度洗脱,通过高效液相色谱法分别对不同炮制后的药用菊花总黄酮进行含量测定。结果 与激活酶组相比,黄酮苷类成分木犀草苷、芹菜素苷、香叶木苷在抑制或灭活酶组所测得含量升高,其相应的次级苷元类成分木犀草素、芹菜素、香叶木素、金合欢素含量降低。结论 5种菊花总黄酮在抑制或灭活酶的条件下有利于黄酮苷的保存。     

试论中国梦与中国精神的相互关系及其当代价值

中国梦内蕴着深刻的精神内涵和精神动力,是凝聚中国精神的伟大旗帜。中国精神作为中华儿女在长期的历史发展过程中形成的具有民族特点和时代特色的知、情、意的精神统一体,是推动中国梦的强大精神动力。中国梦和中国精神相互促进,辩证统一于中国特色社会主义的伟大实践当中。     

温州公安城域物联网建设与应用

基于物联网的传感技术和数据处理技术,通过采用低成本、低功耗、高可靠、高性能的物联网芯片技术及精准定位技术,构筑一张基于物联网的城域治安管控网,提升公安机关对治安要素的信息获取、传输、存储、处理能力,实现公安机关基础工作转型升级,率先开创物联网技术地市级公安机关规模化应用的新局面。     

加强养老服务人才队伍建设的对策建议

<正>人才队伍建设是养老服务业可持续发展的关键,也是养老服务业发展的第一要素。本文通过在上海市、北京市、杭州市、西安市、洛阳市、武汉市的实地调研,总结和分析目前我国养老服务人才队伍建设中存在的问题,并提出相应的对策建议。     

关于实行民主集中领导制度遇到的问题与对策思考

民主集中制是我党的根本领导制度,其核心是集体领导与个人分工负责相结合。《中国共产党章程》指出:党的各级委员会实行集体领导与个人分工负责相结合的制度。凡属重大问题都要按照集体领导、民主集中、个别酝酿、会议决定的原则,由党的委员会集体讨论,作出决定。我们党的各级     

特斯拉难跨“充电坎”

马斯克不遗余力地给中国消费者描绘一幅美丽图景,声称遍布各地的超级充电站可以在40分钟内为用户的Model S跑车补充80%的电能。绿色、免费、快捷……似乎这一切已经触手可及。