尼帕病毒截短G蛋白的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

以截短的尼帕病毒（NiV）G基因原核表达产物为抗原建立检测尼帕病毒抗体的间接ELISA检测方法。对编码尼帕病毒G蛋白基因的部分序列进行扩增,将扩增获得的目的片段克隆至原核表达载体pET-30a（+）,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)。菌落PCR鉴定后,在最佳诱导条件下表达目的蛋白。用Ni-NTA柱纯化截短的G蛋白,并进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。以纯化的蛋白为抗原建立尼帕病毒抗体间接ELISA检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性、稳定性进行验证。结果显示：成功构建重组质粒pET-30a(+)-NiV-G;表达的尼帕病毒截短G蛋白分子质量为50 ku,与预期值相符;截短的G蛋白能被His-tag抗体、抗尼帕病毒G蛋白粗提IgG识别。以该蛋白为包被抗原建立的间接ELISA检测方法检测已知阳性血清尼帕病毒抗体效价为1︰20 480,裂谷热病毒、西尼罗病毒及克里米亚-刚果出血热病毒阳性马血清的检测结果均为阴性,且该方法批内、批间试验变异系数均小于10%。结果表明,成功构建了重组质粒pET-30a(+)-NiV-G,并诱导表达尼帕病毒截短G蛋白。以该蛋白建立的尼帕病毒抗体...     

问心无愧

人生的最高境界,并非遥不可及、高不可攀,简要来说,即"问心无愧"。千万别小看了这个"愧"字,就算你赚了大钱,做了大官,出了大名,真要是心底积了一层又一层的"愧",这些老鼠屎迟早会打坏一大锅香汤。愧则有悔,愧则有疚,悔疚则伤及神明,内心的安宁从此遭     

现阶段执政党的青年政策和青年工作探讨

现阶段青年与社会之间的基本矛盾及其具体表现是青年政策和青年工作的客观依据.执政党和共青团的青年政策的基本目标和青年工作的基本任务是以科学发展观为指导,在正确认识和处理社会与青年双向乃至多向的相互制约、相互促进关系的基础上,促进青年发展与社会发展的良性互动,实现青年与社会的和谐发展.     

论原生态民间巫舞“担经挑”的传承和发展

＂担经挑＂是流传于河南淮阳地区的一种原生态民间巫舞,已经被列为国家非物质文化遗产保护之一,近年来这种舞蹈在保留民间祭祀、祈福还愿的基础上,有了新的发展变化,如舞者的人数、唱词、舞步等。本文通过对其发展特点进行梳理,将从文化传承的角度来谈如何更好地继承和发展它。     

东北亚区域经济贸易发展面临的新机遇、新挑战与对策

近年来,国内外对中国东北地区重要性的认识日益高涨。特别是东北地区的几个重要地方战略陆续被升级为国家战略,据此各地开始了很多大项目建设。日本的经济界人士也深切感受到了上述变化,对该地区的关注增强,以考察和调查为目的的来访者日益增加。如何将与包括日本在内的该区域各国的合作具体化成为重要课题。在上述背景下,衷心期待本届论坛能够成为畅所欲言及提出可操作性建议、切实推进具体合作的重要盛会。     

全世界只有一个陈香梅

有这样一位女中豪杰，破纪录和保持纪录一直是她的拿手好戏：     

“跳水冠军”曾国藩

数年前,我观看奥运会跳水直播节目,有位朋友说：“这跳水也有讲究吗？”我脑袋里灵光一闪,急中生智,立刻回答他：“两千多年前,屈原跳汨罗江,那个高难度动作惊世骇俗,跳出了中国的端午节,牛不牛？一百多年前,曾国藩跳湘江,那个动作同样高难度,跳出了湘军的处子秀,也不容易.有这样远近两位祖师爷和总教练传下‘葵花宝典’,要是不涌现出几个跳水冠军,就真没天理了.”在场的朋友闻言大笑.     

关系的本质与选择:基于一项实验的考察

关系研究目前呈现多元发展的态势,关系本质这个研究维度的推进仍有待深入。基于一个大学本科班集体课业游戏中分组问题的考察,本文尝试从中提出在关系的情感性、工具性之外,还有一个非常重要的属性:契约性或曰结构性。关系的本质就是关系的契约性(或结构性)、情感性、工具性三个维度演进、凸显、变化的过程。关系三维度的暴露和展现遵循一定的原则,对这些原则的探索,有利于把握组织和群体中的派系问题,对关系管理、关系建构等的理解也会有所助益。     

创造时间

日常生活中,常听到有领导抱怨说没时间.是生活得太过充实了吗?并非如此.在我看来,说自己没时间的人,事实上是缺乏“合理分配时间”的能力,工作毫无“计划性”可言.若是上司的话,则证明此人不具备将“权力下放”给部下的气度.或者,仅仅对于自己能胜任的“喜欢做的工作”情有独钟、埋头苦干,对其他工作一概置之不理.     

尊重人的脆弱

物性脆弱,不难认知。相比于石头,鸡蛋是脆弱的;相比于炸弹,石头是脆弱的;相比于时间,炸弹是脆弱的。无论从哪个起点开始,唯有时间处于终端,绝对强大,连死神都莫奈它何,只能退避三舍。